NEIL3肽及包含它的疫苗制造技术

本发明专利技术提供了分离的自SEQ?ID?NO：45衍生的肽或片段，其结合HLA抗原和诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。这样的肽可包括上文所述氨基酸序列中替代、删除或添加一个、两个、或数个氨基酸而得到的序列。本发明专利技术还提供了包含这些肽的药物组合物。本发明专利技术的肽可用于诊断或治疗癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请要求2009年3月18日提交的美国临时申请No. 61/210，512的权益，通过述及将其全部内容收入本文。本专利技术涉及生物科学领域，更具体的说是癌症治疗领域。具体而言，本专利技术涉及新的肽(它们作为癌症疫苗极其有效)和用于治疗和预防肿瘤的药物。
技术介绍
已经证明，⑶8阳性CTL能识别自主要组织相容性复合物(MHC)I类分子上的肿瘤相关抗原(TAA)衍生的表位肽，然后杀死肿瘤细胞。从TAA的第一个例子——黑素瘤抗原(MAGE)家族被发现起，通过免疫学手段已经发现了许多其它TAA(NPL 1/Boon Τ, Int J Cancer 1993 May 8,54(2) :177-80 ;NPL2/Boon T&van der Bruggen P, J Exp Med 1996 Mar 1,183(3) :725-9)，而且这些TAA中的一些目前正处于作为免疫治疗靶标的临床开发过程中。能诱导强力且特异性的抗肿瘤免疫应答的新TAA的鉴定保证了针对各种类型癌症的肽疫苗接种策略的临床应用的进一步开发(NPL 3/Harris CC, J Natl Cancer Inst 1996 Oct 16,88(20) :1442-55 ；NPL 4/Butterfield LH et al. ,Cancer Res 1999 Jul 1， 59(13) :3134-42 ；NPL 5/Vissers JL et al. , Cancer Res 1999Nov 1,59(21) :5554-9; NPL 6/van der Burg SH et al.，J Immunol 1996 Mayl，156(9) :3308-14 ；NPL 7/Tanaka F et al.，Cancer Res 19970ct 15,57(20) :4465-8 ；NPL 8/Fujie T et al.，Int J Cancer 1999 Jan 18,80(2) :169-72 ;NPL9/Kikuchi M et al. ，Int J Cancer 1999 May 5,81(3) 459-66 ；NPL 10/0iso M et al. ,Int J Cancer 1999 May 5,81(3) :387-94)。迄今为止，已经报告了数项使用这些肿瘤相关抗原衍生的肽进行的临床试验。不幸的是，迄今为止在这些癌症疫苗试验中只能观察到较低的客观响应率(NPL 11/Belli F et al. ,J Clin Oncol 2002 Oct 15,20(20) :4169-80 ；NPL 12/Coulie PG et al.，Immunol Rev2002 Oct,188 33-42 ；NPL 13/Rosenberg SA et al.，Nat Med 2004 Sep,10(9) :909-15)。癌细胞增殖和存活不可缺少的TAA适合作为免疫疗法的靶标，因为使用此类TAA 可使广为记载的癌细胞免疫逃避的风险最小化，癌细胞的免疫逃避可归于因治疗驱动的免疫选择而发生的TAA删除、突变、或下调。另一方面，Nei内切核酸酶VIII样3 (NEIL3)已经作为属于一类与细菌 Fpg/Nei家族同源的DNA糖基化酶的成员得到分离(NPL 14/Bandaru et al.，DNA Repair(Amst). 2002Jul 17 ；1(7) :517-29)。这些糖基化酶通过经关联裂合酶反应切割受反应性氧种类损害的碱基并引入DNA链断裂来启动碱基切除修复中的第一步。NEIL3有可能在DNA修复机制中发挥作用，然而，尚未阐明它与致癌作用的关系。引用表非专利文献Boon T, Int J Cancer 1993 May 8,54(2) :177-80Boon T&van der Bruggen P, J Exp Med 1996Mar 1,183(3) :725-9Harris CC,J Natl Cancer Inst 1996 Oct 16,88(20) :1442-55Butterfield LH et al. , Cancer Res 1999 Jul 1,59(13) :3134-42Vissers JL et al. , Cancer Res 1999 Nov 1,59(21) :5554-9van der Burg SH et al. ，J Immunol 1996 May 1,156(9) :3308-14Tanaka F et al. , Cancer Res 1997 Oct 15,57(20) :4465-8Fujie T et al. ， Int J Cancer 1999 Jan 18,80(2) :169-72Kikuchi M et al.，Int J Cancer 1999 May 5,81(3) :459-66Oiso M et al. ， Int J Cancer 1999 May 5,81(3) :387-94Coulie PG et al.，Immunol Rev 2002 Oct, 188 :33-42Rosenberg SA et al. ，Nat Med 2004 Sep,10(9) :909-15Bandaru et al.，DNA Repair (Amst). 2002 Jul 17 ； 1(7) :517-29专利技术概述本专利技术至少部分基于适用的免疫疗法靶标的发现。由于TAA—般被免疫系统视为 “自身”，因此常常没有免疫原性，所以发现适宜的靶标是极其重要的。如上所述，NEIL3(由 GenBank登录号NM_018M8(例如SEQ ID NO 44)的基因编码的SEQ ID NO 45)已经被鉴定为在癌症，诸如膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌、结肠直肠癌、子宫内膜异位症、食道癌、肝癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、骨肉瘤、胰腺癌、前列腺癌、肾癌、小细胞肺癌(SCLC)、软组织肿瘤、急性髓样白血病(AML)和慢性髓样白血病(CML)，中上调。因此，NEIL3是癌症/ 肿瘤免疫疗法的候选靶标。本专利技术至少部分基于NEIL3的基因产物的拥有诱导对NEIL3特异性的CTL的能力的特定表位肽的鉴定。如下文详细讨论的，使用自NEIL3衍生的HLA-AM402或HLA-A*0201 结合候选肽刺激从健康供体获得的外周血单个核细胞(PBMC)。然后建立了具有针对经每一种候选肽冲激的HLA-AM或HLA-A2阳性靶细胞的特异性细胞毒性的的CTL系。这些结果证明，这些肽是能诱导针对表达NEIL3的细胞的强力且特异性的免疫应答的HLA-AM或 HLA-A2限制表位肽。另外，它指明，NEIL3具有强免疫原性，而且它的表位是癌症/肿瘤免疫疗法的有效靶标。因而，本专利技术提供了分离的能与HLA抗原结合的肽，该肽由NEIL3(SEQID NO :45) 或其免疫学活性片段组成。这些肽预期具有CTL诱导能力且可用于离体诱导CTL或用于施用给受试者以诱导针对癌症的免疫应答，所述癌症诸如膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、胆管细胞癌、子宫内膜异位症、肝癌、NSCLC、骨肉瘤、胰腺癌、SCLC和AML。优选地，那些肽是九本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种结合ＨＬＡ抗原且具有细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）诱导能力的分离的肽，其中该肽由ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４５的氨基酸序列或其免疫学活性片段组成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：角田卓也，大泽龙司，吉村祥子，渡边朝久，中村佑辅，古川洋一，
申请(专利权)人：肿瘤疗法科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：JP