用于检测或监测急性肾损伤的方法、装置和试剂盒制造方法及图纸

检测个体急性肾损伤的方法包括（ａ）将所述个体的体液样品与包括嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ＮＧＡＬ）抗体和可检测标记的测定装置接触，以使得样品中的ＮＧＡＬ蛋白与ＮＧＡＬ抗体复合；和使用可检测的标记确定样品中的ＮＧＡＬ蛋白与测定装置中的ＮＧＡＬ抗体之间形成的复合物的量，其中装置中的ＮＧＡＬ抗体具有与超过两种ＮＧＡＬ蛋白表位结合的能力，并且所形成的复合物的量代表急性肾损伤的水平。确定个体样品中ＮＧＡＬ蛋白来源的方法包括确定样品中ＮＧＡＬ蛋白的单体、二聚体和异二聚体形式的相对量的步骤，从而使改进的诊断和更好的靶向治疗成为可能。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于检测或监测急性肾损伤的方法、装置和试剂盒；特别是涉及这样的方法和试剂盒，其基于对嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)(亦称作人嗜中性粒细胞脂质运载蛋白(HNL))的测量。
技术介绍
急性肾损伤(AKI)是严重的病症，其可在手术后发生，例如作为心脏手术或肾移植的并发症；作为体内引入诊断剂的副作用，例如X光造影剂、或肾中毒治疗剂等；和/或与其它医学病症相关联，例如糖尿病、败血病、出血性休克等。举例来说，急性肾损伤在高达 30%的所有经历心脏手术的患者中发生，并且关联了高死亡率、更复杂的住院过程、透析依赖性、生活质量下降、以及更高的感染性并发症风险。尽管在急性肾衰竭早期引入治疗已经显示降低死亡率和/或缩短治疗方案，但通常很难在早期检测到急性肾衰竭。在目前的临床实践中，AKI的标准诊断被称为RIFLE(增加(Rise)、损伤( jury)、 衰竭(Failure)、丧失(Loss)、末期肾病(End-stage renal disease))，其是基于血清肌酸酐的提升或者尿液输出的减少。血清肌酸酐是一般肾功能的可靠标志物，但它在肾功能的急性变化中是不可靠的并且是延迟的指标。幸运地是，已经发现了数种有希望的新生物标志物，包括HNL/NGAL (此后称为NGAL)、肾损伤分子_1、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、和IL-18。NGAL蛋白作为急性肾损伤标志物的用途已经受到了大量的关注。NGAL是糖蛋白， 最初被鉴定为嗜中性粒细胞特异性颗粒成分以及脂质运载蛋白家族的蛋白成员。该蛋白显示出以25-kDa的单体和45-kDa 二硫键连接的同二聚体存在，它还可以通过分子间二硫桥与嗜中性粒细胞明胶酶(亦称为基质金属蛋白酶9，MMP-9)共价复合成135-kDa的异二聚体形式。NGAL 由 Xu 等(Journal of Immunological Methods，171 :245-252 (1994))首次将描述为HNL，作为体内和体外的嗜中性粒细胞活性的特异性标志物；并被用做炎症的诊断标志物(Venge，美国专利号6，136，526，其在此引入作为参考)。最近，Devarajan等人(美国专利公开号 2004/0219603A1 和 2005/0272101A1) 公开了 NGAL作为肾小管细胞损伤和其他肾疾病和损伤的生物标志物的用途。BioBorto Diagnostics, Gentofte, Denmark最近提供了用于急性肾衰竭早期诊断的“NGAL ELISA Kit”、以及小鼠单克隆抗人NGAL抗体和小鼠单克隆抗大鼠NGAL抗体。此外，Dent等人(Critical Care, 11(6) :R127 (2007))描述了来自 Biosite Inc. , San Diego, CA 的 Triage NGAL装置，利用与荧光纳米颗粒缀合的NGAL特异性单克隆抗体，用于作为急性肾损伤生物标志物测量NGAL。然而，在检测和/或监测急性肾损伤方面的进一步提高是有需要的。专利技术概述因此，本专利技术提供用于检测急性肾损伤和用于对急性肾损伤治疗的效果进行监测的方法、装置和试剂盒。在一个实施方案中，本专利技术涉及用于检测个体中急性肾损伤的方法，包括(a)将来自所述个体的体液样品与包括嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体和可检测标记的测定装置接触，以使得样品中的NGAL蛋白与NGAL抗体复合；和(b)使用可检测的标记来确定样品中的NGAL蛋白与测定装置中的NGAL抗体之间形成的复合物的量，其中装置中的NGAL抗体具有与超过两种NGAL蛋白表位结合的能力，并且其中所形成的复合物的量代表急性肾损伤的水平。在另一个实施方案中，本专利技术涉及用于检测个体中急性肾损伤的方法，包括(a) 将来自所述个体的体液样品与多克隆嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体接触，和(b)使用可检测的标记来确定样品中的NGAL与多克隆NGAL抗体之间形成的复合物的量，其中复合物的量代表急性肾损伤的水平。在另外的实施方案中，本专利技术涉及用于对急性肾损伤治疗的效果进行监测的方法，包括以下步骤(a)将来自所述个体的第一体液样品与包括嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体和可检测标记的第一测定装置接触，以使得第一样品中的NGAL 蛋白与NGAL抗体复合，(b)使用可检测的标记来确定第一样品中的NGAL蛋白与第一测定装置中的NGAL抗体之间形成的复合物的量，其中装置中的NGAL抗体具有与超过两种NGAL蛋白表位结合的能力，(c)将治疗开始后从所述个体获得的第二体液样品与包括NGAL抗体和可检测标记的第二测定装置接触，以使得第二样品中的NGAL蛋白与NGAL抗体复合，(d)使用可检测的标记来确定来自第二样品的NGAL与第二测定装置中的NGAL抗体之间形成的第二复合物的量，其中装置中的NGAL抗体具有与超过两种NGAL蛋白表位结合的能力，和(e) 比较第一复合物的量与第二复合物的量，其中与第一复合物的量相比第二复合物量的降低表明治疗是有效的。在另外的实施方案中，本专利技术涉及用于对急性肾损伤治疗的效果进行监测的方法，包括以下步骤(a)将治疗前从所述个体获得的第一体液样品与多克隆嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体(NGAL)接触，(b)使用可检测的标记来确定来自第一样品的 NGAL蛋白与多克隆NGAL抗体之间形成的第一复合物的量，(c)将治疗开始后从所述个体获得的第二体液样品与多克隆NGAL抗体接触，(d)使用可检测的标记来确定来自第二样品的 NGAL与多克隆NGAL抗体之间形成的第二复合物的量，和(e)比较第一样品中的NGAL与多克隆NGAL抗体之间形成的第一复合物的量和第二样品中的NGAL与多克隆NGAL抗体之间形成的第二复合物的量，其中与第一复合物的量相比第二复合物的量降低表明治疗是有效的。在另外的实施方案中，本专利技术涉及用于检测个体中的急性肾损伤的试剂盒。在一个实施方案中，试剂盒包括测定装置，该测定装置包括嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体和可检测的标记，所述可检测的标记适用于确定体液样品中的NGAL与 NGAL抗体之间形成的复合物的量，其中装置中的NGAL抗体具有与超过两种NGAL蛋白表位结合的能力。在另一个实施方案中，试剂盒包括适于与体液样品接触的第一多克隆嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体、适用于确定体液样品中的NGAL蛋白与第一多克隆NGAL抗体之间形成的复合物的量第二 NGAL抗体、和适用于确定体液样品中的NGAL与第一多克隆NGAL抗体之间形成的复合物量的可检测标记。在另外的实施方案中，本专利技术涉及用于检测个体中急性肾损伤的测定装置，包括固定于基材上并适于与体液样品接触的多克隆NGAL抗体、和适于对NGAL蛋白与固定的多克隆NGAL抗体的复合物进行结合的可检测标记。由于本专利技术的这些方法、装置和试剂盒使用具有与超过两种NGAL蛋白表位结合能力的NGAL抗体，所述方法和试剂盒出人意料地显示出对作为生物标志物的NGAL的敏感性的改善，并因而在急性肾损伤的检测中显示出改善的敏感性。这种改善的敏感性可以提供对此类损伤的更早期的检测，从而会使得更早期的治疗应答成为可能。在另外本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．用于检测个体中急性肾损伤的方法，包括（ａ）将来自所述个体的体液样品与包括嗜中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ＮＧＡＬ）抗体及可检测标记的测定装置进行接触，以使得样品中的ＮＧＡＬ蛋白与ＮＧＡＬ抗体复合；和（ｂ）使用可检测的标记确定来自样品的ＮＧＡＬ蛋白与测定装置中的ＮＧＡＬ抗体之间形成的复合物的量，其中装置中的ＮＧＡＬ抗体具有与超过两种ＮＧＡＬ蛋白表位结合的能力，并且其中所形成的复合物的量代表急性肾损伤的水平。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·文吉，
申请(专利权)人：法蒂亚公司，
类型：发明
国别省市：SE