测定血液中的γ－Ｇｌｕ－Ｘ（Ｘ为氨基酸和胺）肽类的浓度或ＡＳＴ、ＡＬＴ的值，由该测定值进行例如多元逻辑回归，从而鉴定健康人、药物性肝损伤、无症状乙型肝炎携带者、无症状丙型肝炎携带者、慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、肝癌、非酒精性脂肪肝病（ＮＡＦＬＤ）、非酒精性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、单纯性脂肪肝（ＳＳ）等肝病。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及，特别是，涉及将各种肝病患者与健康人识别开从而能够进行筛选的肝病标记物、其测定方法、装置和使用了该肝病标记物的医药品的检验方法。
技术介绍
肝病包括药物性肝炎、乙型、丙型肝炎、肝硬化、肝癌等多种多样的肝病，另外还存在无症状的乙型、丙型病毒的携带者。特别是，七成的丙型肝炎病毒(HCV)感染者由于慢性的肝脏的炎症(慢性肝炎)而逐渐丧失正常的肝细胞，肝脏纤维化，然后发展为肝硬化，进而甚至发展为肝癌。据报道，在10-15%的丙型慢性肝炎患者、80%的肝硬化患者中会产生肝癌。虽然慢性肝炎的状态下不会对生命造成危险，但若产生肝癌，或者肝硬化发展而引起肝功能衰竭的话，则生命的危险迫在眉睫。因此，需要在早期诊断丙型肝炎，驱除病毒。丙型肝炎会无症状地从肝硬化发展为肝癌，肝脏的功能极度降低，产生倦怠感、黄疸、意识障碍等各种障碍，但目前在该阶段还没有有效的治疗法。因此，需要在肝脏的功能恶化前，尽早检测症状的发展，实施干扰素给药等治疗等。但是，现状是尚未确立可正确且迅速地鉴定各种肝病的方法。通常若被怀疑是肝病，会进行问诊、视诊、触诊，同时测定血中的AST、ALT、Y-GTP、 碱性磷酸酶(AL-P)、胆碱酯酶(ChE)、胆红素等肝功能标记物。这些生物化学检查值存在异常时，进行乙型或丙型肝炎病毒检查、超声波检查、X射线、CT等图像检查。癌的判定中测定血中的AFP、PIVKA-II、CEA等蛋白质的肿瘤标记物。此外，需要正确判断的情况下，进行腹腔镜检查、肝活检(需要住院一周左右)(非专利文献1)。这样为了鉴定肝病，必须接受许多检查，在得到判断之前需要花费数天。另外，腹腔镜检查和肝活检还会将患者暴露于危险之下，使其遭受肉体的痛苦。腹腔镜检查和肝活检对患者的负担较大，因此不能为了进行病情的确认等而频繁进行。此外，在现有方法中， 许多检查和判断必须由专家来进行，将负担强加于短缺的医疗工作者。因此，强烈期望一种不对患者造成负担、迅速、正确且简便的肝病的判断方法。已知的是，肝炎、肝硬化、肝癌等许多肝损伤都是因活性氧的生成(氧化应激)和将其除去的生物体的防御系统的破绽而引起的(非专利文献幻。针对活性氧等氧化应激的生物体的防御中的主要一种是由谷胱甘肽系统产生的。作为组织中以最高浓度存在的抗氧化物质，有还原型谷胱甘肽(GSH 以下称为谷胱甘肽)，通过谷胱甘肽与活性氧、亲电物质结合，这些物质被还原，氧化应激得到抑制。但是，若谷胱甘肽减少，则组织、细胞暴露于氧化应激中，会引起各种病情(非专利文献3)。据报道，实际上肝损伤中也会因乙型或丙型肝炎病毒的感染，氧化应激亢进，谷胱甘肽减少，或者在丙型肝炎、肝硬化、肝癌的患者或小鼠中谷胱甘肽减少(非专利文献2、 4)。通过服用药物而诱发的药物性肝炎也会因氧化应激而引起。解热镇痛药扑热息痛(APAP)在肝脏代谢，生成高毒性的亲电物质N-乙酰对苯醌亚胺(NAQPI)。该NAQPI通过与在肝脏中以高浓度存在的谷胱甘肽(GSH)结合，从而被解毒、排泄掉。但是，亲电物质大量存在的情况下，谷胱甘肽会枯竭，亲电物质在细胞内蓄积(氧化应激)，与生物体高分子反应。其结果，已知细胞的功能紊乱，引起药物性肝炎等病态。迄今为止专利技术人发现若对小鼠大量投与APAP，则为了将由APAP的代谢生成的亲电物质NAQPI解毒，谷胱甘肽减少，视晶酸与之成反比地剧增(参见图1的(B))，肝脏和血中的视晶酸的增加表明肝脏的谷胱甘肽由于亲电物质而枯竭(专利文献1、非专利文献5)。其机制如下所述。如图1所示，谷胱甘肽(Y -Glu-Cys-Gly)和视晶酸 (y-Glu-2AB-Gly)是由相同的两种酶即Y _谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶生物合成的三肽，差别在于底物(起始物质)为半胱氨酸(Cys)或2-氨基丁酸QAB)。在图 1的(A)所示的通常的还原状态下，肝脏内大量存在谷胱甘肽，最初的酶Y-谷氨酰半胱氨酸合成酶被反馈(FB)抑制。因此，视晶酸几乎不被生物合成。但是，如图1的(B)所示的氧化状态那样，若存在亲电物质或活性氧种，则由于解毒而消耗谷胱甘肽。通过谷胱甘肽的减少，反馈抑制被解除，Y -谷氨酰半胱氨酸合成酶活化，谷胱甘肽和视晶酸被生物合成。视晶酸在肝脏内蓄积，还排泄到血中。这样通过亲电物质等而形成氧化状态时，肝脏或血液的视晶酸增加，因此视晶酸成为氧化应激的生物标记物。另外，还有文献报道，在因肥胖而内脏脂肪增加从而出现问题的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中，氧化应激标记物的血清硫氧还蛋白(TRX)对于由肝硬化向肝癌发展的非酒精性脂肪肝炎(NASH)和有一个良性过程的单纯性脂肪肝(SQ的识别有用(非专利文献 6)。另一方面，根据基于毛细管电泳-质谱仪(CE-MS)的试样中的代谢物质测定法的、 细胞内的代谢物质的网罗性的测定方法(例如，参见非专利文献7 9)，为了监测人或动物的身体状态，定性地且/或定量地确定来自该人或动物的身体的液体样品的低分子化合物 (代谢物质)模式和/或肽模式，这里，该液体样品的代谢物质和肽通过毛细管电泳而被分离，接着直接被离子化，然后用通过接口与计算机连接的质谱仪进行检测。为了长期监测该人或动物的身体状态，将表示该状态的参照值和样品值、以及由该值导出的偏差和一致性自动存储于数据库中。在组合毛细管电泳和质量分析而对阴离子性化合物进行分离分析的情况下，已知一种阴离子性化合物的分离分析方法，其特征在于，使用毛细管的内表面预先包覆为阳离子性的包覆毛细管，将电渗流反转(例如，参见专利文献2)。现有技术文献专利文献专利文献1 日本特开2007-192746号公报专利文献2 日本专利第3341765号公报非专利文献非专利文献1 :Callewaert, N. et al. Nat. Med. 10，429-434，2004.非专利文献2:Loguercio，Carmela et al. Free Radic. Biol. Med. 34,1-10, 2003.非专利文献 3 Yadav, Dhiraj et al. Am. J. Gastroenterol. 97，2634-2639，2002.非专利文献4 :Moriya，K. et al. Cancer Res. 61，4365-4370，2001.非专利文献5 :Soga，Τ· et al. J. Biol. Chem. 281,16768-16776, 2006.4非专利文献6 谷川久一编“氧化应激和肝病〈第5卷>”Medical Tribune公司， 3-37 页，2009. 5. 7.非专利文献 7 :Soga, Τ. et al. J. Proteome Res. 2. 488-494，2003.非专利文献8:Soga，T.et al. J. Boil Chem. Vol. 281, No. 24, (June 16， 2006)16768-16776非专利文献 9 :Hirayama，A. et al. Cancer. Res. 69 (II). (Junel, 2009)4918-4925非专利文献 10 :Pignatelli,B. et al. Am. J. Gastroenterol. 96,1758-1766, 2001.本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种肝病标记物，其特征在于，其为用于检测哺乳动物的组织中的氧化应激的标记物，并且其为γ－Ｇｌｕ－Ｘ肽，Ｘ为氨基酸和胺。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾我朋义，
申请(专利权)人：学校法人庆应义塾，
类型：发明
国别省市：JP
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