影响饱腹感、脂类代谢和脂肪利用的组合物和方法技术

本发明专利技术提供（１）在给予影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的脂肪酸酰胺的动物体内差别表达的基因和（２）涉及鉴定影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的新化合物的基因的应用的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术通常涉及在动物体内差别表达的基因，特别涉及在定期地和长期地给予影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的脂肪酸酰胺的动物体内差别表达的基因，涉及差别表达的基因在识别影响所述参数中的一项或多项的新化合物中的应用，涉及在动物体内调节相关的表现型。相关领域说明 脂肪过多和肥胖被认为是世界范围内的人类健康问题。世界卫生组织估计有超过十亿超重的成人，其中仅少于三分之一被划分为肥胖。此外，肥胖也日益被认为是动物的问题，特别是伴侣动物如狗和猫的问题。根据疾病控制中心(CDC)，肥胖至少与其他的健康问题的风险密切相关，所述的其他的健康问题包括高血压、血脂异常、II型糖尿病、心脏病、中风、睡眠呼吸暂停和某些癌症，例如乳腺癌、子宫内膜癌和结肠癌。个体变肥胖的危险因素包括遗传学、情绪/压力、进食过量和久坐的生活方式。随着对与过度肥胖相关的风险的公共交流的增加，至少在20年前就开始了与肥胖的斗争。已经建立并且重新确立了营养推荐量，其得到了广泛地传播、甚至在学校中被教授。然而，肥胖和超重的人的数量仍在增加。除了健康的饮食和更有规律的体力活动，现在经常开出减肥药物处方。这些药物在不同水平上发挥作用，其包括模拟胃饱满、降低食欲或限制脂肪吸收。然而，部分由于随着时间效果降低和不希望的副作用出现，尚未发现这些药物满足长期治疗。至少基于这些原因，患者对抗肥胖药物的顺应性不能令人满意。显然，在本领域中需要发现并开发新的抗肥胖的药物或膳食补充剂。脂肪酸酰胺(FAE)或N-酰基-乙醇酰胺是含有连接到乙醇胺上的脂肪酸部分的结构上相关的脂质。FAE是天然存在的脂质家族，其在植物和动物组织中发现，表现出对健康的作用，例如调节能量平衡、控制食物摄取和抗炎性质。FAE也在体内由N-乙酰化磷脂酰-乙醇酰胺衍生物形成。在生物组织(例如脑和神经元细胞)中发现的最普遍的FAE是花生四烯酸乙醇胺(anandamide) (N-花生四烯酰-乙醇胺)和N-油酰-乙醇酰胺(OEA)。 在食物中也发现了少量的0ΕΑ，并且其主要来自于内源性合成(Di Marzo V，1999，Life Sci. 65 :645-55)。在啮齿动物中，报道了腹膜内给予OEA诱导饱腹感和脂质底物的外周利用，从而导致身体脂肪获取减少(Thabuis C等，2007，脂质技术(Lipid Technology) 19 :225-7)。 体外研究和敲除动物模型已经揭示出作用的某些机制，例如PPAR-α信号(Fu J等人， 2003，Nature 425 :90-3)、近侧小肠的 FAT/CD36-依赖的脂质摄取(Yang Y 等人，2007，AmJ Physiol Regul Integr Comp Physiol. 292 :R235_41)、选择性神经元激活(Ahern GP, 2003，J Biol Chem. 278 :30似9-34)和生长激素释放肽(ghrelin)信号传导(Cani PD等人， 2004，Br J Nutr. 92 :757-61)。近侧小肠似乎是饱腹感控制的靶器官(ThabuisC等人，如上)。已经表明OEA调节野生型小鼠的食物摄取，但却不调节PPARa (-/-)小鼠的食物摄取。 最近发现OEA也能够结合到G-蛋白偶联的大麻素受体GPR119上(Overton HA等人，2006， Cell Metab. 3 :167-75)。当腹膜内施用时，OEA通过影响若干参数来减少食物摄取食量的下降、首餐摄取的延迟、和用餐间隔的增加(Oveisi F等人，2004，Wiarmacol Res. 49 461-6)。OEA 口服施用的作用也在急性管饲法施用后M小时进行了检验，并且已经表现出在最初12小时(Id)期间显著减少的食物摄取。然而，前述的研究仅仅在短时期(对于腹膜内施用，6小时至11天；对于口服施用，M小时)内进行，迄今尚未显示出对饱腹感或与身体脂肪相关的其他参数的长期作用。考虑到处理肥胖的现行方法的问题，一直需要用于筛选物质从而决定其是否可能用于促进动物的非肥胖表现型和使用该物质调节动物的脂肪组织的量的新的方法和组合物。专利技术概述 因此，本专利技术的目的是提供1种或多种在具有表现型的动物体内差别表达的基因或基因片段，所述的表现型包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加(RBF/IS表现型)，这是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的。本专利技术的另一个目的是提供组合产品，其包括多种在具有表现型的动物体内差别表达的多核苷酸，所述的表现型包括由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的RBF/IS表现型。本专利技术的另一个目的是提供2种或更多种多核苷酸或多肽探针和装置(如含有探针的基质阵列)的组合物，所述的多核苷酸或多肽探针适合于检测在具有RBF/IS表现型的动物体内差别表达的基因的表达，所述的RBF/IS表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的。本专利技术的进一步的目的是与正常的或未处理的动物相比，提供检测在具有RBF/ IS表现型的动物体内差别表达的1种或多种基因的差别表达的方法，所述的RBF/IS表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的。本专利技术的另一个目的是与正常的或未处理的动物相比，提供测量试验物质对在具有RBF/IS表现型的动物体内差别表达的1种或多种基因的表达特性的影响的方法，所述的RBF/IS表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的。本专利技术的进一步的目的是提供促进动物的RBF/IS表现型的方法。使用多核苷酸或多肽的新组合实现一个或多个这些其他的目的，所述的多核苷酸或多肽代表在具有RBF/IS表现型的动物体内差别表达的基因或基因片段，所述的RBF/IS 表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的。用多核苷酸得到组合物、探针、基于探针的装置和测定在具有RBF/IS表现型的动物体内差别表达的多核苷酸的状态(与正常的或未处理的动物相比)，其用于实现以上所确定的目的(例如预测和诊断与表现型相关的情况)，并且用于筛选测定是否可能用于促进表现型的物质。一旦确定，这些物质可以用于促进表现型。也提供了各种试剂盒，其包含探针、利用探针的装置和物质的组合，以及用于处理信息的各种计算机程序和涉及差别表达的基因的交流信息的交流工具及其使用方法。本专利技术的其他和进一步的目的、特征和优点对本领域的技术人员而言是很明显的。专利技术详述 定义 除非另有特别说明，本文出现的全部百分数按基于干物质的组合物的重量计。技术人员理解术语“基于干物质”是指在除去组合物中的任何游离水分后测定组合物中成分的浓度。为了避免不得不详细地陈列和描述每一个范围和范围内的每一个值，本文使用速记法表示的范围。能够选择范围内的任意合适的值，在合适时，可以是较大的值、较小的值或范围的端值。除非另有说明，否则本文出现的剂量是以毫克或克/千克体重(mg/kg或g/k本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种组合产品，其包含多种的多核苷酸，所述的多核苷酸在具有包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加的表现型（ＲＢＦ／ＩＳ表现型）的动物体内差别表达，所述的表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的，其中所述多核苷酸选自编码表１或表２中所列的蛋白质的基因、或其片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US61/188,9072008年8月14日1.一种组合产品，其包含多种的多核苷酸，所述的多核苷酸在具有包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加的表现型(RBF/IS表现型) 的动物体内差别表达，所述的表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的，其中所述多核苷酸选自编码表1或表2中所列的蛋白质的基因、或其片段。2.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码表1或表2的A组中所列的蛋白质的基因、或其片段。3.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码表1或表2的B组中所列的蛋白质的基因、或其片段。4.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码表1或表2的C组中所列的蛋白质的基因、或其片段。5.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及脂质氧化的蛋白质的基因。6.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及脂肪生成的蛋白质的基因。7.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及脂质转运的蛋白质的基因。8.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及胰岛素信号转导的蛋白质的基因。9.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及控制食物摄取的蛋白质的基因。10.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及脂肪酸乙醇酰胺代谢或信号转导的蛋白质的基因。11.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸选自编码涉及葡萄糖代谢的蛋白质的基因。12.权利要求1的组合产品，其中所述的物质被定期摄入至少4周。13.权利要求1的组合产品，其中至少每天1次摄入所述的物质。14.权利要求1的组合产品，其中所述的物质是脂肪酸酰胺。15.权利要求14的组合产品，其中所述的物质是N-油酰-乙醇酰胺或其抗水解衍生物。16.权利要求15的组合产品，其中所述的物质是(Z)-(R)-9-十八碳烯酸酰胺， N-(2-羟基乙基，1-甲基)。17.权利要求1的组合产品，其中多核苷酸是犬科动物或猫科动物的多核苷酸。18.组合物，其包含2个或更多个探针，所述的探针用于检测在具有包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加的表现型(RBF/IS表现型) 的动物体内的差别基因表达，所述的表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的，其中所述的探针包含a)多核苷酸，其特异性地杂交到2种或更多种编码表1或表2中所列的蛋白质的基因或其片段；或b)多肽结合物质，其特异性地结合到2种或更多种选自表1或表2中所列的蛋白质的多肽或其片段。19.权利要求18的组合物，其中所述的多肽结合物质是抗体。20.权利要求18的组合物，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的A组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的A组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。21.权利要求18的组合物，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的B组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的B组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。22.权利要求18的组合物，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的C组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的C组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。23.权利要求18的组合物，其中探针特异性地杂交到或者特异性地结合到编码蛋白质的多核苷酸或者包含蛋白质的多肽，所述的蛋白质的功能选自脂质氧化、脂肪生成、 脂质转运、胰岛素信号转导、控制食物摄取、脂肪酸乙醇酰胺代谢或信号转导、和葡萄糖代谢。24.权利要求18的组合物，其中所述的探针特异性地杂交到或结合到犬科动物或猫科动物的多核苷酸或多肽。25.装置，其包含固体载体，其中将包含多种探针的阵列固定到所述的固体载体上，所述的探针用于检测在具有包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加的表现型(RBF/IS表现型)的动物体内的差别基因表达，所述的表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的，其中所述的探针包含a)多核苷酸，其特异性地杂交到2种或更多种编码表1或表2中所列的蛋白质的基因或其片段；或b)多肽结合物质，其特异性地结合到2种或更多种选自表1或表2中所列的蛋白质的多肽或其片段。26.权利要求25的装置，其中所述的多肽结合物质是抗体。27.权利要求25的装置，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的A组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的A组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。28.权利要求25的装置，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的B组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的B组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。29.权利要求25的装置，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的C组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的C组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。30.权利要求25的装置，其中探针特异性地杂交到或者特异性地结合到编码蛋白质的多核苷酸或者包含蛋白质的多肽，所述的蛋白质的功能选自脂质氧化、脂肪生成、脂质转运、胰岛素信号转导、控制食物摄取、脂肪酸乙醇酰胺代谢或信号转导、和葡萄糖代谢。31.权利要求25的装置，其中所述的探针特异性地杂交到或结合到犬科动物或猫科动物的多核苷酸或多肽。32.检测动物体内1种或多种基因的差别表达的方法，与正常的动物相比，所述的动物具有包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测定的饱腹感的增加的表现型(RBF/IS表现型)，所述的表现型是由影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项的物质的长期的定期摄入所引起的，所述的方法包含a)提供探针，所述的探针包含(i)特异性地杂交到2种或更多种编码表1或表2中所列的蛋白质的基因或其片段的多核苷酸；或者(ii)特异性地结合到2种或更多种选自表1 或表2中所列的蛋白质的多肽或其片段的多肽结合物质；(b)将探针加入到包含来自具有RBF/IS表现型的动物的mRNA或蛋白质的样品中，使探针杂交或结合到样品中的mRNA或蛋白质上，从而在样品中形成杂交或结合复合体；(c)任选地，将探针加入另一个包含来自正常动物的mRNA或蛋白质的样品中，使探针杂交或结合到第二样品中的mRNA或蛋白质上，从而在另一个样品中形成杂交或结合复合体；(d)检测样品中的杂交复合体；和(e)将来自第一样品的杂交或结合复合体与来自标准品或任选地来自另一个样品的杂交或结合复合体进行比较，其中在样品中与在标准品或任选的其他样品中的杂交或结合的量之间至少有一项不同，这表明了在具有RBF/IS表现型的动物中差别表达的1种或多种基因的差别表达。33.权利要求32的方法，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的A组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的A组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。34.权利要求32的方法，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的B组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的B组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。35.权利要求32的方法，其中所述的探针特异性地杂交到编码表1或表2的C组中所列的蛋白质的基因、或其片段，或者特异性地结合到包含表1或表2的C组中所列的蛋白质的多肽、或其片段。36.权利要求32的方法，其中探针特异性地杂交到或者特异性地结合到编码蛋白质的多核苷酸或者包含蛋白质的多肽，所述的蛋白质的功能选自脂质氧化、脂肪生成、脂质转运、胰岛素信号转导、控制食物摄取、脂肪酸乙醇酰胺代谢或信号转导、和葡萄糖代谢。37.权利要求32的方法，其中所述的探针特异性地杂交到或结合到犬科动物或猫科动物的多核苷酸或多肽。38.权利要求32的方法，其中所述的探针结合到基质上。39.权利要求38的方法，其中所述的探针位于阵列中。40.权利要求32的方法，其中间隔地进行检测，并且当动物体内试图诱导RBF/IS表现型时用于监视动物的进展。41.一种方法，其测定试验物质当向动物施用时通过影响食物摄取、饱腹感、脂类代谢和脂肪利用中的一项或多项是否可能用于促进表现型，所述的表现型包括身体脂肪和血浆甘油三酯的降低和由减少的食物摄取所测...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·提索法福尔，
申请(专利权)人：雀巢产品技术援助有限公司，
类型：发明
国别省市：CH