测定方法和设备技术

提供了一种用于分析液体样本中的至少两种分析物的方法，所述方法包括以下步骤：ａ）提供基板，其中至少两种不同类型的捕捉分子被固定在基板上并且其中每一种类型的捕捉分子都具有针对一种分析物的特定亲和力，ｂ）使样本与所述捕捉分子接触，ｃ）对于要分析的至少一种分析物：在捕捉分子和针对分析物具有特定亲和力的被标记检测分子之间引发接触，并且对于要分析的至少另一种分析物：在捕捉分子和被标记形式的分析物之间引发接触，以及ｄ）测量来自于被标记检测分子和基板上的被标记分析物的可检测信号，其中被标记分析物的浓度与样本中分析物的浓度相适应。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于分析液体样本的方法和测定设备。
技术介绍
在很多测定中都需要在同一样本中同时测量两种或多种分析物的浓度。在基于亲 和力的测定例如免疫测定中同样如此。分析物经常以明显不同的浓度存在。对基于亲和力 的测定来说，由于存在源于一种分析物测量的信号可以影响源于另一种分析物测量的信号 或使之饱和的风险，因此在要同时测量不同分析物的浓度时可能会有问题。饱和可能会在包括捕捉装置的基于亲和力的测定中发生，例如在所有的捕捉区域 都被占据时发生。饱和也可能会在变送器(例如测量来自于被标记分子的荧光的传感器)饱 和时发生。在现有技术中，已经为解决在基于亲和力的测定中测量两种或多种具有明显不同 浓度的分析物的问题进行了努力。一种方法是将样本分为几等份，将其稀释为不同的浓度。 另一种方法是调节变送器、检测器或传感器对不同浓度的增益。US7271009公开了用于样本中若干生物标志物的免疫测定，包括使用颗粒物。每一 种颗粒物都涂有参与到基于亲和力的测定中的一种类型的分子。有几种类型的颗粒物，每 一种都涂有一种类型的分子。为了处理各种分析物的水平明显不同的情况，通过使用稀释 剂降低了用于某些分析物的信号。介绍了稀释剂不会介入与任何一种分析物的具体结合。 稀释剂争夺颗粒物上的可用面积并降低分析物的涂层密度。由此通过使用稀释剂而减小被 捕获的分析物分子数量。还介绍了其中某些颗粒物被涂有提高特定分析物灵敏度的试剂的 实施例。在根据现有技术发展水平的某些分析设备中，捕捉抗体或捕捉分子捕获一种或多 种分析物。将分析物结合到捕捉区域在所有捕捉区域饱和以前的平衡之前被中断以使信号 不会变得过高。在某些情况下，在要检测的至少一种分析物上只有一个可用的结合表位。尽管根据现有技术的现有工艺中对于可能必须要对几等份在若干步骤中进行稀 释的样本和/或变送器、检测器和/或传感器必须要调节以适应不同浓度水平的增益仍然 存在改进的空间，但是仍然希望能有步骤尽可能少的(例如不必在其中处理颗粒物)快速测 定方法。还希望能有不必加入稀释剂的测定方法。还希望能有可以只用一个表位来测量至 少一种分析物的测定方法。还希望能有在液体样本混合物中可以只用一个表位来测量分析 物浓度的测定方法。
技术实现思路
本专利技术的一个目标是提供一种改进的方法和一种用于实现所述方法以避免了现 有技术中的至少部分缺点的设备。所述方法和设备的优点包括不用将样本划分为必须要进行不同稀释的几等份。另一个优点是不必再为了顾及明显不同的浓度水平而调节变送器、检测器和/或 传感器的增益。进一步的优点是在基于亲和力的测定中不必再向捕捉分子中加入稀释剂。而且不 必再加入增强亲和力的添加剂。优点还包括不必再处理颗粒物，所述方法由于要执行的步骤较少而变得简单并且 易于执行。另一个优点是直到达到平衡之前都可以进行分析物分子与捕捉分子的结合。因此 在达到平衡之前不必为了使所有的捕捉区域饱和而停止结合。这样所具有的优点是不必在 精确确定的时刻停止结合。由此得到的一个优点是可以通过达到平衡来实现高精度。在根 据现有技术的工艺中，由于难以控制影响结合速率的所有参数，因此难于每一次都恰好在 相同的阶段停止结合。进一步的优点是可以测量几种分析物，其中至少一种分析物只具有一个能够结合 抗体的表位。设备制造简单并且节约成本。简易性也使所述方法非常节约成本。在第一种应用中，提供了一种用于分析液体样本中的至少两种分析物的方法，所 述方法包括以下步骤a)提供基板，其中至少两种不同类型的捕捉分子被固定在基板上并且其中每一种类型 的捕捉分子都具有针对一种分析物的特定亲和力，b)使样本与所述捕捉分子接触，c)对于要分析的至少一种分析物在捕捉分子和针对分析物具有特定亲和力的被标 记检测分子之间引发接触，并且对于要分析的至少另一种分析物在捕捉分子和被标记形 式的分析物之间引发接触，以及d)测量来自于被标记检测分子和基板上的被标记分析物的可检测信号，其中被标记分 析物的浓度与样本中分析物的浓度相适应。在第二种应用中，提供了 一种适用于所述方法的设备。本专利技术更多的应用和实施例在所附权利要求中加以确定，通过引用将它们并入本文。附图说明在以下的说明、示例和附图中更加详细地介绍本专利技术，其中 图1将相对荧光强度(RFU)作为微流体通道内位置的函数示出。图加和沘分别示出了用于NTproBNP和CRP的测定结果。图3将相对荧光强度(RFU)作为另一微流体通道内位置的函数示出。图4示出了用于cTnl和CRP的测定结果。定义在介绍本专利技术的方法和设备之前，应该理解本专利技术并不局限于特定结构、方法步骤以 及本文中公开的设备，因而结构、步骤和设备都可以在一定程度上加以改变。还应该理解本 文中使用的术语仅仅是为了用于介绍特定实施例而并不是为了加以限定，原因在于本专利技术 的保护范围应该只由所附权利要求及其等价形式限定。还有必须要注意的是，除非上下文另有清楚地说明，否则如本说明书和所附权利 要求中所用的单数形式“一个”、“一种”和“这个”也包括复数形式的限定。因此，例如对含 有“一种抗体”的反应混合物的限定包括了两种或多种抗体的混合物。在介绍和以权利要求限定本专利技术时，以下术语将根据本文中阐述的定义使用。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“大约”在用于数值语境中时表示本 领域技术人员熟悉和可接受的准确度区间。所述区间为士 10%。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“分析物”表示在分析过程中确定其 一种或多种性质的物质或者是化学或生物成分。分析物或其组分经常不能被测量，但是可 以测量分析物的可测量性质。例如，可以测量葡萄糖浓度。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“捕捉分子”表示具有结合并捕获分 析物分子的能力的分子。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“可检测组”表示在基板上存在时就 能够被检测到的任何分子或原子排列。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“可检测信号”表示能够被检测到的 任意信号，包括但不限于电磁波、电子信号、电化学信号、化学信号、磁场、放射性信号和质谱。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“检测分子”表示具有结合分析物的 能力并且包括可检测组的分子。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“被标记分析物”表示包括可检测组 的分析物。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“被标记检测分子”表示包括可检测 组的检测分子。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“样本”表示要分析的混合物或溶 液。样本的示例包括但不限于血液、血浆、血清、汗液、唾液、尿液、泪液、水样本以及食品样 本的悬浮液或溶液。如权利要求和说明书中一直使用的那样，术语“基板”表示承载构成分析物的分子 的载体。具体实施例方式在第一种应用中，提供了一种用于分析液体样本中的至少两种分析物的方法，所 述方法包括以下步骤a)提供基板，其中至少两种不同类型的捕捉分子被固定在基板上并且其中每一种类型 的捕捉分子都具有针对一种分析物的特定亲和力，b)使样本与所述捕捉分子接触，c)对于要分析的至少一种分析物在捕捉分子和针对分析物具有特定亲和力的被标 记检测分子之间引发接触，并且对于要分析的至少另一种分析物在捕捉分子和被标记形 式的分析物之间引发接触，以及d)测量来自于被标本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于分析液体样本中的至少两种分析物的方法，所述方法包括以下步骤：　　ａ．　提供基板，其中至少两种不同类型的捕捉分子被固定在基板上并且其中每一种类型的捕捉分子都具有针对一种分析物的特定亲和力，　　ｂ．　使样本与所述捕捉分子接触，　　ｃ．对于要分析的至少一种分析物：在结合至捕捉分子的分析物分子和针对分析物具有特定亲和力的被标记检测分子之间引发接触，并且　　对于要分析的至少另一种分析物：在捕捉分子和被标记形式的分析物之间引发接触，以及　　ｄ．　测量来自于被标记检测分子和基板上的被标记分析物的可检测信号，其中被标记分析物的浓度与样本中未标记分析物的浓度相适应。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J梅林，
申请(专利权)人：阿米克股份公司，
类型：发明
国别省市：SE