包含源自αｓ１酪蛋白的肽的抗焦虑组合物制造技术

药物组合物和食品，其包含具有苯二氮杂类型的活性，尤其是抗焦虑活性的源自乳的αｓ１酪蛋白的肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含源自αs1酪蛋白的肽的抗焦虑组合物本专利技术涉及包含具有抗焦虑活性的源自αs1酪蛋白的肽的药物组合物和食物组合物。通过各种不同的分级分离技术，酪蛋白产生分别称为κ酪蛋白、β酪蛋白、αs1酪蛋白和αS2酪蛋白的主要级分。这些酪蛋白的氨基酸序列是众所周知的，特别是αs1酪蛋白的氨基酸序列已由MERCIER等人(1)和NAGAO等人(2)进行了测定。已显示，这些各种不同的酪蛋白的某些肽片段具有多种多样的生物学活性，尤其是阿片剂或抗阿片剂活性，和抑制血管紧张素I转化酶的活性。因此，αs1酪蛋白的肽90-96和肽90-95具有经在体外证明的阿片剂活性[ZIOUDROU等人(3)和LOUKAS等人(4)]。第90位的精氨酸残基看起来对于该阿片剂活性是重要的。其中删除了该精氨酸残基的肽91-95和肽91-96几乎没有活性，并因此它们具有比肽90-96低得非常多的阿片剂活性。至于肽23-34和肽194-199，它们是血管紧张素I转化酶的抑制剂[MARUYAMA和SUZUKI(5)，以及MARUYAMA等人(6)]。已经在αs1酪蛋白的胰蛋白酶消化水解物中揭示出了具有抗焦虑类型的原始活性的肽[EP0714910(7)]。它相应于片段91-100，并且已被命名为α-casozepine[MICLO等人(8)]。Guesdon等人(18)还证明，酪蛋白的该同样的胰蛋白酶消化水解物(其包含肽91-100)在经受长期应激的大鼠中改善了睡眠。通过二维1H-NMR研究了该十肽的结构。包含在甘氨酸93残基和亮氨酸99残基之间的序列在胶束介质中采取310螺旋结构，其由α螺旋旋转开始和结束。疏水残基的侧链位于螺旋的相同的面上，而亲水残基的侧链位于另一个面上，这赋予该肽以两亲特征并且可以允许其与膜相互作用。精氨酸100残基的胍基团与谷氨酸96残基和精氨酸100残基的羧基基团之间的离子相互作用显示了该羧基末端精氨酸残基在螺旋状结构的稳定化中的首要作用。在这样的结构中，第91和94位的两个酪氨酸残基的芳族环以这样的方式取向，即使得它们的中心之间的距离(平均0.56nm)与在因其抗焦虑特性而知晓的硝西泮、苯二氮杂的芳族环的中心之间所观察到的距离相当[LECOUVEY等人(9)]。用丙氨酸残基置换精氨酸100残基大大地降低了该十肽的螺旋度，并由此导致该肽对于GABAA受体的苯二氮杂位点的亲和力以300,000倍的程度降低[CélineFrochot的论文(10)]。在口服吸收后，该十肽可能经历由消化道的酶施加的蛋白水解攻击，这可降低其生物利用率并因此阻碍其到达其生物学靶标。然而，对于小肽来说众所周知的是，肠细胞吸收比更大片段的肠细胞吸收更有效，并且它们对于消化蛋白酶的抗性增加。因此，在该十肽的消化过程中所产生的片段之中，某些可能是更可吸收的和更具抗性的，但是从来源于该十肽的结构数据来看，没有能够保留丝毫的抗焦虑类型的活性。未决专利申请PCT/EP2007/063863令人惊讶地表明，源自该十肽且不包含精氨酸100这一关键残基的肽91-97、91-98、91-99在大鼠中的体内行为测试中显示出抗焦虑特性。从其小的尺寸来看，这些肽是更容易可吸收的和更不容易可降解的。现在，本申请涉及具有抗焦虑特性的药物组合物和食品，其包含源自αs1酪蛋白的肽91-95和91-96。可以在大鼠中的体内行为测试中证明这些肽的抗焦虑特性。序列列表SEQIDNO.1：相应于αs1酪蛋白的位置91-95的五肽SEQIDNO.2：相应于αs1酪蛋白的位置91-96的六肽专利技术描述本专利技术的目标在于药物组合物，其包含作为活性成分的有效量的根据SEQIDNo.1的肽和/或根据SEQIDNo.2的肽，以及与之相联合的合适的药物学载体。根据本专利技术的药物组合物具有苯二氮杂类型的活性，并且更特别地适合于治疗焦虑、睡眠障碍和癫痫。在一个特别的实施方案中，本专利技术涉及包含酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物或水解物级分的药物组合物，所述水解物和所述水解物级分包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽和/或根据SEQIDNo.2的肽。本专利技术还涉及用于尤其易患焦虑、睡眠障碍和/或癫痫的人的食品，其包含有效量的至少一种根据SEQIDNo.1和/或SEQIDNo.2的肽。在本专利技术的一个有利的实施方案中，所述食品包含酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物或水解物级分，所述水解物和所述水解物级分包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽和/或根据SEQIDNo.2的肽。本专利技术的目标还在于分离的多核苷酸，其编码根据SEQIDNo.1的肽或根据SEQIDNo.2的肽。本专利技术还涉及包含根据本专利技术的多核苷酸的表达载体。本专利技术的另一个目标为用根据本专利技术的多核苷酸和/或用根据本专利技术的表达载体转化的宿主生物，不包括人。本专利技术的目标还在于表达根据SEQIDNo.1的肽或根据SEQIDNo.2的肽的经转化的宿主生物，不包括人。本专利技术还涉及根据SEQIDNo.1的肽、根据SEQIDNo.2的肽、根据本专利技术的多核苷酸、根据本专利技术的表达载体和/或根据本专利技术的宿主生物在制备用于治疗焦虑、睡眠障碍和癫痫的药物中的用途。优选地，本专利技术涉及酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物和/或酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物级分在制备用于治疗焦虑、睡眠障碍和癫痫的药物中的用途，所述水解物和所述水解物级分包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽和/或根据SEQIDNo.2的肽。优选地，所述药物具有苯二氮杂类型的活性。本专利技术的另一个目标为根据SEQIDNo.1的肽、根据SEQIDNo.2的肽、根据本专利技术的多核苷酸、根据本专利技术的表达载体和/或根据本专利技术的宿主生物在制备用于尤其易患焦虑、睡眠障碍和/或癫痫的人的食品中的用途。优选地，本专利技术的目标在于酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物和/或酪蛋白或αs1酪蛋白的水解物级分在制备用于尤其易患焦虑、睡眠障碍和/或癫痫的人的食品中的用途，所述水解物和所述水解物级分包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽和/或根据SEQIDNo.2的肽。因此，本专利技术的目标在于药物组合物和食品，其包含源自αs1酪蛋白的肽，该肽的序列表示在SEQIDNO.1和2中。因此，本专利技术涉及药物组合物和食品，所述药物组合物和食品包含其氨基酸序列选自下列的肽：Tyr-Leu-Gly-Tyr-Leu和Tyr-Leu-Gly-Tyr-Leu-Glu。本专利技术还涉及包含经修饰的肽的药物组合物和食品，所述经修饰的肽具有SEQIDNO.1或之一并且保留其抗焦虑特性。本专利技术还涉及包含融合蛋白或重组蛋白的药物组合物和食品，所述融合蛋白或重组蛋白包含根据SEQIDNo.1和/或根据SEQIDNo.2的肽。在第二个方面，本专利技术涉及编码根据SEQIDNo.1和SEQIDNo.2的肽的多核苷酸。由于遗传密码的简并性，不同的多核苷酸可以编码相同的肽。根据本专利技术，“多核苷酸”是指可以为DNA或RNA类型的单链核苷酸链或其互补链，或者可以为cDNA(互补的)或基因组类型的双链核苷酸链。优选地，本专利技术的多核苷酸为DNA类型，尤其是双链DNA类型。术语“多核苷酸”还指经修饰的多核苷酸。优选地，本专利技术的多核苷酸可以通过常规的分子生物学技术(例如由Sambrook等人(MolecularCloning：ALabratoryM本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于治疗焦虑、睡眠障碍和癫痫的组合物，其特征在于，所述组合物包含有效量的根据ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ．１的肽和／或根据ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ．２的肽作为活性成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】FR08537572008年6月6日1.根据SEQIDNo.1的肽在制备用于治疗焦虑的组合物中的用途。2.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述组合物包含酪蛋白的水解物，所述水解物包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽。3.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述组合物包含αs1酪蛋白的水解物，所述水解物包含有效量的根据SEQIDNo.1的肽。4.根据前述权利要求之一的用途，其特征在于，所述组合物包含合适的药物学载体。5.根据权利要求1-2之一的用途，其特征在于，所述组合物为食品。6.根据SEQIDNo.1的肽在...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·巴朗德拉，
申请(专利权)人：洛林国立高等理工学院，
类型：发明
国别省市：FR