本发明专利技术实现了一种可以消除免疫法的交叉反应性、解决质谱分析法的成分定量问题的免疫分析系统。将患者血清等试样（１０１）通过免疫法用前处理装置（１０３）实施前处理，然后通过免疫法用测光检测系统（１０４）进行测光。接着，通过质谱分析法用前处理装置（１０５）进行前处理，通过质谱分析检测系统（１０６）进行质谱分析。在质谱分析检测系统（１０６）中，将上清液中所包含的成分进行质谱分析。从获得的色谱图求出各成分的信号强度、峰面积，基于该相对比率，计算各成分的采用免疫法测得的定量值的明细。由此，关于免疫法中受到了交叉反应性等的影响的测定对象成分的定量值，可求出接近于真值的定量值，并且也可以定量地求出作为交叉反应性的主要原因的结构类似物质的明细。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及在临床检查中使用的免疫分析方法和免疫分析系统。
技术介绍
临床检查中普及的检查方法之一有免疫法。在免疫法中，应用特异性识别测定对象成分的抗体，采用抗体(一抗)捕捉例如检体中的测定对象成分之后，利用进一步选择性捕捉该一抗的二抗，进行检测。关于此时的检测，为了实现高灵敏度化，在二抗中附加标记。 标记有时是例如荧光物质，有时是酶化学发光所需要的物质等。由于免疫法是可以简便地高灵敏度检测的测定技术，因此适于检体中的微量成分的定量测定。另一方面，在免疫法中存在交叉反应性的问题。交叉反应性是下述现象一抗不仅捕捉本来要识别的测定对象成分，而且也捕捉例如测定对象成分的代谢物那样具有类似结构的分子。这意味着定量结果比真值高，不能准确地定量测定对象成分。特别是，在低分子化合物等情况下，交叉反应性有变显著的倾向，原因之一是，由于在抗体制作时需要通过将载体蛋白质附加在测定对象成分上来进行高分子化，因此只有除了该附加位置以外的部位可以变成表位，从而不能根据位置来识别与代谢物之间的结构差异。为了抑制该交叉反应性，要求制作可以识别各种类似结构分子的差异的一抗，但由于制作困难，并且花费成本和劳力，因此是低效的。相对于免疫法，由于质谱分析法是基于测定对象成分的质量进行测定的，因此是可以识别例如代谢物等类似结构分子的测定技术。特别是，MS/MS分析、MSn分析的方法是可以通过将测定对象成分碎片离子化来实现类似结构成分之间的高精度识别的技术。此外，在质谱分析法中，由于不需要制作抗体那样的特殊试剂，因此可以减少成本和劳力。有在利用质谱分析进行样品分析之前组合其它分析方法、处理的公知例。在质谱分析之前可实施例如蛋白质印迹法(参照专利文献1)、通过磁珠回收靶细菌(参照专利文献2)、Pull-down测定法(参照专利文献幻、有机薄膜上的靶物质的回收(参照专利文献 4)、凝胶电泳法(参照专利文献5)。专利文献1 日本特开2006-U6013号公报专利文献2 日本特表2005-5M394号公报专利文献3 日本特开2005-098830号公报专利文献4 日本特开2005-291823号公报专利文献5 :W0 2004-031759号公报
技术实现思路
本专利技术所要解决的课题质谱分析法在成分的识别检测中是优异的，另一方面，在进行该成分的定量的情况下，需要准备内标物质等。此外，在质谱分析法的情况下，由于需要将成分离子化，其离子化效率决定定量精度，因此在内标物质的选定时需要特别留意。 最优选的是稳定同位素标记后的测定对象成分本身，但不仅存在其合成要花费成本，而且存在对于不能合成的成分不能制作稳定同位素标记物的问题。因此，如果可以提供消除上述的免疫法的交叉反应性、并且可以解决质谱分析法的成分定量问题的装置和方法，则可以实现史无前例的高精度临床检查技术。本专利技术的目的是实现可以消除免疫法的交叉反应性、可以解决质谱分析法的成分定量的问题的免疫分析方法和免疫分析系统。用于解决本专利技术课题的方法为了达成上述目的，本专利技术构成如下。在免疫分析方法和免疫分析系统中，通过利用免疫分析法进行的前处理，使用抗体捕捉试样溶液中的测定对象物，从捕捉到的测定对象物中回收测定对象成分，通过质谱分析法对回收到的测定对象成分进行质谱分析，从而进行测定对象物的成分的分析。优选地，在免疫分析方法和免疫分析系统中，通过利用免疫分析法进行的前处理， 使用抗体捕捉试样溶液中的测定对象物，进行捕捉到的测定对象物的定量，从进行了测定对象物的定量后的废液中回收上述测定对象物，通过质谱分析法对回收到的测定对象物进行质谱分析，对通过上述免疫法进行了处理后的测定对象物的成分进行测定。专利技术的有益效果本专利技术可以实现消除免疫法的交叉反应性、可以解决质谱分析法的成分定量的问题的免疫分析方法和免疫分析系统。附图说明图1为本专利技术的实施例1中的试样免疫分析系统整体构成的示意图，为用于显示测定流程的图。图2为免疫法的说明图。图3为免疫法的废液处理的说明图。图4为显示他克莫司(tacrolimus)的交叉反应性和药效的图。图5为显示与患者检体的测定对象相关的数据的图。图6为显示图1所示试样免疫分析系统的装置构成例的图。图7为显示图1所示试样免疫分析系统的其它装置构成例的图。图8为显示图1所示试样免疫分析系统的其它装置构成例的图。图9为显示图1所示试样免疫分析系统的其它装置构成例的图。图10为本专利技术的实施例2中的试样免疫分析系统整体构成的示意图，为用于显示测定流程的图。图11为用于免疫法的前处理中的应用的说明图。图12为用于免疫法的从前处理产物中回收测定对象成分的说明图。图13为显示图10所示试样免疫分析系统的装置构成例的图。图14为显示图10所示试样免疫分析系统的其它装置构成例的图。图15为免疫反应处理和固相萃取处理流程。图16为涉及固相萃取处理的系统构成(俯视图)。图17为涉及固相萃取处理的系统构成(侧视图)。图18为免疫反应处理和固相萃取处理的时序。具体实施例方式以下，对于本专利技术的实施例，参照附图进行详细地说明。实施例1关于本专利技术的实施例1，对通过质谱分析法对免疫法得到的测光测定后的废液进行成分检测的例子进行说明。图1为实施例1中免疫分析系统102整体构成的示意图，为用于显示测定流程的图。将患者血清等试样101通过免疫法用前处理装置103实施前处理，然后利用免疫法用测光检测系统104进行测光。接着，通过质谱分析法用前处理装置105进行前处理，通过质谱分析检测系统106进行质谱分析。这些试样分析系统102、免疫法用前处理装置103、 免疫法用测光检测系统104、质谱分析法用前处理装置105、质谱分析检测系统106通过系统控制和数据处理用个人计算机107进行工作控制，分析结果108通过个人计算机107的显示器来显示。对于来源于生物体的试样(例如，全血、血浆、血清、尿等)中的测定对象成分，首先根据免疫自动分析法，采用免疫法用前处理装置103进行前处理，通过免疫法用测光检测系统104，通过特异性识别测定对象成分的抗体选择性捕捉。预先通过例如抗生物素蛋白-生物素结合等使抗体成为对磁性粒子结合的状态。如图2所示，关于通过磁性体210 的磁力收集介由抗体202、203、204、206捕捉到测定对象成分205的磁性粒子201，将周围的杂质等洗掉后，通过标记后的抗免疫球蛋白抗体进行夹心测定，从而通过检测器211进行测定对象成分的检测和定量。在该定量值中，由于不仅包含测定对象成分引起的值而且包含例如以来源于该成分的代谢物为主的结构类似物质等的交叉反应性引起的值，因此倾向于显示比本来要求出的测定对象成分的定量真值高的值。因此，通过将由免疫法捕捉到的试样或由免疫法得到的测定后的废液进行再利用，通过质谱分析法求出其中包含的显示交叉反应性的物质等成分明细(相对比率)，从而从由免疫法求出的定量值，以接近于真值的值分别计算出被捕捉到的成分的定量值。在质谱分析法用前处理装置105中，从免疫法所使用的试样(废液)中回收测定对象成分。例如，将免疫测定后的废液通过酸处理、碱处理、离子强度处理等，使抗原抗体反应解离，使抗原(测定对象成分)从抗体游离。进而，如图3所示，再次通过磁性粒子301 的磁力收集磁珠，回收上清液，在溶剂置换后供给至质谱分析检测系本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种免疫分析方法，其特征在于，通过利用免疫分析法进行的前处理，使用抗体捕捉试样溶液中的测定对象物（１０１、５０１、１０３２），进行捕捉到的测定对象物（１０１、５０１、１０３２）的定量，从进行了测定对象物的定量后的废液中回收所述测定对象物（１０１、５０１、１０３２），通过质谱分析法对回收到的测定对象物进行质谱分析，对通过所述免疫法进行了处理后的测定对象物的成分进行测定。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：神田胜弘，
申请(专利权)人：株式会社日立高新技术，
类型：发明
国别省市：JP
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