本发明专利技术的黄金小神童的组培快繁育苗方法，取黄金小神童侧芽茎尖为初代培养材料，用多菌灵溶液浸泡；然后用维生素C蒸馏水溶液浸泡，用0.1%升汞常规消毒，初诱导培养条件为：1/2MS+蔗糖+琼脂+活性炭+亚硫酸钠+TDZ+NAA，继代增殖培养条件为：1/2MS+琼脂+蔗糖+活性炭+亚硫酸钠+TDZ+NAA，生根培养条件为：1/2MS+琼脂+蔗糖+活性炭+亚硫酸钠+6-BA+NAA；试管苗移栽条件为：用高锰酸钾水溶液消毒处理幼苗后移栽。本发明专利技术提供了一条能实施大规模工厂化培养的黄金小神童的组织培养方法。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种建兰杂交新品种。
技术介绍
黄金小神童iPolden Elf iSundust')是我国台湾省10多年前用四季兰和虎头兰杂交而得，开花物候及性状更接近于建兰的生长特性，因此目前一般将其归为建兰品种。 其具有花色金黄素雅、花香醇正，叶姿洒脱等特点，入市以来因其“物美价廉” 一直深受消费者的青睐，市场走势极好，现2剑/盆开花植株价格在160元/盆左右，目前对‘黄金小神童’的研究较少，组培育苗技术方面研究尚未见报道。建兰UJymbidium ensifolium)幽香袭人，花色素雅，栽培历史悠久，品种繁多，主要分布在我国西部及东南诸省，尤以福建分布和栽培最广，是我国出口最早的国兰之一。我国建兰组培育苗技术研究起步较早，已有三十多年的历史，但是由于建兰遗传性状较复杂， 传统观赏以奇花、异叶为主，因而生产中主要以种子杂交育苗和分株繁殖为主，由于繁殖系数低，新品种在初上市阶段往往天价炒作，尔后又快速下跌，对建兰规模化繁殖技术研究、 生产带来不良的影响。随着建兰杂交育种技术的进步和消费理念的转变，彩叶、香花、多花等多性状组合的建兰品种已逐步成为市场的新宠，如黄金小神童、线艺建兰、彩心建兰等， 要使这些品种走入寻常百姓家，只有组培育苗技术才是保证其优良性状的唯一途径，但目前有关建兰的组培研究也报道甚少。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能实施大规模工厂化培养的黄金小神童的组织培养方法。本专利技术的，包括外植物体消毒抗褐化处理、初诱导培养、继代增殖培养、生根培养和试管苗移栽，包括以下步骤(1)外植体消毒抗褐化处理取黄金小神童侧芽茎尖为初代培养材料，采集后修剪掉较老的组织，在自来水下冲洗干净，用0. 1%多菌灵+0. 2%洗洁净水溶液浸泡30分钟，冲洗干净，然后用抗褐化剂维生素C蒸馏水溶液(洲)浸泡30分钟，用0. 1%升汞常规消毒10分钟， 最后在超净工作台上剥离出侧芽茎尖；(2)初诱导培养条件为l/2MS+20-30g/L蔗糖+8-10g/L 琼脂+3. Omg/L TDZ +0. 2mg/L NAA为培养基；培养基pH 5.8;光照培养14 hr/d ；光照强度1500-2000 Lux ；培养温度为 25士2°C ；(3)继代增殖培养条件为l/2MS+10g/L琼脂+30g/L 蔗糖+l-7mg/L TDZ +0. 05-0. 4mg/ L NAA为培养基；培养基pH 5.8;光照培养14hr/d ；光照强度1500-2000LuX ；培养温度为 25士2°C ；(4)生根培养条件为l/2MS+10g/L琼脂+35g/L蔗糖+lg/L活性炭+lg/L亚硫酸钠+ 0. 1-0. 9mg/L 6-BA +0. 4-2. Omg/L NAA 为培养基，培养基 pH 5.8;光照培养 14hr/d ；光照强度1500-2000LUX ；培养温度为25士2°C ；(5)试管苗移栽条件为生根培养60天后，再炼苗20天；用0. 05%高锰酸钾水溶液消毒处理幼苗后移栽；室温控制在15-30°C，空气湿度在80%-90%，遮阴60 70%。本专利技术所述的继代增殖培养基中TDZ为 3-3. 5mg/L, NAA 为 0. 1-0. 2mg/L。本专利技术所述的，其特征在于生根培养基中的 6-BA 为 0. 3-0. 5mg/L，NAA 为 0. 8-1. 2mg/L。本专利技术所述的，其特征在于初诱导培养基和继代增殖培养基中可加入lg/L活性炭和lg/L亚硫酸钠。本专利技术所述的，其特征在于试管苗移栽的基质为蛭石或树皮。本专利技术达到的有益效果(1)侧芽茎尖在消毒前用1维生素C水溶液浸泡30分钟后再用0.1%升汞常规消毒， 能有效延缓外植体褐化时间和保持外植体活力；(2)在1/2MS培养基中同时添加抗褐化剂lg/L活性炭和lg/L亚硫酸钠后，可降低组培过程中外植体、原球茎和丛生芽产生褐化，目前已达到外植体初诱导、原球茎继代增殖褐化率控制在15%以下，丛生芽生根诱导褐化率低于5%以下；(3)浓度为3.0-3. 5mg/L的TDZ与浓度为0. 1-0. 2mg/L的NAA组合有利于外植体初诱导和原球茎增殖；随着TDZ浓度的增加，有利于原球茎分化丛生芽，反之则有利于原球茎分化原球茎，增殖系数达到7. 33，可连续继代增殖培养4-5代；浓度为0. 3-0. 5 mg/L的6-BA 与浓度为0. 8-1. 2 mg/L的NAA组合，最有利于丛生芽生根诱导，诱导率达到100. 0% ；(4)试管苗移栽条件为生根培养60天后，再炼苗20天；用0.05%高锰酸钾水溶液消毒处理幼苗后移栽；室温控制在15-30°C，空气湿度在80%-90%，遮阴70%移栽，采用蛭石或树皮为移栽基质，成活率达95%以上；(5)本专利技术初代培养基和继代增殖培养基差异较小，比较容易工厂化组培育苗。具体实施例方式取黄金小神童0. 4cm侧芽茎尖为初代培养外植体。将上述材料采集后修剪掉较老的组织，在自来水下冲洗干净，用0. 1%多菌灵+0. 2%洗洁净水溶液浸泡30分钟，冲洗干净；然后用抗褐化剂维生素C蒸馏水溶液(2%)浸泡30分钟，用0. 1%升汞常规消毒10分钟，最后在超净工作台上剥离出侧芽茎尖；将剥离消毒后的侧芽茎尖接种在初诱导培养基上，初诱导培养基配方l/2MS+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+lg/L活性炭+lg/L亚硫酸钠+ 3. 5mg/L TDZ +0. 2mg/L NAA ；光照时间14hr/d ；光照强度18001ux ；培养温度(25士2°C )；初代培养60天左右，侧芽茎尖诱导分化出2-3个直径0. 2cm原球茎，将其切割分离、接种；以l/2MS+10g/L 琼脂+30g/L蔗糖为基本培养基，添加lg/L活性炭和添加lg/L活性炭+lg/L亚硫酸钠；继代增殖培养60天后，原球茎同时分化出丛生芽和原球茎，将丛生芽切割成基部带2个原球茎单芽后接种；以l/2MS+10g/L琼脂+30g/L蔗糖+lg/L活性炭+lg/L亚硫酸钠+3mg/L TDZ +0. 2mg/L NAA为继代增殖培养基，增殖系数达到7. 33，可连续继代增殖培养4_5代；将原球茎诱导出的1-1. 5cm高丛生芽分割成无根单芽后接种；生根诱导培养基l/2MS+8g/L琼脂+25g/L蔗糖+lg/L活性炭+0. 5mg/L 6-BA+l. 2mg/L NAA，诱导生根60天后，100%诱导生根，生根2-3条，根长0. 5-3. 5cm ；生根培养60天后，再炼苗20天；用蛭石或为移栽基质，用 0. 05%高锰酸钾水溶液消毒处理幼苗后移栽，室温控制在25-30°C，空气湿度在80%-90%，遮阴70%，移栽成活率达96%。权利要求1.，包括外植体消毒抗褐化处理、初诱导培养、继代增殖培养、生根培养和试管苗移栽，其特征在于(1)外植体消毒抗褐化处理取黄金小神童侧芽茎尖为初代培养材料，采集后修剪掉较老的组织，在自来水下冲洗干净，用0. 1%多菌灵+0.洲洗洁净水溶液浸泡30分钟，冲洗干净，然后用抗褐化剂维生素C蒸馏水溶液(洲)浸泡30分钟，用0. 1%升汞常规消毒10分钟， 最后在超净工作台上剥离出侧芽茎尖；(2)初诱导培养，培养基为:l/2MS+20-30g/L蔗糖 +8-lOg/L 琼脂 本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．黄金小神童的组培快繁育苗方法，包括外植体消毒抗褐化处理、初诱导培养、继代增殖培养、生根培养和试管苗移栽，其特征在于：（１）外植体消毒抗褐化处理：取黄金小神童侧芽茎尖为初代培养材料，采集后修剪掉较老的组织，在自来水下冲洗干净，用０．１％多菌灵＋０．２％洗洁净水溶液浸泡３０分钟，冲洗干净，然后用抗褐化剂维生素Ｃ蒸馏水溶液（２％）浸泡３０分钟，用０．１％升汞常规消毒１０分钟，最后在超净工作台上剥离出侧芽茎尖；（２）初诱导培养，培养基为：１／２ＭＳ＋２０－３０ｇ／Ｌ蔗糖＋８－１０ｇ／Ｌ琼脂＋３．０－３．５ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ ＋０．１－０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ， ｐＨ ５．８，光照培养１４ ｈｒ／ｄ，光照强度１５００－２０００ Ｌｕｘ，培养温度为２５±２℃；（３）继代增殖培养，培养基为：１／２ＭＳ＋１０ｇ／Ｌ琼脂＋３０ｇ／Ｌ蔗糖＋１－７ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ ＋０．０５－０．４ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ，培养基ｐＨ ５．８，光照培养１４ｈｒ／ｄ，光照强度１５００－２０００Ｌｕｘ，培养温度为２５±２℃；（４）生根培养，培养基为：１／２ＭＳ＋１０ｇ／Ｌ琼脂＋３５ｇ／Ｌ蔗糖＋１ｇ／Ｌ活性炭＋１ｇ／Ｌ亚硫酸钠 ＋ ０．１－０．９ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ ＋０．４－２．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ， ｐＨ ５．８，光照培养１４ｈｒ／ｄ，光照强度１５００－２０００Ｌｕｘ，培养温度为２５±２℃； （５）试管苗移栽条件为：生根培养６０天后，再炼苗２０天，用０．０５％高锰酸钾水溶液消毒处理幼苗后移栽，室温１５－３０℃，空气湿度８０％－９０％，遮阴６０～７０％。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王济红，刘燕，祁翔，向立荣，
申请(专利权)人：贵州省生物研究所，
类型：发明
国别省市：52
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