生产高浓度咯嗪溶液的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及生产高浓度咯嗪溶液的方法和组合物。本发明专利技术提供了与使用常规技术制备的组合物相比，制备含有提高水平的可溶性咯嗪的组合物的方法。还提供了组合物和在溶液中具有较高溶解度的核黄素形式。

【技术实现步骤摘要】
生产高浓度咯嗪溶液的方法和组合物本申请是申请日为2007年1月24日，申请号为200780001510. 9，专利技术题目为“生产高浓度咯嗪溶液的方法和组合物”的分案申请。相关申请的交叉参照依据35U. S.C. § 119(e)，本申请要求2007年1月27日申请的U. S.临时申请 No. 60/762，684和2007年1月24日提交的US专利申请号一，代理案卷号186412/US/2的权益，在此以其整体引入作为参考。本申请进一步引入2004年11月5日申请的专利技术名称为“使用光敏剂和光的峰值波长减少血液和血液制品中污染”的US专利申请系列No. 10/904, 361，在此以其整体引入作为参考。背景a.领域提供了提高溶液中咯嗪溶解度的方法和组合物，以及灭活生物学流体中病原体的方法和组合物。还提供了一种新型的溶解度提高的核黄素。b.相关技术例如HIV、肝炎和其他的病毒以及细菌这些感染性微生物造成的全血或血液制品的污染对那些必须接受全血输血或给予不同血液制品或血液成分的患者造成了严重的健康危害。这类血液成分包括红血细胞、血浆、凝血因子VIII、血纤维蛋白溶酶原，纤连蛋白， 抗凝血酶III，冷沉淀物，人血浆蛋白级分，白蛋白，免疫血清球蛋白，凝血酶原复合物，血浆生长激素和其他从血液分离的成分。一种为受血者提供安全的血液或血液制品的解决方法是在患者体内使用该原料之前筛查血液或血液制品的污染(在此所用的术语“血液”和“血液制品”可以互换使用)。 当血液制品的测试对于特定的病原体是阳性时，从流通中除去该血液制品并被销毁。然而， 血液筛查操作可能会因为不适当的特异性和灵敏度而不能检测到致病性污染物，例如，筛查血液制品中丙肝的存在，当该血液受到西尼罗病毒感染，或筛查该血液制品丙肝，但该病毒的存在量低于特定筛查方法检测的灵敏度时。在这些情况下，血液筛查器将会认为该血液不含有可检测水平的丙肝污染而让该血液处于流通中，但事实上该血液制品其实受到西尼罗病毒的污染或一定水平的丙肝污染，这将会危害受血者的健康。第二种为受血者提供安全血液制品的解决方法是在受血者体内使用前对原料“灭菌”。一种特别有用的血液制品灭菌方法是直接给血液制品添加至少一种光敏剂。一些类型的光敏剂对核酸具有高亲和力。通常，血液制品中的核酸与病原体的存在是相联系的，这让光敏剂可以优先靶向血液制品中的病原体。随后在对于光敏剂适当的波长下对血液制品进行辐照，使吸收的能量从光敏剂转移至能量接受者，即，能量转移至病原体的核酸。使用这种处理破坏了血液制品中基本上所有的病原体，否则，受血者将会接受受污染的血液并且处于受特定病原体感染的危险中。血液制品中光敏剂的有效量或有效水平是确保破坏样品中病原体的一个重要方面。光敏剂驱动的对微生物破坏的有效性部分基于与微生物有效接触的光敏剂的含量或浓度，部分基于为了激活化合物并引起微生物杀灭而到达那些光敏剂的“光剂量”。一般而言，将光剂量最大化，以便活化光敏剂，但不会引起对周围血液或流体产品，即红细胞、 血小板等的破坏。然而，已经证明了给血液制品提供足量的光敏剂以提供限定体积原料中的病原体的有效杀灭或灭活是困难的。特别地，不同光敏剂的溶解度(以其Ksp来测量)限制了可以加入血液制品中的光敏剂的含量。在制备用于血液制品中的光敏剂时，首先必须将固体光敏剂与溶剂混合以把原料放入溶液中，然后将该溶液以一定的比例加入产品中，该比例不会不利于血液制品的渗透压。这通常给出了在“灭菌”处理过程中血液制品可以加入多少光敏剂的限制。光敏剂的稀释量可能导致对病原体的杀灭和处理无效。因此，在血液制品的灭菌处理中使用高浓缩的光敏剂溶液是有益的，该光敏剂溶液以小剂量加入血液制品中，但同时为样品提供了适当水平的光敏剂来保证病原体灭活。此外，寻找新的光敏剂和光敏剂形式来提供血液制品处理中的新手段。新的光敏剂及其形式可以提供从新化合物至带有病原体的血液提高的能量转移以及对于含有血液制品的包含物提供改进的溶解度特征。面对这样的背景，产生了本专利技术的公开内容。专利技术概述一方面，提供了将水性介质中的咯嗪浓度提高至高于环境温度和气压下的咯嗪典型饱和点的方法。将温度超过或等于80°C的水性介质加入一定量的咯嗪中以形成超过室温 (220C )和大气压(1个大气压)下咯嗪饱和点的咯嗪溶液。然后将该溶液冷却以产生咯嗪浓度高于环境温度和气压下咯嗪典型饱和点的水性介质。在不同的实施方案中，水性介质可以具有酸性pH(例如，约4至约5的pH)和/或约80°C至约90°C的温度。水性介质可以包括盐，如单价盐。在特定的实施方案中，咯嗪是核黄素。可以将咯嗪溶液进一步灭菌，如在大于1个大气压和至少120°C的温度下。在另一个方面中，提供了核黄素衍生物形式。该核黄素衍生物形式在525nm波长具有等于或小于0. 95的相关系数，和/或在波长500nm以上作为浓度函数的不同于可溶性核黄素的吸光度曲线。在更进一步的实施方案中，通过将核黄素混入具有酸性PH和大于约 80°C温度的水性介质中，然后冷却该核黄素溶液的方法制得核黄素衍生物形式。在另一个方面中，提供了用于处理生物流体如血液制品的组合物。在一种变化中， 组合物包括可溶性咯嗪，如核黄素，和单价盐，可溶性咯嗪至少为120 μ M，超过1个大气压和22°C下可溶性咯嗪的饱和点。在进一步的变化中，可溶性咯嗪的浓度至少为500 μ M。在进一步的变化中，可溶性咯嗪为约580μΜ。单价盐可以提供至少0.9%的盐浓度。在进一步的变化中，组合物包括碳酸氢钠，和/或具有约4至约5的pH。在其他方面中，提供了灭活生物流体中病原体的方法。将含有一定浓度的咯嗪溶液的组合物加入生物流体中以灭活病原体。在不同的实施方案中，可溶性咯嗪的浓度至少为100 μ Μ、250 μ Μ、至少为500 μ Μ,或约580 μ Μ。在其他实施方案中，生物流体是血液制品。附图简述附图说明图1Α，1Β和IC说明了根据在此所述的实施方案制备的核黄素衍生物α型的吸光度(附图A和B)和相关系数(C)特征。专利技术详述不同的实施方案提供了改良的光敏剂组合物，特别是改良的咯嗪组合物，其具有提高的溶解度，并因此具有提高的浓度。所得到的咯嗪溶液的溶解度和浓度超出了溶液外咯嗪的溶解度和浓度。所得到的咯嗪溶液提供了可以将更大量的咯嗪加入含有病原体的生物流体中，导致提高的病原体灭活。还提供了比未处理的核黄素具有更高饱和点的核黄素衍生物形式。定义提供以下定义来促进理解在此常用的特定术语，但是这不意味着限定本专利技术公开的范围。如在此所用的，“生物流体”指的是动物，优选哺乳动物体内发现的任何液体。通常，生物流体不含有大量含有核酸的物质。例如，在此公开的生物流体包括血液制品。“血液制品”指的是血液和全部的血液成分、血液组分和含有来自血液的蛋白质的治疗性蛋白组合物。如在此所用的，“咯嗪”指的是所有的咯嗪和异咯嗪，及其天然和合成的衍生物，包括，但不限于7，8- 二甲基-10-核糖醇基异咯嗪(核黄素或维生素B-2) ,7,8,10-三甲基异咯嗪(光黄素)、7，8_ 二甲基咯嗪(光色素)、异咯嗪-腺嘌呤二核苷酸(黄素腺嘌呤二核苷酸)和咯嗪单核苷酸(例如，黄素单核苷酸)。如在此所用的，“病原体”指的是可以感染并具有在宿主体内引起疾病潜本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．用于处理血液制品的组合物，包括：约１５０μＭ至约５８０μＭ可溶性咯嗪和单价盐。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·T·汉森，R·P·古德里奇，
申请(专利权)人：科安比司特生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：US