一种阿胶低聚肽的制备方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种阿胶低聚肽的提取方法，以阿胶为原料用碱性蛋白酶酶解后，再采用中性蛋白酶辅助二次酶解和风味蛋白酶外切和调节风味，膜截留分子量为0.5-15万道尔顿的超滤膜进行超滤和薄膜浓缩精制技术和喷雾干燥得到的阿胶低聚肽产品；本方法操作简便，口感好，成本低，环保高效，非常适合工业化大生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及阿胶的深加工
，具体涉及利用生物复合酶酶解阿胶肽的制备方法。
技术介绍
阿胶中主含胶原蛋白(80%)，服用方法一般为口服，而食物或药物中的蛋白质一般要被消化液酶解为低聚肽或氨基酸而被机体吸收和利用，而上述适应症人群常见脾胃虚弱或有胃肠道反应，因此消化道酶的活性低，消化能力差，因此口服阿胶不仅会造成患者消化系统的负担，而且也达不到应有的药效。目前，提取阿胶低聚肽的方法主要有碱液提取法和生物酶解法，前者在提取过程中加入大量的碱处理，既破坏了蛋白质的成分，造成成品苦咸等不良口感，而且对环境造成污染。公开号为CN 102021215A的中国专利申请“一种阿胶肽的提取方法”，公开了 100° C 煎煮6-8h，然后用碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解6-10h，再用风味蛋白酶酶解8h，酶解过程用氢氧化钠调节PH7-8，再经活性炭脱色，纳滤脱盐浓缩，喷雾干燥的制备方法，该方法操作流程太长，步骤繁琐，不适合工业化生产；胰蛋白酶成本高；控制酶解过程的PH虽然能略提高得率，但是需要纳滤脱盐，而且纳滤脱盐效果也不显著，影响了成品的得率和风味。公开号为CN101294186A的中国专利申请“阿胶低肽的制备方法”，公开了胃蛋白酶和胰蛋白酶进行水解，再经过，超滤，大孔树脂分离纯化，减压，低温浓缩，干燥的制备方法，该方法步骤繁琐，不适合工业化生产，而且采用低温浓缩影响产品的质量。
技术实现思路
本专利技术的目的针对现有技术的酶解液苦，咸味和分子量大，分子量分布不集中，成本高的缺陷，提供了一种阿胶低聚肽的提取方法，以阿胶为原料用碱性蛋白酶酶解后，再采用中性蛋白酶辅助二次酶解和风味蛋白酶外切和调节风味，膜截留分子量为0. 5-15万道尔顿的超滤膜进行超滤和薄膜浓缩精制技术和喷雾干燥得到的阿胶低聚肽产品；本方法操作简便，口感好，成本低，环保高效，非常适合工业化大生产。为了实现上述技术目的，本专利技术采取以下技术措施 一种阿胶肽的制备方法，其步骤如下1.以阿胶为原料，粉碎过60-100目筛，加入原料重量8-12倍的纯水搅拌均勻， 85-100° C 钝化脂肪酶 30min-60min;2.冷却至40-60°C，按原料阿胶的重量的1-3%的比率加入碱性蛋白酶，40-70° C恒温酶解2-4h，再分别按原料阿胶的重量的0. 5-1. 5%中性蛋白酶和0. 25-1%的风味蛋白酶， 搅拌酶解2-4h，将得到的酶解液升温至85-100° C，灭酶15-30min;3.将酶解液离心后过滤，上清液经过中空超滤膜，卷式膜或管式膜精制分离，膜截留分子量为0. 5-15万道尔顿的超滤膜，进口压力为1. 8-3bar,出口压力l_2bar，酶解液温度为 20-30° C进行超滤分离，薄膜浓缩，喷雾干燥即得到阿胶低聚肽成品。本专利技术原料阿胶为马科动物驴Equus asinus L.及其他驴皮经煎煮、浓缩制成的固体胶，性味甘，平，归肺、肝、肾经，功能补血滋阴，润燥，止血，主治血虚萎黄，眩晕，心悸， 多种出血证，阴虚证及燥证。本专利技术方法的优点和有益效果体现在1.本专利技术方法生产的阿胶低聚肽产品的纯度高，分子量集中，其中1000-160道尔顿 80%以上。2.本专利技术生产出来的阿胶低聚肽的分子量小而且集中，人体容易吸收。3.本专利技术有效避开了化学手段处理所带来的环境污染即对人体危害的问题。4.本方法避免了调节PH，纳滤脱盐工序，减少了工业成本，改善了成品的风味，提高了低聚肽的得率。 5.本专利技术的生产周期短，操作简便，成本低，产品质量可靠，安全无毒副作用，可广泛用于保健品、药品等领域。具体实施方式实施例1称取粉碎并过80目筛的东阿阿胶20kg，加入蒸馏水160kg，搅拌均勻后，升温至85° C 钝化脂肪酶30min ；冷却至60° C，加入碱性蛋白酶400g，搅拌酶解2. 5h后，加入200g中性蛋白酶，IOOg风味蛋白酶，55° C搅拌酶解3h，然后升温至100° C，灭酶15min ；冷却至室温，4000r/min离心20min，收集上清液，上清液经卷式膜超滤，膜截留分子量为3万，收集超滤液，超滤液经薄膜浓缩，浓缩液经喷雾干燥，得到10. 82kg粉末(微黄色)。阿胶低聚肽含量测定 1.方法提要低分子量的蛋白质水解物(包含肽类及游离氨基酸)可溶于三氯乙酸溶液；高分子量的蛋白质在三氯乙酸溶液中易沉淀。样品经三氯乙酸溶液溶解后，离心分离出沉淀蛋白质物质，测定出离心清液中的酸溶蛋白质含量，清液中的酸溶蛋白质含量减去游离氨基酸含量即为低聚肽的含量。2.分析步骤2.1酸溶蛋白质含量的测定称取2g (精确至Img)样品，加入至IOmL容量瓶中，用15%三氯乙酸溶液定容，混合均勻，静置lOmin。将样品溶液在4000rpm下离心IOmin后，取全部清液，按GB/T 5009. 5规定的方法测定清液中的酸溶蛋白质，蛋白质换算系数为6. 25。检验结果根据样品的干燥失重，折算为干基。2.2游离氨基酸含量的测定样品前处理称取20 30mg样品，精确到0. OOOlg，用3%磺基水杨酸溶液溶解均勻。 将样品溶液转移至50ml容量瓶中，定容。将样品溶液在转速为4000r/min离心机上离心 5min得清液，再用0. 45 μ m微孔滤膜过滤清液，将滤液转移至50ml容量瓶中，定容后作为仪器检测用样品。其余操作同GB 12292水果、蔬菜汁游离氨基酸含量的测定规定的方法。2. 3结果的表述低聚肽的含量巧按式(1)计算本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．　一种阿胶低聚肽的制备方法，包括原料阿胶酶解、浓缩、干燥，其特征在于：用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解，酶解液进行超滤。

【技术特征摘要】
1.一种阿胶低聚肽的制备方法，包括原料阿胶酶解、浓缩、干燥，其特征在于用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解，酶解液进行超滤。2.根据权利要求1所述的甲鱼低聚肽的制备方法，其特征在于碱性蛋白酶加入量为原料阿胶重量的1_3%，酶解2-4h，再加入原料阿胶重量0. ...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟虹光，易敏之，卢建中，刘根云，马莉，
申请(专利权)人：江中药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：36