受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的克隆方法技术

技术编号:7026924 阅读:264 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
采用病毒诱导基因沉默技术从以PVX病毒载体建立的本氏烟(Nicotiana?benthamiana)cDNA文库中筛选受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的方法,其中以农杆菌Gv3101为宿主、利用PVX病毒表达载体构建单克隆的本氏烟cDNA文库,采用牙签刺伤法或注射接种法接种本氏烟,从上述单克隆文库中筛选能使激发子诱发的过敏性细胞死亡表型发生改变的阳性克隆,然后对上述阳性克隆进行序列测定和分析。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
1.一种受激发子Nep1诱导的过敏性细胞死亡的调控基因的筛选方法,其特征在于包括以下步骤:(1)以农杆菌为宿主,利用病毒表达载体构建单克隆的本氏烟cDNA文库;(2)将上述单克隆的本氏烟cDNA文库的培养菌液注射接种本氏烟的叶片;(3)然后将激发子Nep1注射处理上述基因沉默的烟草;(4)筛选基因沉默后激发子诱导的过敏性细胞死亡表型发生改变的克隆。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张正光王源超郑小波
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:84

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