本发明专利技术涉及从芫根植株中提取得到的芫根总黄酮制备降血糖药物的用途,本发明专利技术的芫根总黄酮在各剂量均显示出显著的降血糖活性,可利用芫根总黄酮制备药物或者保健食品用于预防或者治疗高血糖病症。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及从芫根植株中提取得到的芫根总黄酮制备降血糖药物的用途,属于药用天然产物领域。
技术介绍
大量的流行病学研究表明,血糖异常升高是糖尿病发生的一个危险因素,糖尿病是一种常见的内分泌代谢性疾病,是继心血管疾病及癌症之后危害人类健康的第三大疾患。由于糖尿病具有患病率、致残率及并发症高的特点,因此已成为医学界颇为瞩目并倍加重视的疾病之一。目前的降血糖药物多为西药或中药的大复方,西药(包括注射剂和口服降糖药) 作用强而迅速,过量导致病人低血糖症而被迫停药,结果又致停药症状反跳;中药大复方基本上是都是由天然中草药经简单的炮制和提取制成的,不仅成分相当复杂、制备不便,而且难以进行更深入的结构/药效研究,也不利于药物质量控制和中药现代化。我国有着丰富的中草药资源,如何合理开发这些天然植物资源,利用现代药物化学分析技术和生物学实验手段,寻找一类安全有效的天然植物降血糖药物已经成为医学、 生物学领域广泛关注的焦点,也是提升我国降血糖药物产业竞争力的关键。芫根(Brassica rapa L.),又名蔓菁,二年生草本,现广泛栽种于青藏高原。芫根生长在海拔高、温差大、日照强的高原环境中,适应能力强,产量高,营养丰富,通常作为饲料应用于畜牧业,其肉质根还可以作为蔬菜或果品供人食用,具有清热解毒、滋补增氧的功效。目前开发利用芫根已公开的方法中,尚未见关于芫根总黄酮降血糖功效方面的报道。黄酮类化合物指化学结构上属于黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、花色素类、黄烷醇类、双苯吡酮类、异黄酮类等化合物及其与单糖或寡糖形成的糖苷或其他形式的衍生物。它们广泛存在于自然界,尤其是高等植物和羊齿类植物中,是一类重要的天然有机化合物,其生理活性多种多样。大量研究表明黄酮类化合物具有防治高血压、治疗冠心病、抑制血栓形成、抗肝毒、抗炎、泻下、降血脂、雌激素样作用等功效。因此,开发利用植物黄酮具有巨大的生物学、医学意义。本专利技术通过提取芫根总黄酮并对其进行降血糖活性检测,拓宽了芫根综合开发的途径,为探索天然的、有效的降血糖药物提供了理论依据,符合高原植物资源的有效利用和藏药新药开发的需要,有利于推动民族地区经济的发展。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供以黄酮类化合物为主要成分的芫根总黄酮提取物;本专利技术还提供上述芫根总黄酮提取物的制备方法;本专利技术还提供上述芫根总黄酮提取物在治疗和/预防血糖异常升高症的药物制备中的用途。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案为从芫根根块中提取到总黄酮,得率为0. 2 1. 0重量%,呈固态淡黄色,易溶于乙醇,易溶于水。利用四氧嘧啶和肾上腺素所致的糖尿病小鼠模型进行芫根总皂苷降血糖作用功效实验,除非另有说明,本专利技术中的%为重量百分比。本专利技术芫根总黄酮提取物的制备方法具体为方法A:(1)将芫根原料用5 15倍体积的蒸馏水煮沸;(2)搅拌的同时缓慢加入石灰乳或者NaOH碱性溶液,调pH至8 10,持续煮沸 20 60min,趁热用4层纱布抽滤,滤液用中速滤纸进行再次过滤;(3)滤渣再用5 15倍体积蒸馏水煎煮,趁热抽滤,重复提取1 3次,(4)合并两次滤液,在60 80°C条件下,用浓盐酸调pH至4 6,搅勻后静置Mh, 抽滤;(5)用蒸馏水将沉淀物洗至中性,干燥后得到粗制总黄酮,(6)用沸水重结晶,干燥后得到精制总黄酮,得率为0. 2 0. 7重量%,纯度为 37% 75%。方法B:(1)用5 15倍体积的50 95%乙醇或甲醇作为溶剂,于50 80°C对芫根原料进行回流提取1 4h,进行1 4次重复提取;(2)用中速滤纸过滤提取液,合并滤液,减压浓缩至滤液无醇味;(3)在滤液中,按1 1 3体积加入石油醚萃取3 5次,60°C挥去60°C水浴挥发掉溶液中的石油醚石油醚,又按1 1 3体积加入乙酸乙酯对浓缩液进行萃取3 5次,将乙酸乙酯部分的溶液减压浓缩、干燥,得到粗总黄酮浸膏;(4)将粗总黄酮浸膏溶于少量50 95%乙醇,得到总黄酮上柱液,利用大孔吸附树脂吸附,用蒸馏水冲洗到流出液无色后,以流速为1 2. 5ml/min,用2 8倍柱体积的 20 95%的乙醇进行梯度洗脱至无色,收集洗脱液,将洗脱液50 80°C减压浓缩、干燥得到精制的总黄酮,得率为0. 5 0. 7重量%,纯度为75% 95%。方法C(1)将芫根原料用10 30倍体积的60 95%乙醇浸泡1 3h ;(2)在常压下,以微波功率500 900w,微波辐射20 60s,间歇辐射2 5次,进行微波辅助浸取;(3)过滤收集滤液,将滤液浓缩成无醇味的浸膏;(4)将浸膏溶于少量热水中,按1 1 3体积比先后用石油醚和乙酸乙酯对浸膏液进行萃取,收集乙酸乙酯部分,减压回收溶剂,干燥后得到粗总黄酮浸膏;(5)将粗总黄酮浸膏溶于少量50 95%乙醇,得到总黄酮上柱液。利用大孔吸附树脂吸附,用蒸馏水冲洗到流出液无色后,以流速为1 2. 5ml/min,用2 8倍柱体积的 20 95%的乙醇进行梯度洗脱至无色,收集洗脱液。将洗脱液50 80°C减压浓缩、干燥得到精制的芫根总黄酮。得率为0.3 0.9重量%。纯度为43% 75%。所述制备方法中的芫根原料均为芫根的块根,经切片后自然风干,然后粉碎得到粉状物,粉碎细度达到40 200目;上述方法B、方法C中所用的大孔吸附树脂为DlOl或AB-8 ;所述干燥方法为减压真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。将芫根总黄酮制备成各种,例如粉剂、片齐IJ、胶囊、颗粒齐IJ、缓释片、缓释胶囊、滴丸或液体制剂。所述制剂应用于临床治疗高血糖症及制成含芫根总黄酮降血糖保健品。本专利技术用盐酸-镁粉反应检测所提的芫根总黄酮,泡沫处呈现紫红色;取样品的 60 %乙醇溶液滴在滤纸上后,与1 % AlCl3乙醇溶液反应在可见光下呈现灰黄色,在紫外光下呈现黄色荧光斑点;取样品乙醇的60%溶液滴在滤纸上,用浓氨水熏过后,在紫外光下呈现黄褐色荧光斑点,说明提取物确实为黄酮。芫根总黄酮的定量测定是利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法,以芦丁为标准品绘制标准曲线,利用紫外分光光度法测定芫根总黄酮含量。通过上述方法制备的芫根总黄酮在降血糖方面有显著的效果。利用四氧嘧啶和肾上腺素所致的糖尿病小鼠模型进行芫根总黄酮降血糖作用功效实验,结果显示,芫根总黄酮对四氧嘧啶和肾上腺素致糖尿病小鼠具有显著降血糖作用。本专利技术方法得到的芫根总黄酮原料易得,方法简单,生产成本低,产品中总黄酮含量较高,质量稳定、易于控制。具体实施例方式实施例1采用方法Α,取晒干芫根块根粉碎至100目,用5倍体积的蒸馏水煮沸,煮沸后不停搅拌的同时,缓缓加入NaOH,将溶液PH调至10。继续保持煮沸20min。趁热用四层纱布垫在布氏漏斗上进行抽滤,抽滤完毕用中速滤纸对滤液再次过滤。收集滤液。将滤渣用5倍体积的蒸馏水再次煎煮20min,抽滤、过滤,这样对滤渣重复提取3次,合并滤液。将滤液加热到60°C,缓缓加入浓盐酸,将溶液PH调至4,搅拌均勻后,静置24h后,抽滤,收集沉淀物。 用大量蒸馏水冲洗沉淀物,直至PH为7,60°C减压真空干燥沉淀物,得到粗总黄酮。用沸水将得到的粗总黄酮重结晶,60°C减压真空干燥结晶,得到淡黄色的精制芫根总黄酮,得率为 0. 32%,纯度为 57%。实施例2采用本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种芫根总黄酮制备降血糖药物的用途,其特征在于:将芫根总黄酮提取物制备成降血糖的药物,所述芫根总黄酮是通过如下步骤制备的:(1)将芫根原料用5~15倍体积的蒸馏水煮沸;(2)搅拌的同时缓慢加入石灰乳或者NaOH碱性溶液,调pH至8~10,持续煮沸20~60min,趁热用4层纱布抽滤,滤液用中速滤纸进行再次过滤;(3)滤渣再用5~15倍体积蒸馏水煎煮,趁热抽滤,重复提取1~3次,(4)合并两次滤液,在60~80℃条件下,用浓盐酸调pH至4~6,搅匀后静置24h,抽滤;(5)用蒸馏水将沉淀物洗至中性,干燥后得到粗制总黄酮,(6)用沸水重结晶,干燥后得到精制总黄酮,得率为0.2~0.7重量%,纯度为37%~75%。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:蒋思萍,高平,
申请(专利权)人:西藏自治区高原生物研究所,
类型:发明
国别省市:54
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