一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡制造技术

一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡，属于中药中非法添加西药成分检测技术领域。本实用新型专利技术三联检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、数段胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；数段胶体金膜依次是含抗格列苯脲抗体、抗格列齐特抗体、抗格列吡嗪抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含格列苯脲蛋白质偶联物、格列齐特蛋白质偶联物、格列吡嗪蛋白质偶联物，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本实用新型专利技术优点是能同时检测出降糖中药中非法添加的格列苯脲、格列齐特及格列吡嗪。检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种检测中药中非法添加西药成分的器具，特别涉及一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡，属于中药非法添加西药成分检测

技术介绍
糖尿病降糖中药或保健品中最常非法添加的降糖西药成分是格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪。据五个省市对市面上销售的32种宣称具有降糖作用中药及中药保健品进行的抽样化验检查发现，70%的药物中都添加有降糖西药成分。如果患者在不知情的情况下， 私自服用过量号称纯中药的药物，就会出现病情加重或恶化的情况。例如格列苯脲的降糖作用为甲苯磺丁脲的100 200倍，治疗量范围大，降糖作用强，半减期12 14小时，维持时间长，易引起低血糖昏迷，特别是老年人。低血糖昏迷如持续6小时以上引起大脑功能损害可能是不可逆的，主要是神经元广泛变性、坏死，大小神经胶质细胞浸润。神经系统中大脑皮质、海马回，小脑、尾状核，苍白球处低血糖最为明显。目前，检测中药中非法添加西药成分的主要方法有高效液相色谱法及液质联用等进行定性和定量的分析。这些方法对实验仪器设备要求高，操作繁琐，对操作人员的专业知识要求高，费时费力。因此建立一种准确可靠又快速方便的检测中药中西药成分的分析方法是非常必要的。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种操作简便快捷、成本低、携带方便、非专业人员也能操作及可进行现场检测的胶体金试纸，且能同时检测三类西药降糖成分，克服现有技术操作繁琐、专业要求高的缺陷。本技术的技术方案一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡，在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4，测试条2是由支承背板5上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金膜7、14、15、硝酸纤维素膜6和吸水膜9所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸水膜9，另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体金膜7、14、15 ；胶体金膜依次为含抗格列苯脲抗体、抗格列齐特抗体、抗格列吡嗪抗体的胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和一条质控带，依次是含格列苯脲蛋白质偶联物检测带10，含格列齐特蛋白质偶联物检测带11，含格列吡嗪蛋白质偶联物检测带12，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带13 ；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。应用免疫学的方法直接检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪的含量，检测样品为胶囊、片剂或药丸降糖中药样品，处理方法如下(1)随机采集一定量的待测样本，粉碎均勻；(2)称取5g粉碎后的样品，加入IOmL样品抽提液，充分搅拌混合5min以上，震荡反应30min ；抽提液配置如下在70mL甲醇中加入30mL蒸馏水；(3)将步骤(2)所得溶液移入IOmL离心管，4000r/min离心lOmin，取离心后的上清液；上清液澄清，按上清液样品稀释液为1 3的比例稀释，即取上清液IOOyL加入 300 μ L样品稀释液，混合均勻后测定；上清液浑浊，则用滤纸过滤，取过滤后的上清液，按上清液100 μ L加入300 μ L样品稀释液进行稀释，混合均勻后测定；样品稀释液为ρΗ7. 6、IOmmol PBST溶液。如果显示检测带10、11、12和质控带13同时显现棕红色印迹，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪含量没有超过允许值。如果检测带10、11、12不显示颜色，只有质控带13显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪含量同时超过允许值。如果检测带10、11不显示颜色，检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲和格列齐特含量超过允许值，而格列吡嗪含量没有超过允许值。如果检测带10、12不显示颜色，检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲和格列吡嗪含量超过允许值，而格列齐特含量没有超过允许值。如果检测带11、12不显示颜色，检测带10和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列齐特和格列吡嗪含量超过允许值，而格列苯脲含量没有超过允许值。如果检测带10不显示颜色，检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列苯脲含量超过允许值，而格列齐特、格列吡嗪含量没有超过允许值。如果检测带11不显示颜色，检测带10、12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列齐特含量超过允许值，而格列苯脲、格列吡嗪含量没有超过允许值。如果检测带12不显示颜色，检测带10、11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中格列吡嗪含量超过允许值，而格列苯脲、格列齐特含量没有超过允许值。如果检测带10、11、12和质控带13均不显色，则表明测试条失效。本专利技术的有益效果本专利技术三联检测卡能同时检测出中药样品中含有的格列苯脲、格列齐特及格列吡嗪，本三联检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。附图说明图1格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡的外壳及测试条在外壳内的安置图。1、外壳，2、测试条，3、检测窗孔，4、加样孔。图2格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡的测试条结构示意图。5、支承背板，6、硝酸纤维素膜，7、含格列本脲抗体的胶体金膜，14、含格列齐特抗体的胶体金膜，15、 含格列吡嗪抗体的胶体金膜，8、样品垫，9、吸水膜。图3格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜，10、含格列苯脲蛋白质偶联物检测带，11、含格列齐特蛋白质偶联物检测带，12、含格列吡嗪蛋白质偶联物检测带，13、质控带。具体实施方式本技术结合具体实施例参见附图进一步说明如下实施例1 格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳状外壳，长7cm，宽2cm，厚0. 5cm，薄壳壁厚0. 1cm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约6. 0cm，片宽约0. km，厚度小于2. 5mm。 测试条2是多层结构底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0. 5mm,长6. Ocm,宽 0. 4cm ；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0. 5mm，长2_2. 5cm,宽 0. 4cm0硝酸纤维素膜6上有三条间隔开的横向显示印迹带，参见附图3，三条显示印迹带中，第一条是检测带10，含格列苯脲蛋白质偶联物，第二条检测带11，含格列齐特蛋白质偶联物，第三条是检测带12，含格列吡嗪蛋白质偶联物，第四条是质控带13，含抗兔抗体或抗鼠抗体。调节三种蛋白质偶联物浓度大约为lmg/mL，抗兔抗体或抗鼠抗体浓度大约为 0. lmg/mL时喷膜。支承背板5 —端上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5另一端上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维素本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种格列苯脲、格列齐特和格列吡嗪三联检测卡，其特征在于：在长条扁平薄壳状的检测卡外壳（１）中设置测试条（２），检测卡外壳表面有检测窗孔（３）和加样孔（４），测试条（２）是由支承背板（５）上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫（８）、胶体金膜（７）、（１４）、（１５）、硝酸纤维素膜（６）、和吸水膜（９）所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜（６），支承背板一端叠置粘贴吸水膜（９），另一端叠置粘贴样品垫（８），吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体金膜（７）、（１４）、（１５）；胶体金膜（７）、（１４）、（１５）依次是含抗格列苯脲抗体、抗格列齐特抗体、抗格列吡嗪抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和一条质控带，依次是：含格列苯脲蛋白质偶联物检测带（１０），含格列齐特蛋白质偶联物检测带（１１），含格列吡嗪蛋白质偶联物检测带（１２），含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带（１３）；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周坚，吴文晔，熊晓芳，
申请(专利权)人：无锡安迪生物工程有限公司，
类型：实用新型
国别省市：32