本发明专利技术涉及一种蛹虫草菌种的快速检测方法，包括下列步骤：(1)菌株或子实体基因组DNA的提取；(2)蛹虫草菌种或其子实体特异DNA片段的获得；(3)特异PCR扩增引物的获得；(4)与蛹虫草子实体形成有关的分子标记的PCR扩增；(5)琼脂糖凝胶电泳检测。该检测方法具有检测时间短，准确性高，提高效率，减少损失等优点；在试管菌种生产阶段进行检测，可检测出50％不能正常出菇的菌株，从而可以在实际生产中减少50％不出子实体的损失。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
１．一种蛹虫草菌种的快速检测方法，包括下列步骤：（１）菌株或子实体基因组ＤＮＡ的提取将子实体及菌丝，放入－２０℃冰箱冻存，用ＣＴＡＢ法提取基因组ＤＮＡ，ＤＮＡ稀释至５０ｎｇ／μＬ，－２０℃冰箱贮藏备用；（２）蛹虫草菌种或其子实体特异ＤＮＡ片段的获得对应４５７ｂｐ的ＤＮＡ片段的ＰＣＲ扩增引物对序列为：２Ｆ：５′ＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＧＡＧＧＡＧＡＣＡＡＴ３′；２Ｒ：５′ＧＣＴＴＣＣＡＡＴＡＣＧＴＴＣＣＡＴＧＡＡＣ ＣＣＴ３′；对应１０３１ｂｐ的ＤＮＡ片段的ＰＣＲ扩增引物对序列为：３Ｆ：：５′ＴＴＣＣＴＴＣＧＣＴＴＣＣＣＴＧＡＧＴＴＣＴＧＴ３′；３Ｒ：５′ＧＧＣＡＧＡＣＡＴＣＧＴＡＣＣ ＴＧＧＴＣＡＡＡＴ３′；对应８１９ｂｐ的ＤＮＡ片段的ＰＣＲ扩增引物对序列为：１Ｆ：５′ＴＣＡＡＣＡＡＴＣＣＴＣＣＡＴＴＴＣＣＴＣＣＡＧＣ３′；１Ｒ：５′ＣＴＡＣＡＴＧＡＴＴＧＡＣＴＣＣＧＧＧＣＴＣＡＴＴＧ３′；应用以上引物分别对蛹虫草菌种或其子实体ＤＮＡ进行扩增；其扩增得到的ＤＮＡ片段的序列分别是：２Ｆ／２Ｒ引物对所扩增的ＤＮＡ序列为：５－ＣＣＧＴＣＡＴＣＴＧＣＡＡＧＡＧＧＡＧＡＣＡＡＴＡＴＴＧＣＡＧＡＴＣＧＣＣＧＣＡＡＡＧＴＧＣＴＴＣＧＡＡＧＡＣＡＡＡＧＡＡＡＡＧＧＡＧＡＡＣＡＡＴＴＣＧＡＣＡＡＡＡＴＡＣＴＣＣＡＡＧＣＣＴＣＡＡＴＣＧＡＣＣＣＴＴＣＡＴＴＴＣＡＣＧＧＡＧＣＣＧＣＡＡＣＧＡＧＣＣＴＴＧＣＣＡＣＡＧＡＡＧＡＧＡＡＧＣＡＡＣＡＧＣＡＡＧＣＡＧＧＣＣＧＧＡＧＡＣＣＧＣＧＣＡＡＡＡＣＧＡＣＣＡＴＴＧＡＡＴＧＣＴＴＴＣＡＴＣＧＣＡＴＴＣＡＧＡＡＧＴＧＡＧＴＧＣＡＧＡＡＴＡＴＴＡＡＴＴＴＣＣＣＴＣＧＡＧＡＡＣＡＡＡＴＣＴＡＡＣＴＣＣＡＡＴＧＡＴＴＡＡＡＡＧＧＣＴＡＣＴＡＣＧＴＧＡＡＡＣＴＡＴＴＴＣＣＡＧＡＧＴＣＧＣＡＡＣＡＡＡＡＧＧＣＧＧＣＧＴＣＣＧＧＣＴＴＣＣＴＣＡＣＧＡＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＡＡＡＧＡＣＣＣＧＴＴＣＡＧＡＡＡＴＣＧＣＴＧＧＧＣＡＡＴＧＡＴＣＧＣＧＡＡＧＧＴＡＴＡＴＡＣＴＴＴＣＡＴＴＣＧＣＧＡＴＧＡＧＡＴＧＧＧＡＡＡＧＡＡＧＡＧＧＧＣＴＣＣＣＣＴＣＴＣＣＴＣＡＴＴＴＣＴＧＡＴＧＧＣＴＧＣＴＴＧＴＣＣＧＧＣＡＡＴＧＧＡＣＡＴＴＴＴＡＣＣＴＣＣＴＧＡＴＧＡＧＴＡＣＣＴＴＣＡＧＧＴＴＣＴＧＧＧＣＴＧＧＧＣＡＧＴＣＧＡＡＧＡＴＡＣＣＧＡＡＣＡＡＧＧＴＡＣＣＡＡＧＡＴＧＣＴＴＧＴＴＣＡＧＡＣＧＣＴＴＧＴＣＣＡＡＡＴＡＣＡＡＧＴＣＡＴＧＧＴＡＣＡＡＴＡＴＧＣＡＣＡＴＴＡＴＣＴＴＣＡＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＴＣＣＡＡＣＴＣＴＡＴＴＣＧＣＣＧＡＣＣＴＣＡＣＧＡＴＣＧＴＣＣＧＣＣＣＡＧＣＧＣＡＣＣＡＡＴＧＡＣＡＴＧＡＴＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣＣＡＡＧＴＣＣＴＣＧＴＣＣＧＧＡＧＣＧＣＣＴＴＧＣＣＣＣＣｃＡＡＧＴＡＴＡＡＧＧＧＡＡＴＣＣＡＣＡＴＧＡＴＡＡＴＧＡＣＡＧＣＣＧＣＣＧＡＧＡＴＧＣＣＡＧＣＣＡＴＧＧＣＧＣＣＡＴＡＴＧＴＡＴＴＴＴＧＡＴＡＧＣＣＡＧＡＣＴＴＧＴＴＧＡＴＣＣＡＡＧＧＧＴＴＴＧＴＣＴＣＧＡＡＧＧＡＡＡＧＧＡＡＡＡＡＴＣＣＧＡＡＴＡＧＴＧＣＴＧＴＡＣＡＧＡＴＣＴＧＴＧＴＴＡＧＣＧＣＡＧＧＧＴＴＣＡＴＧＧＡＡＣＧＴＡＴＴＧＧＡＡＧＣ－３；３Ｆ／３Ｒ引物对所扩增的ＤＮＡ序列为：５－ＴＴＣＡＧＣＴＴＣＡＧＴＣＣＧＴＴＣＴＧＧＧＣＣＧＡＧＧＡＣＧＡＧＴＧＣＡＴＴＧＴＡＧＡＴＴＣＡＧＡＡＴＣＴＧＣＣＡＴＣＧＡＣＴＣＡＡＴＣＣＧＡＴＧＣＣＡＴＧＣＴＴＴＡＣＧＡＧＴＴＴＣＴＣＴＧＧＡＡＡＡＧＡＡＣＡＧＧＧＧＡＡＧＧＧＡＡＧＡＧＡＡＡＣＴＡＣＣＧＴＧＣＣＴＧＣＡＧＧＧＴＡＣＧＣＧＧＴＣＴＣＴＧＧＴＣＧＧＴＴＴＧＡＴＡＴＴＴＴＧＴＣＧＣＴＡＡＣＣＡＡＧＴＧＣＡＣＣＴＡＧＡＴＧＴＡＣＴＡＧＡＡＧＡＴＧＴＣＡＴＣＴＡＣＧＣＧＡＴＣＧＡＧＡＧＣＣＴＡＣＴＡＴＧＧＡＡＣＣＣＣＣＧＡＧＡＣＧＡＣＡＡＣＡＴＴＡＴＡＡＴＡＡＡＣＣＧＡＡＴＡＧＴＴＧＣＧＣＴＣＧＧＣＧＴＡＧＡＡＧＡＧＡＣＧＡＴＣＧＡＣＣＣＣＧＴＣＣＴＧＣＴＧＧＴＣＡＡＡＧＡＡＧＣＧＡＴＣＧＣＣＣＡＣＴＧＧＴＡＣＡＴＴＡＧＣＧＣＡＧＴＧＣＣＡＡＴＣＴＣＡＡＣＣＣＧＡＧＡＴＣＣＴＣＡＣＣＡＴＧＧＣＴＴＧＣＣＧＣＣＧＧＡＣＧＣＡＧＡＧＡＴＡＧＡＧＣＡＧＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＣＧＡＣＡＡＴＡＣＴＧＡＧＡＴＧＧＡＡＴＣＧＡＣＡＡＴＡＴＧＣＡＧＣＴＧＡＧＡＡＡＣＡＣＧＡＡＡＴＡＧＣＧＡＡＣＣＴＣＧＧＴＣＴＣＡＴＡＧＣＡＡＴＧＣＴＣＴＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＡＣＡＴＧＧＴＣＣＣＧＴＣＣＴＧＡＡＡＧＣＣＣＡＡＣＴＴＴＧＣＧＧＴＴＡＧＧＧＡＣＡＴＴＡＧＴＧＧＣＡＡＡＣＧＣＣＧＣＣＡＣＴＧＣＡＡＴＴＴＴＡＴＴＣＧＧＡＧＣＴＴＴＣＡＴＧＡＴＴＡＴＡＣＣＧＡＡＡＡＴＴＡＧＣＡＴＣＡＧＡＧＡＡＴＣＴＴＣＡＡＡＴＴＴＧＣＴＧＧＴＡＴ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：魏静，陈明杰，鲍大鹏，冯爱萍，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：31
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