一种生地黄水提物在制备雌激素药物中的应用制造技术

技术编号:6869588 阅读:388 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及生地黄水提物在制备雌激素药物中的应用,有效解决由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病的用药问题,其解决的技术方案是,将生地黄每次用其10倍重量的水煎煮2次,每次2h,合并2次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物,该生地黄水提物可有效用于制备治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的相关疾病的药物,实现生地黄水提物在制备治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的相关疾病药物中的应用,本发明专利技术水提物制备方法简单,稳定可靠,并经多次试验,均取得了相同或相近似的结果,方便,成本低,其水提物有效用于制备雌性激素药物,开辟了生地黄药用新用途,临床意义巨大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药新用途,特别是一种生地黄水提物在制备雌激素药物中的应用, 可有效用于治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的相关疾病,如妇女更年期综合症等。
技术介绍
生地黄为玄参科植物地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.)的新鲜或干燥块茎。 秋季采挖,除去芦头、须根及泥沙,将其缓缓烘焙至约八成干,即为生地黄。历代名家对其均有论述和研究,认为其性甘、寒,归心、肾、肝经,清热凉血、养阴生津。主治热病舌绛烦渴、阴虚内热、骨蒸劳热、内热消渴、吐血、衄血、血崩、月经不调、胎动不安、阴伤便秘等。现代药理及临床研究表明生地黄能促进凝血、升高外周白细胞;能强心、利尿、升高血压;能保护肝脏,降低血糖;有增强免疫功能、抗辐射损伤和肾上腺皮质激素样作用。但尚未有生地黄关于雌激素样活性方面的研究报道。
技术实现思路
针对上述情况,本专利技术的目的就是提供一种生地黄水提物在制备雌激素药物中的应用,有效解决由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病(如妇女更年期综合症等)的用药问题。本专利技术解决的技术方案是,将生地黄每次用其10倍重量的水煎煮2次,每次2h,合并2次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物,该生地黄水提物可有效用于制备治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的相关疾病的药物,实现生地黄水提物在制备治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的相关疾病(如妇女更年期综合症等)药物中的应用。本专利技术水提物制备方法简单,稳定可靠,并经多次试验,均取得了相同或相近似的结果,方便,成本低,其水提物有效用于制备雌性激素药物,开辟了生地黄药用新用途,临床意义巨大。附图说明图1为本专利技术的生地黄水提物对ERE调控的报告基因载体ERa瞬时表达的诱导作用图。图2为本专利技术的生地黄水提物对ERE调控的报告基因载体ER3瞬时表达的诱导作用图。具体实施例方式以下结合实施例和有关试验资料对本专利技术的具体实施方式作详细说明。实施例1本专利技术在具体实施中,所述的生地黄水提物是,将生地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.) IOOg用其10倍重量的水IOOOg (即1000ml)煎煮2次,每次2h,合并两次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物,连续反复三次,平均得率为71. 90%,该水提物可制备雌激素药物,用于治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病,如妇女更年期综合症药。实施例2本专利技术在具体实施中,所述的生地黄水提物是,将生地黄(Rehmarmia glutinosa Libosch.) 200g用其10倍重量的水2000g(即2000ml)煎煮2次,每次2h,合并两次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物143. 90g,连续反复三次,平均得率为71. 95%, 该水提物可制备雌激素药物,用于治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病,如妇女更年期综合症药。实施例3本专利技术在具体实施中,所述的生地黄水提物是,将生地黄(Rehmarmia glutinosa Libosch. )300g用其10倍重量的水3000g(即3000ml)煎煮2次,每次2h,合并两次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物215. 20g,连续反复三次,平均得率为71. 73%, 该水提物可制备雌激素药物,用于治疗由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病,如妇女更年期综合症药。根据上述方法按生地黄和水的比例可以通过工业化生产制得任意量的生地黄水提物,用于制备雌激素药物,有效解决由于体内雌性激素分泌不足而引起的疾病(如妇女更年期综合症等)的用药治疗问题,并经试验得到了充分证明,有关试验资料如下采用细胞增殖试验、动物试验及报告基因技术对其进行了充分证明,其有关试验资料如下首先通过MCF-7细胞增殖实验(E-SCREEN),发现生地黄能够促进MCF-7细胞的增殖,说明其在体外具有雌激素样作用。其次通过小鼠子宫增重实验,证明生地黄能够显著增加性未成熟雌性小鼠的子宫系数,说明其在体内具有雌激素样作用。最后通过ERE调控的报告基因瞬时表达检测技术,进一步验证生地黄提取物是通过与雌激素受体ERi3的结合而发挥雌激素样作用。专利技术人已通过实验证明了本专利技术药物在制备雌激素类药物中的新用途。其主要实施方案如下一、实验材料与方法1.实验药物玄参科植物地黄(Rehmannia glutinosa Libosch.)的新鲜或干燥块茎。秋季采挖,除去芦头、须根及泥沙,将其缓缓烘焙至约八成干,即为生地黄。生地黄IOOg以10倍量的水煎煮2次,每次2h,水煎液减压干燥浓缩干燥得到生地黄水提物71.90g(浸膏状)。2.实验动物与细胞株及质粒昆明种小鼠,雌性,出生21天(刚断乳),体重9 12g,购于河南省实验动物中心。人乳腺癌细胞(MCF-7)由中国军事医学科学院生物工程研究所提供。HEK293细胞株购于中国典型培养物保藏中心。β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)对照质粒P β gal-Contro 1、重组报告基因pERE_TAL_luc由军事医学科学院生物工程研究所叶棋浓博士惠赠。重组人ER α (humanER α,hER α )表达载体pCXN2_hER α和重组人 ERβ (humanERβ,hERβ )表达载体pCXN2-hERβ由东京大学医学系Satoshi Inoue博士惠赠。3.主要试剂RPMI1640 培养基、小牛血清(Newborn Calf Serum, NCS)和脂质体 Lipofectamine 2000Reagent 购自 Gibco Invitrogen 公司;胎牛血清、无酚红 RPMI1640 培养基、17 β-雌二醇(17 β-estrogen,Ε2)、氨苄青霉素(Amp)、Tris 碱和活性炭(Charcoal) 均购自Sigma公司;葡聚糖T-70(Dextran-70)购自上海化学试剂公司;己烯雌酚片(合肥久联制药);邻-硝基苯-β -D-半乳吡喃糖苷(O-Nitrophenyl- β -D-galactopy ranoside, 0NPG)、EDTA, MTT 及 DMSO 为 Amresco 公司产品;17-β 雌二醇(E2)为 Sigma 公司产品;Steady-GloR稳定荧光素酶检测系统试剂盒(Steady-Glo^ Luciferase Assay Systerm)、闪亮裂解缓冲液(Glo lysis Buffer)购自Promega公司;胰蛋白胨、酵母粉购自 OXOID公司;感受态大肠杆菌DH5 α (Ε. coli Competent Cells DH5 α )购自 Solarbio 公司; 西班牙琼脂糖为Biowest生产;质粒提取试剂盒(Plasmid Mini Kit I)购自OMEGA公司; 其余试剂均为国产分析纯。4.所用主要仪器普通手术器械;二氧化碳培养箱(REVCO);倒置显微镜(NIKON ECLIPSE TS100); KDC-160HR高速低温冷冻离心机(科大创新股份有限公司);酶标仪(BI0-RAD 680);纯水仪(Sartorius 611VF) ;90_3磁力搅拌器(上海振捷实验设备有限公司);ZRD-7080全自动新型鼓风干燥箱(上海智城分析仪器制造有限公司);微本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生地黄水提物在制备雌激素药物中的应用,所述的生地黄水提物是,将生地黄每次用其10倍重量的水煎煮2次,每次2h,合并2次水煎液,减压浓缩干燥得到生地黄浸膏状水提物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:冯卫生郑晓珂李冬梅刘朝妍蒋赟
申请(专利权)人:河南中医学院
类型:发明
国别省市:41

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