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骨诱导素制造技术

技术编号:679756 阅读:285 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术的骨诱导素,其特征在于:将骨头锯成小片,浸汇在1∶1氯仿甲醇液中2天,然后过滤加入到0. 6M盐酸进行脱钙10-20天过滤成型,再在1∶1氯仿甲醇液中浸泡2天,再加入到2M氯化钙里浸泡2天,水洗,加入饱和EDTA-Na↓[2]溶液浸泡2天,过滤,加入4M氯化锂里浸泡2天,然后过滤,用蒸馏水漂洗,冷冻干燥,进行消毒而成。 本发明专利技术的骨诱导素是利用牛、猪等动物的大块骨头制作的,充分去除抗原性成分具有免疫抑制剂处理,能代替人体的骨头。(*该技术在2013年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术是属于骨科和口腔科临床应用的一种生物材料,能替代自身植骨和促进骨后生长。现有的制备方法一般是这样的取兔、鼠和狗等四肢长骨,去掉软组织和骨髓,分别依次放入氯仿、甲醇混合液中脱脂1小时,0.6N HCl脱钙24h,2M CaCl2浸泡1小时和0.5M EDTA浸泡1小时,然后用8M LiCl处理1小时,再在55℃水浴中1小时,所得产物称为骨基质明胶。上述制备方法的缺点在于(1)因各种试剂处理的时间短,不能充分去除脂肪和非胶原性蛋白,加上缺乏免疫抑制剂的处理,故不能明显降低最终产物“骨基质明胶”的抗原性,因而只能用于实验动物,而禁忌用于临床;(2)不能用于猪、牛等大动物骨的脱钙,而为了工业化批量生产,这是必不可少的;(3)8M LiCl使骨胶原纤维收缩剧烈,而且浓度太高,成本昂贵;(4)缺乏一套适合于工业化生产的规范的操作流程,也无规范的样品剂型、包装和消毒;(5)没有将骨干和骨骺分开进行处理(一般是不要骨骺),这样不仅损失了一半的骨源,使成本上升,而且骨骺制成粒状后疗效较骨干更佳;(6)在制备程序上,本法是先将骨制备成条型和粒型后,再进一步脱指和非胶原蛋白的提取,这样由于面积扩大了,提取的效率也大大提高,而现有的方法缺乏先成型后制备的步骤。本专利技术的目的是利用我国价廉易得的猪骨,制备一种能用于我国骨科和口腔科临床,明显促进折逾合和替代自身植骨的生物材料-骨诱导素。本专利技术是这样实现的取新鲜后杀的猪四肢长骨,去除所有的软组织和骨膜,水洗后,在干骺端部位锯断,将骨干和骨骺分开。骨骺据成约0.5cm厚薄片状,将骨干内的内髓去除,并将其锯成约3-4cm长,用水彻底净残存血液。将骨干和骨骺分别浸泡入1∶1氯仿甲醇液中,体积比1∶3,共浸泡2-3天,每24小时换液一次。去除氯仿甲醇,用水将骨洗净,然后加入0.6N盐酸脱钙,体积比1∶3,每24-48小时换液,直至所有骨变软,时间约10-20天。去除HCl,充分洗去残存酸液后,骨干部分成型为1×1×40mm8颗粒状,再分别用1∶1氯仿、甲醇液浸泡2天,每24小时换液直至液体呈白色,无分层。去除氯仿、甲醇液后充分水洗,使其挥发干燥。分别加入2M氯化钙,体积比为1∶3,共48小时,每24小时换液。倾去氯化钙,流水充分冲洗后,加入饱和EDTA-Na2液,体积比1∶3,48小时,每24小时换液。去除EDTA-NA2液并用流水洗水残液后,加入4M氯化锂,体积比1∶2,共48小时,每24小时换液。倾去氯化锂液,用蒸馏水反复漂洗去除残存液体,然后冷冻干燥,用环氧乙烷消毒,安讯分装,存放于-18℃待用。本专利技术的骨诱导素是利用牛骨、猪骨等动物的大块骨头制作的,充分去除抗原性成份,具有免疫抑制剂处理,能制作人体的骨头。实施例将牛骨的四肢长骨去除所有软组织、骨膜和骨髓,用水洗干净,在干骺部分锯断,将骨干和骨骺分开,骨骺部分锯成3×2×2cm骨块,骨干锯成4×2×2cm骨块,骨干和骨骺分别浸泡在1∶1的氯仿和甲醇溶液中,体积比为1∶3,共浸泡2天,每天换液一次,去除氯仿、甲醇溶液,用水洗净,加入0.6N盐酸进行脱钙至变软,时间为15天,每天将变软的骨块取出,去除氯化氢,水洗,骨干部分成型为1×1×40mm3条状,骨骺部分成型为2×2×2mm3颗粒状,再分别用1∶1氯仿、甲醇浸泡2天,每天换液一次,滤去氯仿、甲醇,进行水洗,挥发干燥,分别加入2M氯化钙,进行2天浸泡,体积比为1∶3,每天换液一次,去除氯化钙后水洗,然后加入饱和EDTA-Na2,体积比为1∶3,浸泡2天,每天换液一次,去除EDTA-Na2溶液,进行水洗,加入4M氯化锂,体积比为1∶3,浸泡2天,每天换液,滤去氯化锂,用蒸馏水,漂洗,洗去残存液体,进行冷冻干燥,用环氯乙烷消毒后释放1天,存放在-18℃里。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种骨诱导素,其特征在于:将骨干和骨骺分开,骨骺锯成薄片状,骨干锯成长条状,将骨干内的骨髓去除,清洗,然后将骨干和骺分别浸泡1∶1氯仿甲醇液中,共浸泡2-3天,每24小时换液一次,过滤,清洗,然后加入0. 6N盐酸脱钙,时间为10-20,每24小时换液,过滤清洗;将骨干成型为条状,骨骺为颗粒状,再分别用1∶14氯仿、甲醇液浸泡2天,每24小时换液,过滤,水洗,干燥,再加入到2M氯化钙里,浸泡2天,每天换液一次,过滤、水洗,加入饱和EDTA-Na↓[2]溶液2天,每天换液一次;过滤,水洗,加入4M氯化锂X浸泡2天,然后过滤,用蒸馏水漂先,冷冻干燥,进行消毒而成。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种骨诱导素,其特征在于将骨干和骨骺分开,骨骺锯成薄片状,骨干锯成长条状,将骨干内的骨髓去除,清洗,然后将骨干和骺分别浸泡1∶1氯仿甲醇液中,共浸泡2-3天,每24小时换液一次,过滤,清洗,然后加入0.6N盐酸脱钙,时间为10-20,每24小时换液,过滤清洗;将骨干成型为条状,骨骺为颗粒状,再分别用1∶1氯仿、甲醇液浸泡2天,每24小时换液,过滤...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡晓波
申请(专利权)人:胡晓波
类型:发明
国别省市:66[中国|海南]

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