生物制品的终末灭菌制造技术

本发明专利技术涉及生物学活性产品特别是治疗或预防产品的灭菌方法以及由所述方法获得的组合物。所述方法包括获得含足以对该产品提供热稳定性的量的海藻糖的干燥样品，并且将该干燥的样品以足以大体上灭活病毒特别是非脂质外套包膜病毒的温度和持续时间暴露于加热条件中。所述干燥方法包括环境干燥条件和冻干。所述加热条件包括任何在本领域已知的条件并覆盖了宽范围的温度和加热时间。获得的组合物包含稳定的产品，并且不包含可检测的感染性病毒，特别是细小病毒。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及得自血液和其它生物来源的产品的灭菌。本专利技术涉及在海藻糖存在下，和在足以杀死病毒特别是细小病毒的条件下加热生物学活性产品一段时间。
技术介绍
从生物学活性产品中完全除去病毒和其它污染物对种类繁多的治疗和预防产品的生产和使用是必需的。目前使用一些方法。这些方法主要是干热处理、层析、溶剂-去污剂(SD)处理和巴氏消毒法。这些方法都有缺点并且没有一个在消除所有已知的病毒方面成功。也可能有尚未被表征的通过这些方法不能灭活的病毒。关于综述参见Cuthbertson等(1991)Blood Separation and Plasma Fractionation,Wiley-Liss,Inc．第385-435页；Mozen(1993),J.Clin.Apheresis 8:126-130；Ingerslev(1994)Haemostasis 24:311-323；Dorner等(1993)VirologicalSafety Aspects of Plasma Derivatives,Brown编辑，Dev.Biol.Stand.,Basel,Karger，第81卷，第137-143页；Mannucci(1993)Vox Sang.64:197-203；和Hamman等(1994)Vox Sang.67:72-77。种类繁多的具有治疗效用的产品是得自诸如血浆和细胞系的生物来源。在美国大多数用于分级分离的血浆是在遍及全国分布的收集中心通过血浆除去法获得的。该中心在美国和欧洲提供商业的分级分离产品。每年从大约一千三百万捐赠中收集大约九百万升血浆。红十字会增加大约800,000升到这个数目中。可以将来自人类血浆的产品划分为几组白蛋白产品、免疫球蛋白、冷不溶球蛋白、凝结产品和蛋白酶抑制剂。所述白蛋白产品也称为Ⅴ部分产品，主要用来在诸如烧伤或出血性休克的休克疾病中恢复胶体渗透压，在这些疾病中，液体丧失是一个基本问题。所述免疫球蛋白或“γ球蛋白”是从Ⅱ部分分离的，且包含代表血浆库来源的抗体的混合物。用于被动免疫的许多超免疫球蛋白是从具有高水平保护性抗体的供体血浆分离的。所述冷不溶球蛋白包括血纤蛋白原和von Willebrand氏因子。所述凝结产品包括分别用于血友病A和B的替代治疗的抗血友病因子Ⅷ和因子Ⅸ复合物。制备了活化形式的称为抗抑制剂凝结复合物的因子Ⅸ复合物并用于治疗具有因子Ⅷ抑制剂的病人。所述蛋白酶抑制剂包括αl蛋白酶抑制剂，也称为αl抗胰蛋白酶，它用于治疗先天性缺陷。抗凝血酶Ⅲ也是导致血栓形成并发症的先天性缺陷的抑制剂。其它体液是治疗产品的来源。例如，以前从再生障碍性贫血病人的血液或尿中纯化红细胞生成素。美国专利第4,677,195号。高纯度的白蛋白也得自人胎盘。Grandgeorge和Veron(1993)Virological SafetyAspects of Plasma Derivatives,Brown编辑，Dev.Biol.Stand.,Basel,Karger，第81卷，第237-244页。现在在转基因羊的奶中生产重组蛋白是一个商业的事实。现在大量的治疗产品得自表达重组蛋白的细胞培养物。所述细胞培养物一般在动物或人血清存在下生长。所述产品得自这些细胞或细胞培养上清液，因此包含来自培养基或细胞自身的病毒。这些获得的产品包括但不限于集落刺激因子、单克隆抗体和其衍生物、生长因子，诸如红细胞生成素、白细胞介素。生长因子单独代表数百万美元的工业。关于综述参见Erikson(1991)Sci.Am.,Feb.1991第126-127页。虽然得自细胞培养物的蛋白的病毒污染风险比与血浆产品相关的风险小得多，但是当涉及细胞时总是有这种病毒污染的风险。由于这个原因，为了灭活病毒将诸如单克隆抗体的产品经受热处理。而且，加入人血清白蛋白(HSA)以稳定重组蛋白的制剂是通常的做法。临床关注的主要血液运载的病毒是乙型肝炎和丙型肝炎病毒以及HIV和HTLV逆转录病毒。至于血液衍生物，HTLⅥ和Ⅱ以及巨细胞病毒(CMB)似乎与细胞相关，并且因此在无细胞产品中不存在危险。当发现新的病毒时，要改变灭活方法以适应它们。例如，人免疫缺陷病毒(HIV)经受得住因子Ⅷ的标准加工的发现需要改变要求加入HSA的方法，以在新的、更严格的条件下稳定该产品。Mozen(1993)。在血浆部分中灭活HIV和肝炎病毒的方法是公知的。如以上描述，在HSA的存在下在60℃加热10小时灭活HIV。在因子Ⅷ和因子Ⅸ的制剂中通过在冻干状态下在80℃加热72小时发现非甲、非乙肝炎(NANBH)被灭活。英国血友病中心的研究小组，即监视通过浓缩物传递病毒的指导者(1988)Lancet Oct.8，第814-816页。在最近几年，已鉴别出几种输血传播的疾病，这些疾病虽然从公共健康观点来说不常见，但是对血浆和血浆衍生物以及细胞产品的使用具有真实的和潜在的冲击。这些包括细小病毒(B19)的传播。这些病因学因子似乎抵抗目前用于病毒灭活的方法。Sherwood(1993)Brown编辑Virological Safety Aspects of Plasma Derivatives,Brown编辑，Dev.Biol.Stand.,Basel,Karger，第81卷，第25-33页。目前使用的病毒灭活方法也可能引起获得的生物学产品的生物学活性的改变。所述产品的免疫原性尤其与灭菌处理可能诱导蛋白伸展和/或聚集有关。例如，已发现因子Ⅷ浓缩物显示FⅧ活性的证据，一步法比二步法的效力更高、更快产生FVa和增加较低分子量的多肽。病毒灭活方法也可能诱导非-FⅧ成分的改变，而这些改变可能部分导致这些浓缩物的某些的免疫抑制活性。Barrowcliffe(1993)Virological Safety Aspects of Plasma Derivatives,Brown编辑，Dev.Biol.Stand.,Basel,Karger，第81卷，第125-135页。在频繁暴露于生物学来源产品的病人中在体内和离体均已发现在免疫系统功能方面的值得注意的变化。在HIV阴性的病人中，当通过它们的对刺激的应答和根据它们的细胞周转(turnover)的标志物评价时，变化包括免疫活性细胞的数目和功能下降。在当慢性病毒疾病存在时，这些改变很可能发生。而且因子浓缩物的变性同种蛋白杂质和其它污染物也可能导致免疫抑制。参见Ingerslev(1994)综述。人类细小病毒是最近发现的因子，给予的编码名为B19。Cossart等(1975)Lancet 1:72-73。它是一个非常小(24nm)的单链DNA病毒，具有一个非常简单的蛋白外壳，但是没有脂质包膜。它导致1-2周的短暂的病毒血症，但是能获得非常高的每ml至少1012病毒颗粒循环病毒滴度。虽然细小病毒正常情况下引起经常没有临床表现的相对小病，引起称为第五病或传染性红斑的轻度风疹样疹，但是它也能引起更严重的反应。细小病毒感染骨髓干细胞，而这可在有先存在的、潜在的贫血的病人中导致严重的、危及生命的疾病。作为急性造血阻断的结果的再生障碍危象可能在有先天性溶血性贫血和免疫缺陷状态的病人中发生。细小病毒也在怀孕妇女导致胎儿水肿。因此细小病毒对那些接受血浆来源本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于无菌给予的生物学活性产品的终末灭菌方法，包含以下步骤：（ａ）获得含该产品的干燥样品和一定量的α－Ｄ－吡喃葡糖－α－Ｄ－吡喃葡糖苷（海藻糖）的干燥产品，所述海藻糖的量足以对该产品提供基本热稳定性；以及（ｂ）加热该干燥样品，加热温度 和持续时间足以基本上灭活感染性病毒。

【技术特征摘要】
US 1996-5-14 08/647,5151．用于无菌给予的生物学活性产品的终末灭菌方法，包含以下步骤(a)获得含该产品的干燥样品和一定量的α-D-吡喃葡糖-α-D-吡喃葡糖苷(海藻糖)的干燥产品，所述海藻糖的量足以对该产品提供基本热稳定性；以及(b)加热该干燥样品，加热温度和持续时间足以基本上灭活感染性病毒。2．按照权利要求1的方法，其中所述产品得自血液并选自白蛋白产品、免疫球蛋白、凝结产品和蛋白酶抑制剂。3．按照权利要求2的方法，其中所述的白蛋白产品选自HSA、冷可溶球蛋白和血纤蛋白原。4．按照权利要求2的方法，其中所述的免疫球蛋白选自抗破伤风、百日咳、肝炎、疱疹、水痘带状疱疹和狂犬病的抗体。5．按照权利要求2的方法，其中所述的凝结产品选自抗血友病因子Ⅷ、因子Ⅸ复合物和活化的因子Ⅸ复合物。6．按照权利要求2的方法，其中所述蛋白酶抑制剂选自α-1蛋白酶抑制剂和抗凝血酶Ⅲ。7．按照权利要求1的方法，其中所述的生物学活性产品得自选自血液、血浆、血清、胎盘、奶、尿、细胞培养物和细胞培养上清液的生物来源。8．按照权利要求7的方法，其中所述的生物来源是细胞培养物或细胞培养上清液，并且该产品选自集落刺激因子、单克隆抗体和其衍生物以及生长因子。9．按照权利要求7的方法，其中所述的生物来源是细胞培养物或细胞培养上清液，并且该产品是重组体。10．按照权利要求8的方法，其中所述的生长因子选自红细胞生成素、细胞因子和白细胞介素。11．按照权利要求1的方法，其中所述生物学活性产品是镇痛剂。12．按照权利要求11的方法，其中所述的镇痛剂选自吗啡、苯佐卡因、哌替啶和杜冷丁。13．按照权利要求1的方法，其中所述的生物学活性产品是麻醉剂。14．按照权利要求13的方法，其中所述的麻醉剂选自布比卡因、阿曲库铵和维库铵。15．按照权利要求1的方法，其中所述的生物学活性产品是化疗剂。16．按照权利要求15的方法，其中所述的化疗剂选自放射性同位素、长春碱类(vinca alkaloids)、阿霉素、硫酸搏来霉素、卡铂、顺铂、环磷酰胺、阿糖胞苷、甲氮咪胺、放线菌素D、柔红霉素盐酸盐、阿霉素盐酸盐、鬼臼乙叉甙、氟尿嘧啶、盐酸氮芥、抗瘤氨酸、巯基嘌呤、氨甲喋呤、丝裂霉素、邻氯苯对氯苯二氯乙烷、戊制菌素、溴丙哌嗪、盐酸甲基苄肼(procarbaze)、链脲霉素、紫杉醇、硫鸟嘌呤和尿嘧啶氮芥。17．按照权利要求1的方法，其中所述的生物学活性产品是激素。18．按照权利要求17的方法，其中所述的激素选自雌激素、睾酮、孕酮及其合成的类似物。19．按照权利要求1的方法，其中所述的生物学活性产品是疫苗。20．按照权利要求19的方法，其中所述的疫苗选自单抗原亚基疫苗和多抗原亚基疫苗，以及杀死的细菌和病毒制剂和癌抗原。21．按照权利要求1的方法，其中所述的干燥样品是通过选自风干、真空干燥、喷雾干燥和冻干的方法获得的。22．按照权利要求1的方法，其中所述的基本热稳定性导致该产品的活性丧失不到大约30％。23．按照权利要求22的方法，其中所述的稳定性导致该产品的活性丧失不到大约15％。24．按照权利要求23的方法，其中所述的稳定性导致该产品的活性丧失不到大约10％。25．按照权利要求1的方法，其中所述的干燥样品的残留含湿量不到大约4％。26．按照权利要求25的方法，其中所述的残留含湿量不到大约2％。27．按照权利要求26的方法，其中所述的残留含湿量不到大约1％。28．按照权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：J坎平加，R阿尔科克，
申请(专利权)人：廓德伦特控股剑桥有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]