骨组织再生剂制造技术

一种可应用于口腔手术过程的用于骨组织再生的组合物及其制备方法，其中，在所述手术过程中向接受移植的部位填充移植材料，所述移植材料由自体骨或其它填充材料的混合物组成，其中可含或不含屏蔽材料，并且其特征在于填充材料中所用的基本组分是直接从患者血液中获得的富含生长因子的血浆（Ｐ．Ｒ．Ｇ．Ｆ）的凝胶，其中所述的凝胶至少部分地充满所要再生的洞。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术总的来说涉及外科实践领域的骨组织再生，尤其涉及口腔外科实践中的骨组织再生，其中，通过用可刺激和加速再生的移植材料填充骨腔来实现骨组织再生。到目前为止，人们使用过各种移植材料，并且所用材料的性质决定了骨组织是如何再生的。关于这一点，许多作者公开了为此目的使用不同的材料和/或组合物的研究和报告。Yarnazaki Y、Oida S、Akimoto Y、Shiosa S在Clin Orthop Related Res(1988234；204-9)中指出，对于该类型的再生，可以使用与熟石膏(硫酸钙)结合的来自骨的形态发生蛋白质。传统上，自体骨和脱矿质骨(DFDBA)，无论是单独使用还是与其它元素联用，都曾被用于在该技术中构建骨洞用的移植材料。此外，这种类型的移植材料还用不同的屏蔽材料来保护，以防止附近的组织侵蚀移植材料。人们使用过各种材料作为前述移植材料的屏蔽材料，最常用的是聚四氟乙烯薄膜，但由于它不是可生物降解的而可能会产生问题，并且在某些病例中可以引起感染。除此之外，由于它通常以固体形式使用，因此在手术过程中必须将它修整以使其适合移植物的接受部位，然后在适当的位置缝合。US专利5,366,507具体描述了一种组合物，其是以脱矿质骨和硫酸钙的混合物为基础的移植材料与由磷酸钙组成的屏蔽材料的组合。这种组合物不能明显改进前述的技术。各种研究显示，在血液中存在的生长因子有利于骨的形成，特别是生长因子P.D.G.F和T.G.F.B。然而，在门诊患者环境中提取和浓缩这种生长因子的实践是未知的，而这些生长因子的临床上可观察的和可测定的效果同样也是未知的。在本专利技术的一个具体实施方案中，使用富含生长因子的血浆(P.R.G.F)凝胶作为移植材料，用于填充和使洞内的骨和骨缺损得到再生。本专利技术提供一种获得和制备用于门诊患者使用的富含因子的血浆的方法。本专利技术还提供一种用于骨组织再生的方法和组合物，其可以改善再生的速度并且可以给患者快速施用。在本专利技术的另一个实施方案中，提供了一种用于制备P.R.G.F凝胶的工具包。有利地是，将P.R.G.F凝胶用于骨组织再生可以加速骨的再生并且给骨再生带来比目前所用技术更大的益处，以及软组织的更快和更可预知的愈合，从以下所获得的结果可以明显看到这些效果。本专利技术提供了一种制备前述凝胶的方法，该方法首先在手术开始前数分钟并且在施用麻醉剂之前从正在接受治疗的患者中抽血。使用5ml的试管，从每位患者中取10-40ml血，其中放入10％柠檬酸三钠起抗凝剂作用。将这些试管在160-800G的速度(取决于可以采用的不同方法)下在室温下离心6分钟或更短的时间(取决于速度)。血液分离成如下三种基本组分-在试管底部的红细胞。-富含生长因子的血浆(P.R.G.F)，其在试管的中部，红色层的上面。-贫含生长因子的血浆(P.P.G.F)，在试管的上部。将每一5ml试管中的体积为1ml的上层P.P.G.F层丢弃。根据计数n＝10测定，此P.P.G.F中存在的血小板小于15％。将试管中层的富含因子的血浆转移至微量离心管中并向每个含有1.2ml P.R.G.F的离心管中添加50μl的10％氯化钙，以致于随着将此状态的血浆静置，在15-25分钟后形成P.R.G.F凝胶。也可以将此血浆与人凝血酶(500单位)和氯化钙混合，以便迅速(3-10秒)获得凝胶并且可以用注射器来施用之。此凝胶可以单独用于填充需要再生的骨洞，得到最佳结果，或者借助于常规屏障材料来提供外层保护，以下将进行解释。可以将此凝胶与其它组分合用，例如硫酸钙、自体骨、可重吸收的羟磷灰石、磷酸三钙、碳酸钙或其它骨传导性或骨诱导性的再生材料。为了生产P.R.G.F，制备工具包中应包含离心机、用于分离血浆层的移液管和用于抽血的系统。患者的选择是基于不存在可能产生与治疗对抗的指征的全身性或局部疾病。得到了所有被通知进行研究的患者的同意。20位患者患有垂直牙根断裂或需要拔牙的重度牙周病，选择这些患者是因为随后能够在种植体的区域进行活组织检查而没有额外的不适。将患者随机分成P.R.G.F治疗组和对照组。P.R.G.F组的平均年龄为41岁(范围35-55)，4名男性和6名女性。对照组的平均年龄为42岁(范围38-54)，4名男性，6名女性。另外有三名患者(2男1女)需要在口腔的不同部位进行多处拔牙。在每位患者中，对一个部位使用P.R.G.F，但不对其它部位使用，治疗的类型对各部位随机指定。这样可以包括最好的对照组，因为两种类型的治疗均在同一患者中进行，并且采用同样的外科过程、具有相同的微生物条件和同样的外科医生。所有患者均接受抗生素治疗；使用阿莫西林(1.5g/天)。使皮瓣升高，以便能够充分看到并且可以在第一次尝试时便闭合。拔牙后将每个部位仔细刮擦。在实验治疗组的10位患者中，用P.R.G.F凝胶填充缺损部位。在5个病例中，将血浆与自体骨混合，以防止皮瓣萎陷。对于对照组，过程相同，但不使用P.R.G.F凝胶。在任何一组中都不使用膜，以便排除屏蔽效果对P.R.G.F可能的有益效果产生影响的可能性。活组织检查技术在10-15周之间(取决于患者何时方便)对移植接受部位进行活组织检查。所有活组织检查均由不知道对每一缺损部位实施过哪种治疗的检查员来进行。用空心环锯牙钻在接受移植的部位的中央钻孔并且钻至3mm深，取出活组织。用在5％甲酸中的10％福尔马林溶液将骨活组织在药签上固定48小时，然后封固在石蜡中。从每个活组织中作出5mm厚的切片并且用苏木精和曙红染色。在明亮的光照下对染色的切片拍照。将所有活组织送至实验室进行分析，不具体注明哪个属于对照组并且哪个是来自测试组。结果对所有10位用P.R.G.F处理的患者的上皮组织的形成进行了评价，评价结果为非常好或极佳(比正常情况下的好得多，并且比对照组相对较好)。有8/10的病例在治疗区域的再生几乎是完全的。用牙周探针进行再生程度的评价，并与已经拍过照的以前的缺损进行比较。这些区域的活组织检查显示有成熟的密质骨存在，其具有组织化良好并且形态正常的小梁。其它两个用P.R.G.F处理的病例显示出部分再生，在活组织检查中表现出具有组织化较差的小梁的结缔组织。两名患者(1男1女)均为吸烟者并且在三个牙槽壁中存在严重缺损。在第10周所取的活组织和第16周所取的活组织之间，小梁的组织化程度有明显不同，并且还取决于缺损部位的大小和形状。在具有严重缺损并用P.R.G.F联合自体移植物治疗以避免皮瓣萎陷的患者中，获得了较大的前庭-舌宽度。在对照组，在患者的活组织检查中发现了相互一致的情况结缔组织填充了缺损部位的很大部分，与用P.R.G.F处理的病例有明显差别。所有对照组的活组织检查均显示有结缔组织和含骨小梁的结缔组织存在。在任何一个病例中都没有发现成熟骨。上皮形成的状况被定级为正常，显示出与用P.R.G.F治疗有显著不同。在具有一个以上接受移植的部位的患者中，一个部位用P.R.G.F治疗，其它部位用常规方法治疗，用P.R.G.F治疗的区域其上皮形成要快得多。P.R.G.F治疗区域的活组织检查显示有更多的成熟骨，其具有组织化良好的小梁和较大的骨的再生。使用P.R.G.F为更快和更有效的骨再生提供了条件。这种P.R.G.F凝胶易于操作，但在使用时必本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：爱德华多·阿尼图亚阿尔德科亚，
申请(专利权)人：爱德华多·阿尼图亚阿尔德科亚，
类型：发明
国别省市：