一种带内支撑的组织工程化软骨的制备方法技术

本发明专利技术涉及医学组织工程技术领域，是临床上用作永久性假体的一种带有内支撑的组织工程化软骨的制备方法。本发明专利技术以不可降解、具有高稳定性的医用多孔高密度聚乙烯ＭＥＤＰＯＲ为材料制成预定形状和大小的内支撑支架，再用生物相容性好可被机体降解吸收的聚羟基乙酸（ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｃ　　ａｃｉｄ，ＰＧＡ）无纺网包裹内支撑支架形成ＭＥＤＰＯＲ－ＰＧＡ复合支架，然后将制备的自体骨髓基质干细胞悬液均匀滴于复合支架表面的ＰＧＡ无纺网内，用含ＴＧＦ－β↓［１］、ＩＧＦ－Ｉ、胰岛素的ＤＭＥＭ软骨向诱导液培养，经一定时间体外培养后植于皮下４－６周，即可构建出本发明专利技术组织工程化软骨。本发明专利技术用自体骨髓基质干细胞作为种子细胞制作带内支撑的组织工程化软骨假体，由于骨髓基质干细胞来源广，取材方便，体外培养增殖能力强，培养简单，因此可以制作出临床上所需的永久性植入体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种带内支撑的组织工程化软骨的制备方法，步骤如下：（１）制备自体骨髓基质干细胞悬液按常规在无菌条件下抽取自体骨髓，利用全骨髓贴壁培养法分离提纯ＢＭＳＣｓ，ＣＯ↓［２］孵箱内培养，收集细胞制成细胞悬液备用；（２）生物材料支架的制备将ＭＥＤＰＯＲ制成预定的体积与形状，外裹ＰＧＡ无纺网，制成ＭＥＤＰＯＲ－ＰＧＡ复合支架；（３）细胞－支架复合及培养将ＭＥＤＰＯＲ－ＰＧＡ复合支架清洗消毒后置入含１０％胎牛血清的ＤＭＥＭ培养液预培养后，取出吸干，将上述（１）制备的自体ＢＭＳＣｓ细胞悬液均匀滴加于复合支架表面，３７℃、５％ＣＯ↓［２］、饱和湿度的ＣＯ↓［２］孵箱内培养培养２－４ｈ后移入含１０％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ的培养液内按常规继续培养，隔日换液一次，５－７天后改用软骨向诱导液继续培养，所说的软骨向诱导液为含ＴＧＦ－β↓［１］５－１５ｎｇ／ｍｌ、ＩＧＦ－Ｉ４０－６０ｎｇ／ｍｌ、胰岛素２０－４０ｎｇ／ｍｌ的ＤＭＥＭ培养液，３周后行皮下移植，皮下培养４－６周，即成带内支撑的组织工程化软骨。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：江华，朱，吴玉家，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]