一种霍乱毒素毒力基因检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种霍乱毒素毒力基因检测试剂盒及其检测方法，本发明专利技术的试剂盒包括以霍乱弧菌ctxA基因为靶基因、基于环介导恒温扩增技术设计的三对引物：内引物FIP/BIP、外引物F3/B3、环引物LF/LB，以及Bst?DNA聚合酶、反应液、样品预处理液、显色液、稳定液和阳性对照；检测霍乱毒素毒力基因的方法包括细菌DNA的提取、霍乱毒素毒力基因的环介导恒温扩增和显色检测。本发明专利技术的霍乱毒素毒力基因检测试剂盒扩增效率高、特异性强、灵敏度高、漏检率低，显色效果明显，适用于产毒霍乱弧菌的快速检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种霍乱毒素毒力基因检测试剂盒，包括Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶，反应液，样品预处理液，显色液，稳定液和阳性对照，其特征在于：还包括以霍乱弧菌ｃｔｘＡ基因为靶基因、基于环介导恒温扩增技术设计的各三对引物：内引物ＦＩＰ／ＢＩＰ、外引物Ｆ３／Ｂ３以及环引物ＬＦ／ＬＢ，所述的三对引物分别为：　　内引物ＦＩＰ：５’－ＣＣＡＡＡＡＴＧＡＡＣＴＣＧＡＴＡＣＣＡＴＣＣＡＴＡＡＧＡＡＧＴＴＴＣＴＧＣＴＴＴＡＧＧＴＧ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　１　　内引物ＢＩＰ：５’－ＧＧＴＧＣＴＴＧＡＴＧＡＡＣＡＡＴＴＡＣＡＴＣＧＴＣＴＧＣＴＧＣＴＧＧＡＧＣＡＡＴＡ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　２　　外引物Ｆ３：５’－ＡＧＴＣＣＴＣＡＴＣＣＡＧＡＴＧＡＡＣ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　３　　外引物Ｂ３：５’－ＣＣＴＧＣＣＡＡＴＣＣＡＴＡＡＣＣＡ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　４　　环引物ＬＦ：５’－ＡＴＡＴＴＴＧＧＧＡＧＴＡＴＧＧＡＡＴＣＣ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　５　　环引物ＬＢ：５’－ＴＡＡＴＡＧＧＧＧＣＴＡＣＡＧＡＧＡＴＡＧＡＴＡ－３’ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ　６。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王婷，张胜萍，陆晔，田桢干，王传贵，杜正平，
申请(专利权)人：华东师范大学，中华人民共和国上海出入境检验检疫局，
类型：发明
国别省市：31