结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法技术

本发明专利技术提供结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法，设计对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物、自身淬灭探针，引物的上游引物为5’-ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT-3’，下游引物为5’-CGCAAGCTTCATTCCACCGCTACACCAG-3’，自身淬灭探针的上游引物为5’-cgcgCTCGTAGGTGGTTTGTCGC(FAM)G-3’，下游引物为5’-CCCGCACGCTCACAGTTAAG-3’，上游引物3’端最后一个碱基为G，在3’端的第二个碱基为C，在这个C上标记荧光物质FAM，在探针的5’端引入几个和3’末端互补的碱基(cgcg)以便自身配对形成发夹结构。通过提取待测样品的DNA，再结合实时荧光定量PCR检测技术，可达到准确定量待测标本中结核分枝杆菌DNA的目的。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种结核分枝杆菌荧光定量ＰＣＲ检测方法，其特征在于：提供用于对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物和自身淬灭探针，所述引物的上游引物为５’－ＡＣＴＣＣＡＴＧＧＧＡＴＡＣＧＧＣＣＣＡＧＡＣＴＣＣＴ－３’，下游引物为５’－ＣＧＣＡＡＧＣＴＴＣＡＴＴＣＣＡＣＣＧＣＴＡＣＡＣＣＡＧ－３’，所述自身淬灭探针的上游引物为５’－ｃｇｃｇＣＴＣＧＴＡＧＧＴＧＧＴＴＴＧＴＣＧＣ（ＦＡＭ）Ｇ－３’，下游引物为５’－ＣＣＣＧＣＡＣＧＣＴＣＡＣＡＧＴＴＡＡＧ－３’，上游引物３’端最后一个碱基为Ｇ，在３’端的第二个碱基为Ｃ，在这个Ｃ上标记荧光物质ＦＡＭ，在探针的５’端引入几个和３’末端互补的碱基（ｃｇｃｇ）以便自身配对形成发夹结构。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈茶，张伟铮，黄彬，曾建明，王丽娜，鄂顺梅，李有强，李沫，
申请(专利权)人：广东省中医院，
类型：发明
国别省市：81