一种蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基，涉及一种蓝靛果忍冬愈伤组织植株再生诱导培养基。解决现有蓝靛果忍冬的组织培养主要采取腋芽或茎尖培养，存在植株分化率低及培养基成本高的问题。培养基由大量元素、微量元素和激素组成，其中所述激素由1.0～2.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤或者激动素和0.05～0.2mg/L的吲哚丁酸或者萘乙酸组成。利用本发明专利技术的LD1培养基，蓝靛果忍冬幼茎很容易被诱导形成愈伤组织，愈伤组织诱导率均可达到90％以上；愈伤组织诱导成植株的几率高，植株分化率可达50％～82％，比现有MS培养基的植株分化率提高了66.6％～173.3％，比对照MS培养基节约投入成本45.1％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种蓝靛果忍冬愈伤组织植株再生诱导培养基。
技术介绍
蓝靛果忍冬(Lonicera caerulea)，别名蓝靛果，俗称山茄子、羊奶子、黑瞎子果 等，为多年生落叶小灌木，是东北亚地区特有小桨果之一，其分布区域主要在俄罗斯、朝鲜 北部、日本和中国东北的大小兴安岭、长白山、张广才岭等林区。蓝靛果忍冬是继黑穗醋栗、树莓、越橘之后的又一种新兴的小浆果，主要生长在林 中湿地或林缘、沼泽草甸，要求弱酸的土壤，上部枝条耐-40°C以上低温，适应性较强。蓝靛果忍冬果实具有较高的营养保健价值，富含糖类、有机酸、矿物质、维生素等 成分。所含17种氨基酸的总量高于普通水果，其中必需氨基酸占总量40%左右；矿质元素 中锌、硒、铁、钙含量较高；果实可鲜食，也可加工成饮料、果酱、果糕和果酒等；另外，茎叶 和果实又可提取天然紫红色素。近年来随着蓝靛果忍冬市场需求不断增长，其鲜果价格也不断增高，近4年来由 每公斤4元涨到每公斤10 15元，速冻果市场价格增至9500元/吨，浓缩汁国际市场价 格为6. 0 8. 0万元/吨，饮品销售价为5 10元/瓶，市场供不应求。随着对野生蓝靛果饮料、果酒、色素等产品开发，掠夺式采收导致野生资源锐减， 加之资源分布有限，难以满足日益增长的市场需求，因此开展人工抚育与栽培十分必要。而 制约人工栽培的主要问题是种苗繁殖困难，生产上主要采用扦插与分根、种子实生苗繁殖 种，前者繁殖系数低，成活率不高，且破坏野生资源；后者种苗变异性较大，影响果实的品 质与产量，且因种子粒小，成苗困难，育苗技术难度大。通过组织培养快速繁殖可以解决上 述问题，国内植物组培快繁一般采用MS培养基，但因培养植物种类、取材时期、培养部位不 同，其效果也不同。目前国内有关蓝靛果忍冬组培方面的报道较少，主要采取腋芽或茎尖 培养，但效果不理想，尚没有直接分化芽丛的报道，需通过愈伤诱导植株，植株分化率不足 30%，且未见在生产上应用。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有蓝靛果忍冬的组织培养主要采取腋芽或茎尖培养， 存在植株分化率低及培养基成本高的问题，本专利技术提供了一种蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植 株再生诱导培养基。本专利技术蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基，是由大量元素、微量元素 和激素组成，其中所述大量元素由浓度为900 920mg/L的NH4N03、90 100mg/L的ΚΗ2Ρ04、 1000 1050mg/L 的 KNO3>240 250mg/L 的 CaCl2 · 2H20、200 210mg/L 的 MgSO4 · 7H20 和15 18mg/L的EDTA-Fe组成，所述微量元素由浓度为0. 83mg/L的KI、22. 3mg/L的 MnSO4 ·4Η20、6· 2mg/L 的 Η3Β03、8· 6mg/L 的 ZnSO4 ·7Η20、0· 025mg/L 的 Na2MoO4 ·2Η20、0· 25mg/ L的CuSO4 ·5Η20和0. 025mg/L的CoCl2 ·6Η20，所述激素由浓度为1. 0 2. Omg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)或者激动素(KT)和0. 05 0. 2mg/L的吲哚丁酸(IBA)或者萘乙酸(NAA) 组成。本专利技术在六月初(六月一号至六号)蓝靛果忍冬生长盛季采集其幼茎，用70% (体积)酒精浸泡10s，无菌水冲洗3遍，再用0. (质量)升汞液消毒8min，再无菌水冲 洗3 5遍；接种至培养基时将蓝靛果忍冬幼茎两端剪去，接种于本专利技术的LD1培养基表面； 培养条件为培养温度M ，光照时间14 16h/d，光照强度1800 20001x，20 30 天继代一次。本专利技术的蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基(记为LD1培养基)中 无机盐(大量元素和微量元素)含量是2483. 23 2586. 23mg/L,较佳的无机盐含量是 2534. 73mg/L,与现有MS培养基中无机盐含量0604. 005mg/L)的质量浓度比为1 1. 85 1.78，较佳的比值为1 1.82，即现有MS培养基所含无机盐浓度是本专利技术的LD1培养基所 含无机盐浓度的1. 85 1. 78倍。本专利技术的LD1培养基中无机盐的浓度低于现有MS培养 基所含无机盐浓度，在MS培养基的基础上将大量元素的用量进行了调整，降低了 N03_、Mg2+、 铁元素浓度；微量元素中硫酸铜用量为MS培养基的10倍，同时含有微量的Mo，其参与氨基 酸合成与代谢，有促进器官形成的作用。本专利技术合理降低培养基无机盐的含量，有利于分化培养，而高浓度无机盐抑制愈 伤组织植株的再生，尤其是磷镁含量越高、比值越大其抑制作用越明显；微量元素铜含量的 增加可促进愈伤组织健康生长及胚状体的产生。利用本专利技术的LD1培养基进行蓝靛果忍冬 幼茎培养，蓝靛果忍冬幼茎很容易被诱导形成愈伤组织，愈伤组织诱导率均可达到90%以 上；再将诱导出的淡绿色愈伤组织转接至本专利技术的LD1培养基上进行继代与分化培养，愈 伤组织诱导成植株的几率高，再生植株诱导率(即植株分化率)可达50% 82%，比现有 MS培养基的植株分化率(30%)提高了 66.6% 173.3%，比对照MS培养基节约投入成本 45. 1%。本专利技术解决了蓝靛果忍冬在繁殖方面解决了一系列组培难题，通过幼茎培养诱导 出愈伤组织及再生植株，而且种性一致性强，经组培苗移栽植株生长与结果性状测定，种性 纯度98%以上，且能够达到快速繁殖优良种苗的目的，并已在生产中得到推广应用，推广面 积达到100余亩，表现出高度一致性和丰产性。本专利技术的LD1培养基配制方法与常规培养基配制方法相同，但配方要求严格，各种 组分中元素与激素一定要在其浓度范围内进行配制。具体实施例方式本专利技术技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的 任意组合。具体实施方式一本实施方式为蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基， 培养基是由大量元素、微量元素和激素组成，其中所述大量元素由浓度为900 920mg/L的 NH4NO3>90 100mg/L 的 KH2PO4UOOO 1050mg/L 的 KNO3>240 250mg/L 的 CaCl2 · 2H20、 200 210mg/L的MgSO4 · 7H20和15 18mg/L的EDTA-Fe组成，所述微量元素由浓度为 0. 83mg/L 的 KI、22. 3mg/L 的 MnSO4 ·4Η20、6· 2mg/L 的 Η3Β03、8· 6mg/L 的 ZnSO4 ·7Η20、0· 025mg/ L 的 Na2MoO4 · 2H20、0. 25mg/L 的 CuSO4 · 5H20 和 0. 025mg/L 的 CoCl2 · 6H20，所述激素由浓度为1. 0 2. Omg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)或者激动素(KT)和0. 05 0. 2mg/L的吲哚 丁酸(IBA)或者萘乙酸(NAA)组成。本实施方式的蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基(记为LD1培养基)， 合理降低培养基无机盐的含量，有利于分化培养，而高浓度无机盐抑制愈伤组织植株的再 生，尤其是磷镁含量越高、比值越大其抑制作用越明显；微量元素铜含量的增加可促进愈伤 组织本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基，其特征在于蓝靛果忍冬幼茎愈伤组织植株再生诱导培养基是由大量元素、微量元素和激素组成，其中所述大量元素由浓度为９００～９２０ｍｇ／Ｌ的ＮＨ４ＮＯ３、９０～１００ｍｇ／Ｌ的ＫＨ２ＰＯ４、１０００～１０５０ｍｇ／Ｌ的ＫＮＯ３、２４０～２５０ｍｇ／Ｌ的ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ、２００～２１０ｍｇ／Ｌ的ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ和１５～１８ｍｇ／Ｌ的ＥＤＴＡ－Ｆｅ组成，所述微量元素由浓度为０．８３ｍｇ／Ｌ的ＫＩ、２２．３ｍｇ／Ｌ的ＭｎＳＯ４·４Ｈ２Ｏ、６．２ｍｇ／Ｌ的Ｈ３ＢＯ３、８．６ｍｇ／Ｌ的ＺｎＳＯ４·７Ｈ２Ｏ、０．０２５ｍｇ／Ｌ的Ｎａ２ＭｏＯ４·２Ｈ２Ｏ、０．２５ｍｇ／Ｌ的ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ和０．０２５ｍｇ／Ｌ的ＣｏＣｌ２·６Ｈ２Ｏ，所述激素由浓度为１．０～２．０ｍｇ／Ｌ的６－苄基氨基嘌呤或者激动素和０．０５～０．２ｍｇ／Ｌ的吲哚丁酸或者萘乙酸组成。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵恒田，邓中枢，黄福山，沈云霞，班文杰，
申请(专利权)人：中国科学院东北地理与农业生态研究所，
类型：发明
国别省市：93
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