肺炎链球菌C多糖的纯化方法技术

技术编号:6677096 阅读:483 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及肺炎链球菌C多糖的纯化方法。本发明专利技术的肺炎链球菌C多糖纯化方法包括菌体裂解、乙醇分级沉淀、去除蛋白杂质等步骤。通过对C多糖纯化方法工艺参数的优化,获得的C多糖结构完整,磷含量、氨基己糖含量、糖醛酸含量等关键指标,以及抗原活性、分子量大小等均与参比C多糖接近,而且杂质含量低,收率较高,适合作为肺炎链球菌多糖疫苗、蛋白结合疫苗生产中C多糖检测的对照品,也可用于评价肺炎链球菌多糖疫苗、蛋白结合疫苗的检测试剂。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种肺炎链球菌C多糖的的纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:  (1)培养肺炎链球菌菌体;  (2)在菌液中加入终浓度为0.1~0.8%的脱氧胆酸钠(DOC),冷库放置至裂解菌体;调节菌体裂解液pH值在3.0~5.0范围,离心收获上清液;(3)调节上一步所得的上清液pH值到6.5,加入终浓度为0.5M的CaCl↓[2];再调pH值到7.0,加入终浓度为25~30%的乙醇,冷库放置;离心收获上清液;  (4)调节上一步所得的上清液pH值到5.0,以5%为一个梯度依次加入乙醇,冷库放置,离心收获沉淀;最终乙醇浓度达到65~75%,合并各次沉淀;  (5)用蒸馏水复溶上一步所得的沉淀,加入终浓度为0.5%的脱氧胆酸钠,调节pH值在3.0~5.0范围,离心收获上清液;  (6)浓缩、干燥上一步所得上清液,得到精制C多糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:沈荣任珍芸
申请(专利权)人:兰州生物制品研究所
类型:发明
国别省市:62

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