【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
1.将两个或两个以上外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体同一个整合位点的方法,其特征在于,是一种利用多种抗性基因筛选重组菌,将两个或两个以上外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体同一整合位点的方法,具体步骤是:1)将外源基因表达单元分别单独克隆到枯草芽孢杆菌整合质粒上,每一个重组整合质粒携带一个外源基因表达单元;2)第一个外源基因表达单元的整合是利用整合质粒将外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体中,通过整合质粒上携带的抗性基因筛选标记A挑选得到外源基因表达单元整合到枯草芽孢杆菌染色体中的重组枯草芽孢杆菌1;3)用替换抗性基因筛选标记的质粒将上述重组枯草芽孢杆菌1的抗性基因筛选标记A替换为抗性基因筛选标记B,通过抗性基因筛选标记B将替换成功的重组菌挑选出来,得到带抗性基因筛选标记B的重组枯草芽孢杆菌2;4)第二个外源基因表达单元的整合是利用连接有第二个外源基因表达单元的整合质粒以同源单交换形式将第二个外源基因表达单元整合到重组枯草芽孢杆菌2上,通过抗性基因筛选标记A和抗性基因筛选标记B筛选得到含有两个外源基因表达单元的重组枯草芽孢杆菌;5)重复上述步骤3)和步骤4),将抗性基因 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:廖东庆,李晓明,黄日波,张云光,韦玉琴,梁莲华,李丛,
申请(专利权)人:南宁邦尔克生物技术有限责任公司,
类型:发明
国别省市:45
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