一种重组毕赤酵母植酸酶高密度工业发酵方法技术

本发明专利技术涉及发酵领域，具体地涉及一种重组毕赤酵母植酸酶高密度工业发酵方法。根据本发明专利技术的重组毕赤酵母植酸酶高密度工业发酵方法，包括以下步骤：1)将发酵工作种子液接种于发酵罐；2)葡萄糖补料流加阶段；3)饥饿阶段；4)甲醇诱导表达植酸酶阶段。本发明专利技术的优点是根据菌体生长规律，结合DO-stat和底物浓度反馈补料方法，不需要使用昂贵的葡萄糖电极，从接种后就根据菌体生长速度和浓度，调整50％的葡萄糖溶液补料速度，从而实现高密度发酵，再通过调整甲醇的补料速度，实现植酸酶的高效表达。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种重组毕赤酵母植酸酶高密度工业发酵方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：１）将发酵工作种子液接种于发酵罐；２）葡萄糖补料流加阶段：在０－６小时内，以４０ｍＬ／ｈ的速度流加葡萄糖，６－９小时，以８０ｍＬ／ｈ流加葡萄糖，９－１２小时，以１４０ｍＬ／ｈ流加葡萄糖，１２－１４小时，以２２０ｍＬ／ｈ流加葡萄糖，１４－１６小时，以３２０ｍＬ／ｈ流加葡萄糖，１６－１７小时，以５００ｍＬ／ｈ流加葡萄糖，１７小时－补糖结束，以６００ｍＬ／ｈ流加，菌体湿重达到１８０ｇ／Ｌ，其中所述葡萄糖的浓度为５０％、含ＰＴＭ１１２ｍＬ／Ｌ；３）饥饿阶段：停止补加葡萄糖后，不补加任何碳源，饥饿１０－１５分钟，观察ＤＯ和ｐＨ值，当ＤＯ开始上升，ｐＨ也开始上升时，进入诱导阶段；４）甲醇诱导表达植酸酶阶段：以３．０ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２小时，３．４ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２小时，３．８ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２小时，４．２ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２小时，４．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇１２小时，５．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，６．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，７．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，８．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，９．０ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，８．６ｍＬ／ｈ速度流加甲醇２４小时，其中，所述甲醇含ＰＴＭ１１２ｍＬ／Ｌ。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡爱红，刘金山，史宝军，
申请(专利权)人：广东溢多利生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：44