一种5′-肌苷酸二钠的一步提取方法技术

本发明专利技术涉及一种5?-肌苷酸二钠的一步提取方法：在肌苷与磷酸三乙酯（以下简称TEP）磷酰化反应后降温，进行低温无盐水解；低温无盐水解终止后，在-10℃～5℃之间，滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，使pH回调至5.0左右且料液出现浊点，即有5?-肌苷酸二钠乳状微晶析出；继续滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，当pH上升到8.0～8.5时养晶；然后快速进行晶体抽滤；将5?-肌苷酸二钠结晶滤饼用相同体积的体积百分含量为80%～85%且温度为0℃～5℃的乙醇洗涤2～3次；减压烘干，得到5?-肌苷酸二钠产品。简化了工艺流程，节约了生产成本，提高了产品收率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及属于5'-肌苷酸二钠提取技术，特别是涉及一种5'-肌苷酸二钠的一步提取方法。
技术介绍
5'-肌苷酸二钠，别名肌苷酸钠(以下简称IMP)，性状为无色至白色的结晶，或白色结晶性粉末。味鲜，鲜味阈值为0. 025g/100ml，鲜味强度低于鸟苷酸钠，但二者有明显协同作用，当二者以1 :1混合与0. 8%谷氨酸钠并用，其鲜味比一般味精高出40 100倍，且风味更好。溶于水，水溶液稳定，呈中性，在酸性溶液中易分解，失去呈味力。中国专利CN1539846A提到的5'-核苷酸二钠的制备工艺中，磷酰反应结束后采用冰盐水进行水解，水解液静止分层，分离水层和有机层，将水层在冷却下用50%Na0H溶液调节PH彡13，于0°C结晶过滤除去磷酸钠，溶液用浓盐酸中和至pH=8 9，减压浓缩后冷却到0 5°C，过滤得到IMP的粗品，再用水重结晶，得到IMP成品。该方法由于溶液减压浓缩冷却抽滤，产品中含有大量无机盐，纯度不高，需要多次重结晶来提高浓度。工艺复杂、收率低、生产成本高。中国专利CN1616475A中提出5'-胞苷-磷酸的制备工艺中，磷酰化反应结束，再经水解、蒸馏后，将水相调到pH=3 4冷冻结晶，产品经过二次结晶后纯度虽然可以达到 98%以上，但该方法工艺复杂，收率很低。KR9500259提出采用控制关键点渗析结晶鸟苷-磷酸，起始溶液pH控制在8. 4 8. 6，通过添加甲酸或乙醇提高溶液过饱和度，在晶核即将产生时改变流加形式和速度得到 5'-鸟苷酸钠晶体。该方法结晶过程不易控制，消耗多余的有机溶剂，增加了成本和后处理难度。中国专利CN1861624A中提到了一种5'-核苷-磷酸钠盐的结晶方法，该方法在pH 值为5. 0 9. 0和质量百分数为5 30%浓度的5'-核苷-磷酸水溶液中，加入溶质质量百分数为110%的无机钠盐和起始5'-核苷-磷酸水溶液体积0. 5 10倍的溶析剂来结晶析出5'-核苷-磷酸钠盐晶体。该方法在工业大生产中产生大量的无机钠盐，耗用作为溶析剂的有机溶剂，增加了成本，达不到节能环保的目的。
技术实现思路
本专利技术为解决上述现有技术的不足，提供了一种简便的5'-肌苷酸二钠的一步提取方法，其操作工艺简化，设备投入减少，溶剂消耗降低，具有节能环保的优点。本专利技术解决技术问题所采取的技术方案是一种5'-肌苷酸二钠的一步提取方法，提取过程为在肌苷与磷酸三乙酯(以下简称TEP)磷酰化反应后降温，进行低温无盐水解；低温无盐水解终止后，在-10°C 5°C之间，滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，HpH 回调至5.0左右且料液出现浊点，即有5'-肌苷酸二钠乳状微晶析出；继续滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，当pH上升到8. 0 8. 5时养晶；然后快速进行晶体抽滤；将5'-肌苷酸二钠结晶滤饼用相同体积的体积百分含量为80% 85%且温度为0°C 5°C的乙醇洗涤2 3次；减压烘干，得到5'-肌苷酸二钠产品。在上述提取过程中，当滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，使pH回调至5. 0左右且料液出现浊点时，可以添加5'-肌苷酸二钠母晶。作为一种优选，所述的养晶是在-5 °C 0 V间维持30 60分钟。作为一种优选，所述的晶体抽滤在保持磷酸三乙酯不分层的条件下进行，温度控制在与结晶温度一致，即-10°c 5°C。在本专利技术中，低温无盐水解保证了一次提取成品合格率，结晶温度控制在-10°C 5°C之间。结晶温度影响所需结晶粉体晶体的粗细，温度低于_5°C结晶所得粉体细，相反结晶温度高，则结晶晶体呈现较粗的现象。回调PH5. 0左右时料液出现浊点，低温条件下养晶，晶体抽滤得到的滤液即时检测PH应大于7. 0，最佳pH7. 0 8. 0之间。本专利技术的有益效果本专利技术一种5'-肌苷酸二钠的一步提取方法，在水解结束后， 省去了无机盐和溶析剂的加入，简化了工艺流程，节约了生产成本，提高了产品收率。与现有技术相比具有如下优点。1.节约了 NaCl盐和乙醇的用量，结晶过程中不使用盐析和溶析剂，直接控制pH 值在溶液中一步析出大部分IMP结晶，减少了工艺环节，达到节约成本的目的。2.减少了重结晶的次数，一次性结晶析出的IMP晶体晶形完整，用体积百分含量为80% 85%的冷乙醇可以洗去附着的TEP溶剂和少量的无机盐，提高了成品的纯度，省去了重结晶的步骤，进一步提高了结晶收率。具体实施例方式实施例1 用27. 22g肌苷进行磷酰化反应，转化率96%，结束后向反应液中缓慢加入450ml冰水水解，水解时间30 min，温度最终为-5°C。用质量百分含量为40%的NaOH溶液中和，当pH 值>5. 0时，料液出现混浊，有晶体析出。继续滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，稳定料液PH值=8. 3，养晶30 min0快速抽滤后，滤饼用体积百分含量为85%且温度为0°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次结晶经真空干燥后得到晶粉46. 4g，结晶收率90. 3%， HPLC 效价 99. 4%,水分 23. 2%。实施例2:用27. 22g肌苷进行磷酰化反应，反应结束加入450ml冰水，水解20 min，温度最终为 O0C。用质量百分含量为40%的NaOH溶液中和至pH=8. 0，再少量滴加质量百分含量为40%的 NaOH溶液稳定pH值，养晶1小时。快速抽滤，滤饼用体积百分含量为80%且温度为5°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次结晶经真空干燥后得到晶粉44. 6g，结晶收率85. 6%， HPLC 效价 98. 0%,水分 24. 5%。实施例3:用27. 22g肌苷进行磷酰化反应，反应结束加入450ml冰水水解1小时，温度最终为_5°C。用质量百分含量为40%的NaOH溶液中和至pH=5时，加入少量晶粉(肌苷酸二钠结晶)作为晶核，加快晶粉的析出，继续用质量百分含量为40%的NaOH溶液调节至pH=8. 2， 养晶1小时后(温度控制彡0°C)，快速抽滤，滤饼用体积百分含量为85%且温度为2°C的冷乙醇清洗三次，每次用量200ml。一次结晶经真空干燥后得到晶粉47. 5g，结晶收率90. 7%， HPLC 效价 97. 5%,水分 22. 5%。权利要求1.一种5'-肌苷酸二钠的一步提取方法，其特征在于，提取过程为在肌苷与磷酸三乙酯磷酰化反应后降温，进行低温无盐水解；低温无盐水解终止后，在-10°C 5°C之间，滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，使pH回调至5. 0左右且料液出现浊点，即有5'-肌苷酸二钠乳状微晶析出；继续滴加质量百分含量为40%的NaOH溶液，当pH上升到8. 0 8. 5时养晶；然后快速进行晶体抽滤；将5'-肌苷酸二钠结晶滤饼用相同体积的体积百分含量为 80% 85%且温度为0°C 5°C的乙醇洗涤2 3次；减压烘干，得到5'-肌苷酸二钠产品。2.根据权利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，当滴加质量百分含量为40%的 NaOH溶液，使pH回调至5. 0左右且料液出现浊点时，添加5'-肌苷酸二钠母晶。3.根据权利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，所述的养晶是在_5°C 0°C间维持30 60分钟。4.根据权利要求1所述的一步提取方法，其特征在于，所述的晶体抽滤在本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种５′－肌苷酸二钠的一步提取方法，其特征在于，提取过程为：在肌苷与磷酸三乙酯磷酰化反应后降温，进行低温无盐水解；低温无盐水解终止后，在－１０℃～５℃之间，滴加质量百分含量为４０％的ＮａＯＨ溶液，使ｐＨ回调至５．０左右且料液出现浊点，即有５′－肌苷酸二钠乳状微晶析出；继续滴加质量百分含量为４０％的ＮａＯＨ溶液，当ｐＨ上升到８．０～８．５时养晶；然后快速进行晶体抽滤；将５′－肌苷酸二钠结晶滤饼用相同体积的体积百分含量为８０％～８５％且温度为０℃～５℃的乙醇洗涤２～３次；减压烘干，得到５′－肌苷酸二钠产品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陆建卫，
申请(专利权)人：浙江钱江生物化学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：33