3-甾酮-△1-脱氢酶和工程菌及应用制造技术

本发明专利技术提供了3-甾酮-△1-脱氢酶基因及其编码的胆固醇氧化酶，提供了含有其基因序列的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株，提供了制备该3-甾酮-△1-脱氢酶的方法。本发明专利技术提供的3-甾酮-△1-脱氢酶为一新的3-甾酮-△1-脱氢酶，本发明专利技术提供的重组菌株可用于转化3-酮基甾体化合物，其中优选的重组菌株还可用于将雄甾-4-烯-3，17-二酮转化为宝丹酮，且表达的目的蛋白为可溶性蛋白，打破了以往工业生产中膜蛋白的瓶颈，对于KSDD的工业化生产具有重大意义。还实现甾体化合物的微生物转化法生产，提高了甾体医药生产体系的生产效率与产品品质，降低生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，更具体地，涉及一种3-甾酮-Δ 1-脱氢酶和工程菌及应用。 许多真菌，例如 Aspergillus sp.、Metarhizium sp.、Fusarium sp.、Neurosporasp. , Neosartorya sp.等，可产生留型抗生素。留体型抗生素包括烟曲霉酸、夫西地酸及相关类似物，其中，结构式I分别显示了环戊烷多氢菲(Cyclopentanoperhydrophen antrene)、胆固醇(Cholesterol)、烟曲霉酸(Helvolic acid)与夫西地酸(Fusidic acid) 的结构。这些留型抗生素对细菌具有较好的抑制作用，例如夫西地酸在临床上已应用三十多年；但是，对于一些真菌而已，留型抗生素又会是一种重要致病性毒力因子，例如烟曲霉酸是金龟子绿僵菌杀昆虫的一种毒力因子。

【技术保护点】
１．一种３－甾酮－Δ１－脱氢酶的基因，是下列核苷酸序列之一：１）其为序列表中ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示的碱基序列；２）编码由序列表中ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示的氨基酸序列或其无义突变序列组成的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种3-留酮-Δ 1-脱氢酶的基因，是下列核苷酸序列之一1)其为序列表中SEQID NO 1所示的碱基序列；2)编码由序列表中SEQID NO :2所示的氨基酸序列或其无义突变序列组成的蛋白质。2.一种3-留酮-Δ 1-脱氢酶，其是序列表中SEQ ID NO :2所示氨基酸序列或其无义突变序列组成的蛋白质。3.包括权利要求1所述的3-留酮-Δ1-脱氢酶基因的核苷酸序列的表达载体。4.一种高效表达3-留酮-1-脱氢酶的基因工程菌株，其特征在于，所述基因工程菌株表达3-甾酮-Δ 1-脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示或为其无义突变序列。5.如权利要求4所述的基因工程菌株，其特征在于，编码所述3-留酮-△1-脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏东芝，王风清，陈苗苗，林良才，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：31