超氧化物歧化酶在制备药物方面的新用途制造技术

超氧化物歧化酶的新的治疗应用，以ＳＯＤ为基础的延长作用时间的药物制剂的应用，用于治疗或预防特异性脑损伤或非特异性损伤而引起的脑功能障碍。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及超氧化物歧化酶(SOD)的治疗学上的新的应用。在1968年，McCORD和FRIDOVICH描述了SOD的特征；它是一个促进超氧化物基团(O2-)消除的酶，构成可防止这种基团的有害作用的重要的机理，它可在体内由空气中的氧气而形成，因此，在阻止由于暴露在氧化的空气中而产生的毒性作用方面起着主要作用。作为氧气衍生的自由基团，它们看起来和许多疾病有关，因此，用SOD治疗关节炎症是可取的(R.NURDMANN et a1.，Cah.Nutr.Diet.，1991，26，6，398-402)；在用于肺部疾病的治疗中，SOD也获得了或大或小程度不同的成功，尤其是支气管肺发育不良，或者是和氧气富足有关的其它中毒情况(中枢神经系统，局部缺血，非血管的胃肠失调，眼疾病(位于眼的前房)，或对抗癌治疗引起的不良反应的控制(GREENWALD R.A.，FreeRadical Biol.Med.，1990，8，201-209)。已经证实，SOD，处于脂质体的，牛的Cu/Zn形式，对于临床实验中放射性纤维化(Baillet F.et al.，Treatment of radiofibrosis withLiposomal Superoxide dismutase.Preliminary results of 50 cuses，FreeRad.Res.commun.，1，387-394，Harwood Academic Publishers GmbH，1986)及后来的在猪体内做的实验尤其有效(Lefaix T.L.et al.，La fibrosecutaneomusculaire radio-induiteefficacite therapeutique majeure de laSOD Cu/Zn Liposomiale(Radioinduced cutaneomuscular fibrosismajortherapeutic efficacy of liposomal Cu/Zn SOD)，Bull.Cancer，1993，80，799-807)，我们尤其关注这些结果，是因为没有其它产品可以产生同样作用。SOD的实验证实，它们半衰期长，免疫疾病发生率较低，所以优选它们，尤其要提及以下情况牛来源的Cu/Zn SOD(一个可催化超氧化物基团歧化的同型二聚体)，MnSOD，Fe SOD，脂质体的SOD，和聚乙二醇结合的SOD，SOD聚合物或SOD共聚物及重组人Cu/Zn SOD及MnSOD。申请人发现了以SOD为基础的制剂的新用途，该制剂延长了药物的作用时间，用于治疗或预防脑功能障碍，尤其是脑识别功能障碍，它们是由大脑特异性损伤或非特异性损伤而引起的。就本专利技术而言，非特异性损伤是指例如电刺激(足底电击)，特异性脑损伤是指蔓延性全脑的辐射。出人意料的是，上述延长作用时间的SOD制剂可以在预防和治疗能力两方面防止哺乳动物脑功能出现障碍。此种延长作用时间的SOD制剂，尤其优选脂质体SOD，和聚乙二醇结合的SOD及SOD聚合物或共聚物。有利地，超氧化物歧化酶(SOD)尤其是哺乳动物(鼠、牛、人)的Cu/Zn SOD，MnSOD，Fe SOD或重组SOD.这些制剂可以通过非肠道给药，优选皮下，或者口服给药。如上描述的以SOD为基础的制剂可用于哺乳动物，尤其是人，用于治疗或预防由特异性脑损伤(例如辐射)或非特异性脑损伤(例如电刺激)引起的脑识别功能障碍。对于放射治疗并发症来说，SOD的有效剂量范围很宽，其极端是从猪体内的2.3mg/kg到人体内的0.03mg/kg。对于人，处方日剂量优选0.03mg/kg至0.08mg/kg，皮下给药。除去上述规则外，本专利技术也包括其它方面，从下述有关如何实现构成本专利技术主题的方法实施例可看出来。必须说明的是，为了阐述本专利技术的主题，这些实施例都是单独给出的，但不构成任何限制。实施例1SOD对于非特异性损伤(电刺激)的预防效果-损伤电刺激高于特定临界值(1.1-1.2mA)的足底电击强烈地抑制了限制条件下反应的出现(避免)。在以下的研究中，采用1.5mA足底震荡，通常条件下是0.8mA。*方法及装置-动物12只5月龄的Wistar系雄性大鼠被随机分成两组，每组6只，1)对照组和2)脂质体Cu/Zn SOD组。-处置每次训练前2小时，给脂质体Cu/Zn SOD组0.5mg/kg的脂质体Cu/ZnSOD，皮下给药，给药比例是0.05ml/100g体重。对照组接受同样体积的0.9％NaCl。-行为测试双向躲避动物被迫从室A移向室B以便避免电击(1.5mA 15秒钟)，交替地用于笼子A的地板或笼子B的地板。一个听觉的条件刺激(300Hz)使它们可避免这种电击，条件是它们的反应时间在6秒钟之内(条件刺激的持续时间和间隔)。这种训练每天一组，连续三天。每组由15个试验组成。每个实验间隔是50秒。逃避次数，逃跑失败次数及受到足底电击的时间记录下来。-统计资料用原始单独数据来计算平均值，平均标准误差(Sem)，组的规模及Student氏t测试值。应用所有获得的结果在两组间比较。*结果-逃避百分率对照组和脂质体Cu/Zn SOD组的比较(表I)表明在训练的第一天治疗组具有明显的优势(12.22％比0％，p＝0.02)。这种区别程度随后变小，但是继续存在，第二天(14.44％比1.11％，p＝0.15)和第三天(23.33％比4.45％，p＝0.09)。-逃跑失败百分率可以看出(表II)脂质体Cu/Zn SOD组第一天逃跑失败百分率明显减少(13.33％比58.88％，p＝0.02)在训练的第二天，这种减小仍保持在一定水平(0％比14.45％p＝0.11)。-每次接触足底电击的持续时间施用脂质体Cu/Zn SOD(表III，附图说明图1)能够使大鼠更好地控制非条件刺激(1.5mA电击)的损害，因为它们在第一天可明显地减少接触电击时间(88.93秒比165.62秒，p＝0.04)，第三天(13.61秒比45.64秒，p＝0.03)，训练的第二天达到一定程度(37.52秒比82.50秒，p＝0.15)。这表明，在每次实验包含的15个试验过程中，脂质体Cu/Zn SOD组不仅对于电击时间而且对于两个连续试验间的其余时间50秒均能够有效地作出反应。*结论当我们考虑双向逃避试验获得的3个参数时，脂质体Cu/Zn SOD的保护效果很明显。出人意料的是，施用脂质体Cu/Zn SOD可减少干扰训练获得的非特异性损伤(电刺激)的副作用。事实上，先皮下注射SOD使得训练能力得以保持。 <p>表II双向逃避逃跑失败百分率预试验脂质体SOD对5月龄雄性Wister大鼠产生的不利影响加强试验 表III双向逃避每组对足底电压的接触的持续时间(秒)预试验-脂质体SOD对5月龄雄性Wister大鼠产生的不利影响 <p>实施例2头部辐射导致的识别功能障碍脂质体的Cu/Zn超氧化物歧化酶对被辐射的4月龄大鼠产生的效果。*方法和装置-动物15只雄性Wistar系大鼠，4月龄，被辐射，分成两组1)对照组n＝7，2)2l辐射后被施用脂质体Cu/Zn SOD9个月，n＝8。-处置每天一次，连续5天，皮下给第二组动物0本文档来自技高网...

【技术保护点】
以ＳＯＤ为基础的延长作用时间的药物制剂的应用，用于治疗或预防特异性脑损伤或非特异性损伤而引起的脑功能障碍。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：F巴勒里特，I拉姆普罗格洛，
申请(专利权)人：公共救济事业局巴黎医院，
类型：发明
国别省市：FR[法国]