ＩＬ－２３在肝癌早期病变诊断中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象具有发生肝癌倾向的方法，包括在所述对象的生物学样品例如血液样品例如血清或其衍生物中检测ＩＬ－２３的水平并与对照样品中ＩＬ－２３的水平比较，其中检测样品中所述ＩＬ－２３水平升高是所述对象具有发生肝癌倾向的指征。本发明专利技术还涉及了检测ＩＬ－２３的制剂在制备用于鉴定对象具有发生肝癌倾向的组合物中的应用以及用于所述鉴定的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肝癌早期病变诊断的新标记物和方法，还涉及用于肝癌早期病变诊 断的试剂盒。
技术介绍
原发性肝癌是我国发生率最高的恶性肿瘤之一，每年因患肝癌而死亡的人数约 占全世界肝癌死亡人数的50%，严重威胁着人民群众的生命健康，给患者家庭及国家造 成了沉重的经济负担。在我国，肝癌发生的主要病因是慢性持续性乙型肝炎病毒的感 染，表现为血清乙型肝炎病毒表面抗原持续阳性，这部分人群是肝癌发生的危险人群。 根据2006年全国流行病学调查结果显示，我国自然人群中乙型肝炎病毒表面抗原调整后 阳性率高达7.18%，估计有乙肝病毒表面抗原携带者9400万人。目前，对于临床诊断的 肝癌的治疗手段单一受限，患者的死亡率居多种恶性肿瘤的首位。因此，预防慢性持续 乙肝病毒感染者进展为肝癌，及早发现肝癌的早期病变，进而采取积极的诊疗措施，可 极大提高肝癌患者的生存率。根据《中国抗癌协会肝癌专业委员会》于2001年9月在广州所制定的“原发 性肝癌的临床诊断与分期标准”，(中华肝脏病杂志，2001年12月第9卷第6期第324 页)，我国目前最常用的原发性肝癌早期诊断方法是在高危人群中定期进行血清中甲胎蛋 白的检测以及影像学的筛查(高危人群40岁及以上男性，45岁及以上女性的慢性乙肝 病毒感染者)。诊断标准为至少具有以下特征之一 (a)AFPM00yg/L，能排除妊娠、生 殖系胚胎源性肿瘤、活动性肝病及转移性肝癌，并能触及肿大、坚硬及有大结节状肿块 的肝脏或影像学检查有肝癌特征的占位性病变者；(b)AFP < 400μ g/L，能排除妊娠、 生殖系胚胎源性肿瘤、活动性肝病及转移性肝癌，并有两种影像学检查有肝癌特征的占 位性病变或有两种肝癌标志物(DCP、GGT II、AFU及CA19-9等)阳性及一种影像学检 查有肝癌特征的占位性病变者。(C)有肝癌的临床表现并有肯定的肝外转移病灶(包括肉 眼可见的血性腹水或在其中发现癌细胞)并能排除转移性肝癌者。而这一诊断的做出往 往在肝癌发生之后，病人已经丧失了最佳的治疗时机。此外，流行病学调查显示，在慢 性乙肝病毒表面抗原携带者中，每年有的人群自然进展为肝癌，终身肝癌的发生率累 计约有40%。因此在高危人群中及早发现早期的病变特征，从而采取积极的手段与措施 进行干预和治疗，提高患者的生活质量与生存率。需要建立高效便捷易行的方法。由慢性乙肝进展为肝癌是一个漫长的过程，可长达40-50年，是机体与病毒长 期相互作用的结果。因此，临床医生通常针对40岁及以上男性，45岁及以上女性的慢性 乙肝病毒感染者这一高危群体，定期检测其血清中甲胎蛋白的水平并附加超声影像学的 筛查，以期采用现行的常规手段发现早期肝癌患者。近年来研究发现，在慢性乙肝病毒 感染的患者中，病毒感染的肝细胞和识别感染肝细胞的免疫细胞分泌多种不同的细胞因 子，在由慢性乙肝病毒感染状态进展为肝癌的病程进展中发挥着重要作用。白细胞介素23 (IL-23)是一个异二聚体造血细胞因子，由p40和pl9两个亚基组 成，主要由机体活化的巨噬细胞和树突状细胞产生，可促进T细胞的增殖和IFN-Y的产生。IL-23优先刺激机体记忆性T细胞而不是初始型T细胞群。其受体广泛表达于活化 T细胞、记忆性T细胞、NK细胞、巨噬细胞和树突状细胞，IL-23作用于这些细胞，诱 导IFN-Y等前炎性细胞因子的产生，在炎症性疾病、自身免疫性疾病的发病以及抗肿瘤 和抗感染等方面发挥重要作用。专利技术概述在一个方面，本专利技术提供了一种鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人具有发 生肝癌倾向的方法，包括检测得自所述对象的生物学样品中IL-23的水平，其中检测样品中IL-23水平升 高是所述对象具有发生肝癌倾向的指征。在一个实施方案中，所述生物学样品是血液样品如血清或其衍生物。在一个实施方案中，所述样品中IL-23的水平通过检测IL-23蛋白或IL-23的 mRNA的水平来确定。在一个实施方案中，使用IL-23特异性抗体或其抗原结合片段检测所述生物学样 品中IL-23蛋白的水平。在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23水平升高是检测样品中IL-23水平与 对照样品中IL-23水平相比是升高的。在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23水平升高是检测样品中IL-23蛋白水 平高于截断值。在一个实施方案中，对象具有发生肝癌倾向的截断值为855pg/ml。在一个实施方案中，所述检测样品中IL-23蛋白的水平通过检测pl9亚基或其同 源物来确定。在另一个方面，本专利技术提供了一种用于鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人 具有发生肝癌倾向的组合物，其中所述组合物包含用于检测所述对象的生物学样品中 IL-23水平例如检测IL-23蛋白或IL-23的mRNA的水平的制剂。在一个实施方案中，所述生物学样品是血液样品例如血清或其衍生物。在一个实施方案中，使用IL-23特异性抗体或其抗原结合片段检测所述生物学样 品中IL-23蛋白的水平。在一个实施方案中，所述制剂是针对IL-23蛋白的特异性抗体，例如单克隆或多 克隆抗体。在另一个方面，本专利技术提供了 IL-23特异性抗体或其抗原结合片段在制备用于鉴 定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人具有发生肝癌倾向的组合物中的应用。在另一个方面，本专利技术提供了用于鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人具有 发生肝癌倾向的试剂盒，所述试剂盒包括用于检测所述对象的生物学样品中IL-23水平例 如检测IL-23蛋白或IL-23的mRNA的水平的制剂。在一个实施方案中，所述生物学样品是血液样品例如血清或其衍生物。在一个实施方案中，所述制剂是针对IL-23蛋白的特异性抗体。在一个实施方 案中，所述抗体是单克隆或多克隆抗体。附图简述附图说明图1 :通过受试者操作特征曲线分析评估IL-23对预测肝细胞癌(HCC)的作 用。ROC下的面积为0.699(95% CI 0.593/0.791)(图中两条虚线所表示曲线为95%置信区间)。当截断值为855pg/ml时，灵敏性和特异性分别为60.0%和91.1%。图2 Kaplan-Meier分析用于评估IL-23水平和HCC累积发病率之间的相关性。 结果表明具有高IL-23水平的患者中HCC的累积发病率较高。图3:根据距随访结束时的时间间隔将不同时间点的样品血清分成5组。结果 表明在发展为HCC的患者中，在疾病进展早期IL-23浓度较高，然后降低，在对照患者 中在随访期间IL-23浓度保持恒定。专利技术详细描述除非特别指出，本文使用的科学和技术术语应具有本领域技术人员通常已知的 含义。另外除非特别需要，则单数术语应包括复数，复数术语应包括单数。前述技术和 方法通常根据本领域熟知的及在本说明书引用的参考文献所述的常规方法进行。见例如 并入作参考的 Current Protocols inlmmunology.Wiley&Sons, Hoboken, NJ 所述。本文引用的所有参考文献，包括专利、专利申请、文章、教科书等及其中引用的参考文献在此 均以其全部援引加入本文。本专利技术人于上世纪90年代中后期在我国肝炎肝癌的高发区之一的启东地区建立 了一个可长期追踪随访的慢性乙肝携带者队列，定期进行血清甲胎蛋白水平的检测和肝 胆脾的超声影像学检查，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴定慢性乙型肝炎病毒感染对象例如人具有发生肝癌倾向的方法，包括：检测得自所述对象的生物学样品中ＩＬ－２３的水平，其中检测样品中ＩＬ－２３水平升高是所述对象具有发生肝癌倾向的指征。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曲春枫，杜君，陈陶阳，王金兵，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：11