肿瘤抑制基因与化学药物在制备用于治疗肿瘤的药物组合物中的联合应用制造技术

在一个实施方案中，本发明专利技术提供了治疗哺乳动物癌症或过度增殖的细胞的方法，该方法包括将所说的细胞与肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸相接触，并且将所说的细胞与至少一种辅助抗癌剂相接触。本发明专利技术还提供了含有肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸以及至少一种辅助抗癌剂的药物组合物，以及用于治疗哺乳动物的癌症或过度增殖的细胞的试剂盒。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术的领域本专利技术描述了对患有过度增殖性疾病如肿瘤或转移性疾病的个体进行治疗的新方法。尤其是，本专利技术提供了抑制细胞，特别是肿瘤细胞的过度增殖的方法，包括肿瘤抑制基因或基因产物与辅助抗癌剂的联合应用。本专利技术的背景染色体异常通常与遗传学疾病，衰退性疾病，以及癌症相关。尤其是，癌症中常常发生整个染色体或染色体的片段的缺失或重复，以及基因组的特定区域的高水平扩增。例如参见Smith(1991)乳腺癌研究治疗，18增刊15-14；van de Viler(1991)Became.Beefiest.Acta.107233-50，Sato(1990)癌症研究，507184-7189。实际上，含有原癌基因的DNA序列的扩增和含有肿瘤抑制基因的DNA序列的缺失，都是肿瘤发生的常见特征。Dutrillaux(1990)，癌症遗传学与细胞遗传学，49203-217。p53基因的突变是人类癌症最常见的遗传学变化(Bartek(1991)，癌基因，61699-1703，Hollstein(1991)科学，25349-53)。而且，在缺少内源性野生型p53蛋白的哺乳动物癌细胞中引入野生型的p53，将会抑制这些细胞的肿瘤表型(见，例如，美国专利No.5,532,220)。在许多可以获得的化学疗法药物中，可以以Taxol(NSC编号125973)商购得的紫杉醇，很令人感兴趣，这是因为其在对一些药物无效的肿瘤，包括卵巢和乳腺肿瘤的临床试验中的效力(Hawkins(1992)癌基因，617-23，Horwitz(1992)药物科学进展，13134-146，Rowinsky(1990)，全国癌症研究所杂志，821247-1259)。近来关于紫杉醇和肿瘤抑制基因治疗的相互作用的研究表明，肿瘤抑制子(例如p53)的下降水平与增大的G2/M期停滞，微核化作用，以及p53单独的紫杉醇诱导的细胞凋亡相关。相反，进行了有丝分裂并短时间内聚集在接下来的G1期中的具有完整的p53的存活的细胞，与增加的p53和p21eipl，wafl蛋白水平相一致(Wahl(1996)自然医学，272-79)。相似地，Hawkins(1996)，癌症研究，56892-898，指出p53的灭活将增强对某些抗有丝分裂试剂包括紫杉醇的敏感性。作者提示p53可能在DNA修复中起作用，因而即使在药物存在的情况下也可以让细胞较容易地通过S期。因此，这些研究提示肿瘤抑制基因的治疗和抗有丝分裂剂的药物治疗(尤其是紫杉醇的治疗)具有相反的作用。本专利技术概述本专利技术提供了治疗过度增殖的哺乳动物细胞的方法。本专利技术部分地基于令人惊奇的发现，即，将辅助抗癌剂与肿瘤抑制基因(例如p53)治疗联合应用，能对抑制肿瘤细胞或其他缺损肿瘤抑制因子活性的细胞的增殖提供增强的效果。因此，在一个实施方案中，本专利技术提供了治疗哺乳动物的癌症或过度增殖的细胞的方法，将该细胞与肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸，并且与至少一种辅助抗癌剂相接触。在一些实施方案中，该方法包括联合施用肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸和辅助抗癌剂以及至少一种化学治疗剂。例如，肿瘤抑制核酸(例如，编码p53的核酸)可以与辅助抗癌剂(例如，紫杉醇)以及一种DNA损伤剂诸如顺铂、卡铂、navelbine(vinorelbine tartate)一起应用。癌或过度增殖的细胞通常是肿瘤细胞。当细胞存在于肿瘤中时，该方法能抑制肿瘤的生长，因而也就提供了治疗该癌症的方法。这类癌症包括，但不限于，卵巢癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肝癌、黑素瘤、视网膜母细胞瘤、乳腺瘤、结肠癌、白血病、淋巴瘤、脑瘤、子宫颈癌、肉瘤、前列腺瘤、膀胱瘤、网状内皮组织瘤、Wilm氏瘤、星细胞瘤、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤、卵巢瘤、骨肉瘤、肾癌、或头颈癌。优选的辅助抗癌剂是紫杉醇或紫杉醇的衍生物，而优选的肿瘤抑制核酸是编码肿瘤抑制蛋白的核酸，该蛋白可选自p53蛋白及其类似物以及视网膜母细胞瘤(RB)蛋白。尤为优选的肿瘤抑制核酸编码野生型p53蛋白，尤为优选的视网膜母细胞瘤蛋白是p110RB或者p56RB。肿瘤抑制核酸优选地通过载体输送到靶细胞中。这种载体病毒经重组DNA技术的修饰，从而能够在靶细胞中表达该肿瘤抑制核酸。这些载体可从非病毒型(例如质粒)或病毒型的(例如腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒、疱疹病毒、痘病毒)来源衍生得到。在本专利技术的优选的实践中，该载体是重组修饰的腺病毒载体。非病毒型载体优选地复合以试剂，而利于DNA穿过细胞膜的导入。这类非病毒载体复合物的实例包括具有多价阳离子试剂的配方，它能够有利于DNA的浓缩和脂类基础的输送系统。脂类基础的输送系统的实例包括基于脂质体的核酸输送。尤为合适的腺病毒载体(例如用于输送编码野生型p53蛋白的核酸)含有IX蛋白的DNA的部分的或者全部的缺失。在一个实施方案中，IX蛋白的基因序列的缺失范围从5′病毒末端的约3500bp至5′病毒末端的约4000bp。载体还应含有在腺病毒早期区域3和/或腺病毒早期区域4上的非基本DNA序列缺失，并且在一个实施方案中，该缺失是E1a和/或E1b的DNA序列。尤为优选的用于输送人p53cDNA的腺病毒载体含有腺病毒2型主要晚期启动子或者人CMV启动子，以及腺病毒2型三联前导cDNA。这样的优选的腺病毒载体为ACN53。优选的紫杉醇或紫杉醇衍生物包括紫杉醇和/或最为优选的带有紫杉醇(Taxol)的Taxotere。另一优选的辅助抗癌剂是Epotillone。在尤为优选的实施方案，肿瘤抑制因子是A/C/N/53并且辅助抗癌剂是紫杉醇。肿瘤抑制核酸可以分散在药学上可接受的赋形剂中。类似地，辅助抗癌剂(例如紫杉醇或紫杉醇衍生物)可以分散于药学上可行的赋形剂中。肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸以及所说的紫杉醇或紫杉醇衍生物可以一起分散在单一组合物(含有一个或多个赋形剂)之中。肿瘤抑制因子(蛋白或核酸)和/或辅助抗癌剂可以通过动脉、静脉(例如注射)、腹膜内和/或肿瘤内给药，可以同时或依次进行。优选的给药位置包括肝动脉内、腹膜内、或者当需要治疗头部细胞(例如，神经细胞)，给入颈动脉系统。肿瘤抑制蛋白或核酸可以以单一剂量给药或者多次治疗，例如间隔至少6小时，更为优选地在24小时内分3次给药。在另一个实施方案，肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸给药(带有或不带有辅助抗癌剂)的总剂量范围从约1×109至1×1014，或约1×109至7.5×1015，优选的是约1×1011至7.5×1013腺病毒颗粒，疗程可以选用一次全部剂量给药、全部剂量在5天内每日给药、全部剂量在15天内每日给药、或者全部剂量在30天内每日给药。剂量也可以连续给药1至30天。紫杉醇或紫杉醇衍生物在1小时、3小时、6小时或者24小时内给药的总剂量范围从约75至大约350mg/m2，治疗方案可以选用一次给药、总剂量在第1天和第2天每日给药、总剂量在第1天，第2天和第3天每日给药、以每日剂量给药15天、以每日剂量给药30天、每日连续输药15天、每日连续输药30天。优选的剂量是24小时内100-250mg/m2。或者，将紫杉醇或紫杉醇衍生物每周以60mg/m2给药。这种给药方法可以重复两至三个循环(更为优选的是三个循环)，两个或更多的循环之间间隔三或四周。在一些优本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗哺乳动物癌症或过度增殖细胞的方法，所说的方法包括将所说的细胞与肿瘤抑制蛋白或肿瘤抑制核酸相接触并且还与至少一种辅助抗癌剂相接触。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：洛蕾塔尼尔森，乔安霍罗威茨，丹尼尔C马内瓦尔，G威廉德默斯，玛丽埃伦雷巴克，吉恩雷斯尼克，
申请(专利权)人：坎吉公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]