半合成海鞘素制造技术

本发明专利技术涉及几种新型半合成海鞘素，称之Ｅｔ　７５７、Ｂｏｃ－Ｅｔ　７２９、Ｉｓｏ－Ｅｔ　７４３、　Ｅｔ　　８７５和Ｅｔ　ｌ５６０。并报导了这些化合物的物理性质、其制备方法以及生物活性。＄（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
专利技术背背海鞘素(本文简称为Et或Et’s)是从海生有被膜陀螺状海鞘(Ecteinascidia turbinata)分离出的超强抗肿瘤剂。具体来说Et’s729、743和722已证明过在体内的效果，包括抗P388鼠白血病、B16黑色素瘤、Lewis肺癌、以及几种人肿瘤在鼠体内的异种移植模式的活性。对Et 729和Et 743由NCI和目前的实验所评价的活性表明，在用B16黑色素瘤感染后，Et 729给出的60天存活率为10分之8。由于这些令人鼓午的结果，人们继续不断地研究其它的海鞘素化合物。本专利技术概述本专利技术针对半合成法制备的几种新的海鞘素化合物，即使用前面公开的海鞘素作为原料来制备新的海鞘素化合物。本专利技术新的Et’s结构如下所示 发现上述新的海鞘素化合物有与已知的海鞘素化合物相似的抗肿瘤活性的特征，因此它们能用作治疗化合物，例如用来治疗哺乳动物肿瘤，包括黑色素瘤、肺癌等。所用剂量和给药途径，可视患者的需要和活性成分的具体活性而异。这些因素的确定是有实践经验的医生的常识。附图简述附图说明图1A和1B表示在魔弹(MB)中的Et 757的LRFAB质谱，参见Rinehart等人“生物化学和生物物理研究通报”1984,124,350。图2A和2B表示MB中Et 757的串联FABMS/MS谱。图3表示CD3OD中Et 757的1HNMR(500 MHz)谱。图4A和4B表示MB中Et 729的LRFAB质谱。图5A和5B表示MB中Boc-Et 729的串联FABMS/MS质谱。图6表示MB中Iso-Et 743的LRFAB质谱。图7A和7B表示MB中Iso-Et 743的串联FABMS/MS谱。图8表示CD3OD中Iso-Et 743的1HNMR(500 MHz)谱。图9表示CD3OD中Iso-Et 743的扩展HMBC(750 MHz)谱。图10A和10B表示MB中Et 875的LRFAB质谱。图11A和11B表示MB中Et 875的串联FABMS/MS质谱。图12表示MB中Et 1560的LRFAB质谱。参考实施方案详述本专利技术如前述，很多生物活性海鞘素化合物从陀螺状海鞘样品中分离出，例如公开在US 5089273、和5256663中的海鞘素729、743、745、759A、759B和770，这些公开内容均引入本文作为参考。也例如公开在US 5149804中的海鞘素736和722，再参见US 5478932和5654426这些也引入本文作为参考。本专利技术下面进一步以实施例举例说明，以有助于对本专利技术的理解，但这并不构成对本专利技术的限制。除非另有说明，所有百分数均以重量计，所有温度均以摄氏度表示。实施例1-半合成Et 757 Et 729(9.2mg,0.012mmol,1eq)，二异丙胺(12.9μL,0.074mmol,6eq)和CH3CN(300μL)的溶液中加入CH3I(1.5μL,0.024mmol,2eq)，所得溶液于60℃搅拌24小时。氮气流中将反应混合物浓缩至干。使用含0.02M Nacl的75％MeOH/H2O作为流动相，采用反相HPLC(Phenomenex/Ultracarb-ODS,2ml/min)提纯残留物，得到Et757(2.2mg,24％)和Et 743(2.3mg,25％)，以及预甲基化产物的复合混合物。使用含0.02M Nacl的60％MeOH/H2O作为流动相，以HPLC(Ultracarb-ODS)进一步提纯Et 757，得到纯的Et 757(1.4mg,15％)。HRFABMS，由C40H44N3O10S-m/z计算值为758.2747，实验值758.2765，见图1和图2；1HNMR见图3。实施例2-半合成Iso-Et 743 步骤A-Boc-Et 729Et 729(12.5mg,0.017mmol, 1eq)、二异丙基乙胺(1.5μL,0.07mmol,4eq)和CH3CN(300μL)的溶液中，加入二碳酸二叔丁酯(3.6mg,0.017mmol,1.0eq)，所得溶液在室温下搅拌9小时。氮气流中将反应混合物浓缩至干。用快速色谱将残留物提纯(梯度洗脱液100％CHCl3→90％CHCl3/MeOH)，得到Boc-Et 729(11.6mg,91％,Rf在90％CHCl3/MeOH中为0.53)；HRFABMS，从C43H48N3O12S-m/z计算值为830.2958，实验值为830.2942，见图4和5。步骤B-I50-Et 743含Boc-Et 729(11.6mg,0.014mmol,1eq)、二异丙基乙胺(7.1μL,0.041mmol,3eq)、500μL CH3CN和磁搅拌器的反应烧瓶中加入CH3I(2.1mg,0.015mmole,1.1eq)，将所得溶液60℃搅拌24小时。氮气流中将反应混合物浓缩至于，然后加入700μLTFA/CH2Cl2/H2O(4∶1∶1)。该混合物于室温下搅拌30分钟后，于氮气流中溶液至干。用60％MeOH/H2O(含0.02M NaCl)作为流动相，以反相HPLC(Alltech-C18,2ml/min)将残留物提纯，得到Iso-Et 743(1.9 mg,28％,以回收的Et 729为基础计)。HRFABMS，由C39H42N3O10S+m/z得计算值为744.2591，实验值744.2619，见图6和7；1HNMR和HMBC分别见图8和9。实施例3-半合成Et 875 将冰醋酸(5μL28％AcOH/CH3CN溶液，4eq)加入到Et 743(0.9mg,0.001mmol,1eq)、哌啶(5μL2％哌啶/CH3CN溶液,0.001mmol,1eg)、丙二酸二甲酯(5μL3％丙二酸二甲酯/CH3CN溶液0.001mmol,1eq)、和压碎的活化4分子筛(约0.5mg)在CH3CN的混合物中，所得悬浮液于室温下搅拌24小时。将反应物过滤，将滤液浓缩至干。用快速色谱将残留物提纯(梯变洗脱液100％CHCl3→90％CHCl3/MeOH)，得到Et875(180μg,20％,90％CHCl3/MeOH中Rf为0.53)；HRFABMS，由C44H50N3O14S+m/z得计算值876.3013，实验值876.2986，见图10和11。实施例4-半合成Et 1560(Et 729的二聚物) 含Et729(2.4mg,0.0032mmol,2eq)、二异丙胺(2μL)和CH3CN(75μL)和磁搅拌器的反应烧瓶中加入α,α’-二溴-对二甲苯(34μL12.5μg/μlα,α’-二溴-对二甲苯/CH3CN溶液，0.0016mmol,1eq),将所得溶液于60℃搅拌1小时。氮气流中将反应混合物浓缩至干，用快速色谱提纯残留物(梯度洗脱液100％CHCl3→90％CHCl3/MeOH)，得到Et 1560(300μg,12％,90％CHCl3/MeOH中Rf为0.53)；HRFABMS，由C84H85N6O20S2-m/z得计算值1561.5260，实验值1561.5221、见图12。生物活性如上所述，海鞘素是高度官能化二或三(四氢异喹啉)生物碱，于体内有很强抗肿瘤活性。这些化合物主要从红树属有被膜陀螺海鞘中作为天然产物本文档来自技高网...

【技术保护点】
结构如下的化合物Ｅｔ ７５７： ＊＊＊。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：KL莱恩哈特，JJ莫拉莱斯，
申请(专利权)人：伊利诺伊大学评议会，
类型：发明
国别省市：US[美国]