水溶性医用几丁糖制剂及制备方法技术

本发明专利技术属医用生物材料，公开了一种水溶性医用几丁糖制剂及制备方法。本发明专利技术的几丁糖是从甲壳动物如虾、蟹的外壳中提取得到的，本发明专利技术的制剂水溶性好，生产成本低，并能用于预防组织粘连和防治退变性关节炎及用于眼科人工晶体植入手术。在临床上有较好的应用前景。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属医用材料，具体涉及一种。国际上几丁质主要用于工农业生产，仅有美国、日本等国将几丁质研制成人造皮及手术缝合线。但未见几丁糖其他临床应用报道。国内外采用透明质酸钠预防组织粘连和用于眼科人工晶体植入手术。而几丁糖与透明质酸钠均属多糖类物质，作用类似，透明质酸钠从鸡冠提取，产量少、成本高、在体内吸收快、作用时间短；而几丁糖是从废弃虾、蟹外壳中提取，成本远低于透明质酸钠，且作用时间长，可成为透明质酸钠的替代产品。医用几丁糖能促使上皮细胞生长，抑制成纤维细胞生长，具有广谱的抑菌作用和聚糖的网络结构，因而它具有预防术后组织粘连、抑制疤痕形成和保护关节软骨等生理功能，近年来作为一种天然高分子医用材料已被广泛应用于医学临床领域。医用几丁糖是用几丁质(chitin)制备得到。几丁质是一种广泛存在于自然界的天然高分子聚糖，一般从甲壳类动物如虾、蟹的外壳中提取制得的，故又称甲壳质。由于几丁质的水溶性极差，因而对其应用受到很大限制。本专利技术的目的是克服上述几丁质的不足之处，研制一种水溶性的几丁质衍生物。本专利技术提供了一种水溶性医用几丁糖制剂，该制剂是由水溶性医用几丁糖与药用辅料组成的。本专利技术的另一目的是提供了上述水溶性医用几丁糖制剂的制备方法，该方法包括下列步骤(1)虾壳精拣、清洗去除虾头、脚和尾，并将虾壳每节分离，用清水清洗、沥干；(2)虾壳碱-酸-碱浸泡将已清洗、沥干的虾壳浸泡于1-10％NaOH溶液中，于15℃以下环境中放置20-24小时，用清水洗涤至中性、沥干，再浸泡于1-10％HCL溶液中，于15℃以下环境中放置20-24小时，用清水洗涤至中性、沥干，继而将已清洗、沥干的虾壳浸泡于10％NaOH溶液中，于15℃以下环境中放置20-24小时，用清水洗涤至中性、沥干，制得的几丁质置于甩水袋中进行脱水，于55-60℃烘箱内烘干备用；(3)医用几丁质粉末制备将备用的几丁质置于0.3％NaOH中煮沸，并保持微煮1小时，用蒸馏水洗清至中性，再置于蒸馏水煮沸30分钟，用蒸馏水冲洗并沥干，置于55-60℃烘箱内烘干，用不锈钢粉碎机进行粉碎，备用；(4)医用几丁糖粗品制备按几丁质粉末∶NaOH∶H2O∶十二烷基硫酸钠＝1∶5-15∶10-15∶0.1-0.5重量比的比例，经充分混合将碱化医用几丁质粉末用绢丝沥去医用几丁质粉末干重约10倍量体积的NaOH溶液，移入反应瓶中。加入医用几丁质粉末干重8-12倍量体积的异丙醇于12℃左右水浴中，搅拌平衡1小时，另将氯乙酸溶解于异丙醇中(氯乙酸∶异丙醇＝5-15∶1-10)并置于分液漏斗内，缓慢地加入反应瓶中，控制滴加速度，使反应体系的温度不超过25℃，氯乙酸滴加完毕后，在搅拌状态下使其继续反应18-22小时；(5)医用几丁糖的提纯将反应完毕的医用几丁糖用80％左右酒精洗涤3-6次，用加有绢丝的布氏漏斗抽干，用50-300倍量(v/w)的蒸馏水溶解。用10-20％NaOH溶液将溶液的pH调至6-7，于3#砂蕊漏斗中进行真空抽滤，向滤液中倒入2-5倍量(v/w)的95％的酒精溶液中，搅拌、沉淀，将医用几丁糖沉淀先后用95％酒精和无水乙醇各洗涤3次，进行真空干燥；(6)医用几丁糖制剂的配制用蒸馏水配制医用几丁糖除菌溶液，其浓度为0.1-1.5％，用0.22-0.3μ滤膜进行除菌过滤。另将适量的NaCL溶液经除菌过滤滤入除菌液中，使其NaCL含量在0.85％左右并摇匀，将医用几丁糖除菌溶液倒入2.5-3.5倍量(v/w)的95％酒精溶液中，搅拌、沉淀，将医用几丁糖沉淀先后用95％酒精，无水乙醇洗涤各3次，进行真空干燥，然后按处方量加入磷酸二氢钠，磷酸氢二钠、氯化钠和注射用水，最后进行灌装得成品。附图说明图1为水溶性医用几丁糖制备工艺流程图。其中A1-A7为专检检验点和质量控制点，B为自检检验点和质量控制点。通过上述方法制备的本专利技术水熔性医用几丁糖制剂的技术指标如下1.外观 无色、透明粘稠状液体，无任何肉眼可见的异物2.透光率(660nm) 0.1％溶液的透光率≥95.0％3.动力粘度 ≥500mpa.s4.ph值 7.0±0.55.紫外吸收 230nm≤1.0257nm≤1.06.重金属含量≤10mg/kg7.无菌试验 应无菌，无菌有效期应不少于2年8.细菌内毒素试验≤0.5EU/mg9.急性毒性试验 应无急性毒性10.溶血试验 溶血率应不大于5％11.细胞毒性试验 细胞毒性反应为不大于1级，细胞形态应正常12.皮内刺激试验 应无皮内刺激反应13.皮肤致敏试验 皮肤致敏率应不大于8％14.短期皮下植入试验 皮下植入14日后组织相容性良好，炎性反应程度应不大于III级本专利技术的水溶性医用几丁糖制剂的常用规格为0.4、1、2.5、3或15ml以及250ml。本专利技术的水溶性医用几丁糖制剂的动物试验和临床应用验证，结果如下1.动物试验医用几丁糖动物试验共用家兔46只、昆明种小鼠225只、白色豚鼠30只、SD大鼠172只、wistar大鼠30只，分别进行医用几丁糖毒理学、酶组织化学、伤口II期愈合、预防术后肠粘连、肌腱粘连及关节粘连等实验研究，同时对医用几丁糖进行了体外细胞培养和抑制细菌生长的试验研究。a.医用几丁糖毒理学试验医用几丁糖制品进行了全身急性毒性、热源、溶血、细胞毒性、皮内刺激、皮肤致敏、短期肌肉植入、显性致死、致突变等项试验，试验结果表明本制品具有无毒性、无刺激性、无免疫源性、无热源反应、不溶血、无致突变及无致死性突变效应，它是一种相容性良好的新型体内植入性生物材料。b.酶组织化学试验试验显示医用几丁糖无毒性、无刺激性、具有良好的生物相容性、组织反应小、吸收快。c.伤口II期愈合试验试验显示医用几丁糖具有减少疤痕的作用。d.肠粘连、肌腱粘连及关节粘连试验试验表明医用几丁糖具有预防肠粘连、肌腱粘连及关节粘连的作用。e.体外细胞抑制生长试验试验表明医用几丁糖具有广谱的抗菌作用，尤其对革兰氏阳性细菌的抑菌作用更显著。动物试验结果表明本制品是一种无毒、无刺激性、无免疫源性、生物相容性良好的新型生物医用材料，能促进上皮的细胞生长、抑制成纤维细胞生长、并具有广谱的抑菌作用。因而本品是一种理想的防止各种外科手术后阻隔剂。2.临床应用验证在动物试验确认医用几丁糖是一种安全有效的新型生物医用材料的基础上，于人体临床进行了验证，我们在上海第二军医大学长征医院等临床单位进行250例临床观察(其中男141例，女109例，另设对照组175例)，具体如下表所示表1 医用几丁糖临床应用 临床应用结果表明，医用几丁糖具有预防术后组织粘连的作用，是一种可供临床应用的组织相容性良好、安全有效的新型生物医用材料。本专利技术的水熔性医用几丁糖的毒理学研究和生物学特性研究结果如下1.几丁质毒理学研究几丁糖是几丁质脱乙基后衍生而来的，首先我们对几丁质进行毒理学研究，包括a)全身急性毒性试验；b)热源试验；c)原发性皮肤刺激试验；d)皮内注射试验；e)皮肤致敏试验；f)眼结膜刺激试验；g)溶血试验；h)细菌毒性试验；i)显性致死试验；j)致突变试验；k)短期肌肉植入试验。研究结果证明几丁质具有无毒性、无刺激性、无免疫抗原性、无热源反应、不溶血、无致突变及无致死性突变反应，是一种组织形容性良好的新的体内植入生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种水溶性医用几丁糖制剂，其特征在于该制剂是由水溶性几丁糖与药用辅料组成的。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：侯春林，顾其胜，
申请(专利权)人：侯春林，顾其胜，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]