将氯化血红素经溴化氢加成得到中间体３，８－二溴乙基次卟啉Ⅸ（Ⅰ），（Ⅰ）在控制条件下与甲醇／水混合物反应，所得产物经硅胶色谱分离得到如下次卟啉衍生物，其组成（Ｗ／Ｗ）为：３－或８－甲氧基乙基－８或３－羟乙基次卟啉Ⅸ（Ⅱ）５５±５％ ３，８－二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ（Ⅲ）２０±３％ ３－或８－甲氧基乙基－８－或３－７烯基次卟啉Ⅸ（Ⅳ）１５±２％；３－或８－羟乙基－８－或３－乙烯基次卟啉Ⅸ（Ⅴ）１０±２％；所述四种卟啉组成的次卟啉衍生物钠冻干制剂各成分含量比稳定，作为一种新型肿瘤光动力治疗药物，其实验疗效明显优于目前临床使用的光动力治癌药物血卟啉衍生物（ＨｐＤ），毒性明显低于后者。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属医药
，具体涉及光动力治癌药物次卟啉衍生物。目前国内外临床使用的光动力治癌药物血卟啉衍生物(HematoporphyrinDerivative,HpD)和光敏素Ⅱ或卟非姆钠(Photofrin Ⅱ or Sodium Pofimer)均为组成不定的混合卟啉制剂，其肿瘤光生物活性成分不明确，并含有大量在体内均匀分布和清除缓慢的强光敏化卟啉，如血卟啉、羟乙基乙烯基次卟啉、原卟啉等。其共同缺点是(1)由于组成不定，无法制定制剂质量的控制标准；(2)因有效成分不明而影响光动力疗效的稳定性；(3)由于制剂中存在大量在体内缓慢清除的强光敏化卟啉而造成机体正常组织的严重光毒反应。上述缺点从制剂质量、疗效、及毒副反应三个方面限制了它们作为创新药物发展的基本前提(许德余肿瘤光动力疗法原理、药物和临床应用导论KesselD和Dougherty TJ:Porphyrin Photosensitization.Plenum Press,NewYork,1983；Spinelli P等Photodynamic Therapy and Biomedical Lasers.Amsterdam-London-New York-Tokyo,Excerpta Medica,1992)。本专利技术的目的在于提供一种肿瘤光生物活性成分明确、制剂质量易于控制、疗效稳定和正常组织光毒副反应相对轻微的光动力治癌药次卟啉衍生物(DpD)。本专利技术的目的还在于提供制备这种次卟啉衍生物的方法。本专利技术的进一步目的在于提供注射用次卟啉衍生物钠冻干制剂。本专利技术的光动力治癌药物次卟啉衍生物包含组成比例稳定的四种卟啉(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)的混合物 (Ⅱ)3-或8-甲氧基乙基-(Ⅲ)3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ8-或3-闳乙基次卟啉Ⅸ (Ⅳ)3-或8-甲氧基乙基-8-或3- (Ⅴ)3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基乙烯基次卟啉Ⅸ次卟啉Ⅸ上述四种卟啉的重量比(W/W)为3-或-8甲氧基乙基-8或3-羟乙基次卟啉Ⅸ(Ⅱ)55±5％3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ(Ⅲ)20±3％3-或8-甲氧基乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅳ) 15±2％3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅴ) 10±2％本专利技术的次卟啉衍生物制备方法的特征在于(1)以氯化血红素为基始原料，在溴化氢饱和冰醋酸溶液中密闭搅拌反应得到中间体3,8-二溴乙基次卟啉(Ⅰ)，该中间体于室温下与85％甲醇水溶液反应，生成包含血卟啉Ⅸ(Ⅵ)、原卟啉Ⅸ(Ⅶ)、3-或-8甲氧基乙基-8或3-羟乙基次卟啉Ⅸ(Ⅱ)、3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ(Ⅲ)、3-或8-甲氧基乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅳ)和3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅴ)的次卟啉衍生物粗品； (2)上述次卟啉衍生物粗品经硅胶柱层析分离除去血卟啉及原卟啉，得到如下具有稳定组成的次卟啉衍生物3-或-8甲氧基乙基-8或3-羟乙基次卟啉Ⅸ(Ⅱ)55±5％3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ(Ⅲ)20±3％3-或8-甲氧基乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅳ)15±2％3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅴ)10±2％本专利技术的注射用次卟啉衍生物钠冻干制剂由上述次卟啉衍生物溶于稀NaOH溶液后冷冻干燥而制成。以下对本专利技术作详细描述。本专利技术的次卟啉衍生物是由3-或-8(1-甲氧基乙基)-8或3-(1-羟乙基)次卟啉(3-or 8-(1-methoxyethyl)-8-or 3(1-hydroxyethyl)-deuteroporphyrin Ⅰ,55±5％)、3,8-二甲氧基乙基次卟啉(3,8-dimethoxyethyl-deuteroporphyrin Ⅱ,20±3％)、3-或8-(1-甲氧基乙基)-8-或3-乙烯基次卟啉(3-或8-(1-methoxyethyl)-8-或3-vinyl-deuteroporphyrin Ⅲ,15±2％)和3-或8-(1-羟乙基)-8-或3-乙烯基次卟啉(3-或8-(1-hydroxyethyl)-8-or 3-vinyl-deuteroporphyrin Ⅳ,10±2％)所组成。本专利技术的次卟啉衍生物制备方法包括以下操作步骤(1)以氯化血红素为基始原料，在溴化氢饱和冰醋酸溶液中密闭搅拌反应得到中间体3,8-二溴乙基次卟啉(Ⅰ)，该中间体于室温下与85％甲醇水溶液反应，生成包含血卟啉Ⅸ(Ⅵ)、原卟啉Ⅸ(Ⅶ)、3-或-8甲氧基乙基-8或3-羟乙基次卟啉Ⅸ(Ⅱ)、3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ(Ⅲ)、3-或8-甲氧基乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅳ)和3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅴ)的次卟啉衍生物粗品； (2)上述次卟啉衍生物粗品经硅胶柱层析分离除去血卟啉及原卟啉，得到如下具有稳定组成的次卟啉衍生物3-或-8甲氧基乙基-8或3-羟乙基次卟啉Ⅸ(Ⅱ)55±5％3,8-二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ(Ⅲ)20±3％3-或8-甲氧基乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅳ)15±2％3-或8-羟乙基-8-或3-乙烯基次卟啉Ⅸ(Ⅴ)10±2％上述步骤(1)中二溴乙基次卟啉(Ⅰ)在冰醋酸溴化氢饱和溶液中的浓度以2.5％为佳，与85％甲醇水溶液反应的体积比为1∶0.5-1∶5，以1∶0.55为佳。上述步骤(2)中所用硅胶为300目以上的层析硅胶或硅胶H；所用洗脱剂为氯仿/丙酮/甲醇/甲酸(10∶1∶1∶0.1)或氯仿/甲醇/甲酸(10∶1∶0.1)。．用本专利技术方法制备的次卟啉衍生物粗品为紫红色固体，不溶于水，溶于氯仿、四氢呋喃、甲醇等有机溶剂。因其组成分均为卟啉化合物，分子中存在可质子化氮原子和游离羧基，故能与酸或碱生成水溶性盐。此外，卟啉化合物具有光敏化作用，对可见光敏感，特别是在有氧条件下，可因自身光动力氧化效应而导致破坏。本专利技术的次卟啉衍生物原料药的质量标准(1)性状本品为暗红色、无臭、无味的粉末状固体。无熔点。易溶于四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂，不溶于水。能与强酸、强碱水溶液作用生成盐而溶于其中。将本品的强酸或强碱水溶液调节pH至4-5时，因达到其等电点而从溶液中析出沉淀。(2)鉴别a．薄层色谱(TCL)分析取硅胶H(粒度10-40μm)10g，加羧甲基纤维素(CMC)钠水溶液(0.25％)28±1mL，调成糊状，将其均匀涂布于载玻片上，硅胶厚度为0.25mm，置于水平台面，自然晾干后，105℃活化1小时，置干燥器中备用。取次卟啉衍生物加甲醇制成浓度为2mg/mL的溶液。用微量注射器或定量毛细管吸取该溶液1-2μL，点于备用的硅胶H薄板上，干燥后置高效薄层色谱水平展开槽中，以氯仿/甲醇/甲酸(10∶1∶0.1V/V/V)为展开剂，自然或低温干燥。薄层板上显示4个暗红色班点，b．紫外吸收光谱分析取本品适量，精密称定，加甲醇配成浓度为2μg/mL的溶液。按照中国药典1995年版二部附录18-19页ⅣA紫外分关光度法测定，在396±1、498±1、532±1569±1621±1nm波长处，应出现特征吸收峰。在396±1波长处有最大吸收峰。c．荧光光谱分析取鉴别b项下的溶液适量，用甲醇稀释，使成浓度为0.1μg/mL本品的溶液，在荧光分光度计上测定。激发光波长为395nm，发射光波长从本文档来自技高网...
【技术保护点】
次卟啉衍生物，包含组成比例稳定的四种卟啉（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ）的混合物： ＊＊＊ （Ⅱ）３－或８－甲氧基乙基－８－或３－羟乙基次卟啉Ⅸ ＊＊＊ （Ⅲ）３，８－二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ ＊＊＊ （Ⅳ）３－或８－甲氧基乙基－８－或３－乙烯基次卟啉Ⅸ ＊＊＊ （Ⅴ）３－或８－羟乙基－８－或３－乙烯基次卟啉Ⅸ 上述四种卟啉的重量比（Ｗ／Ｗ）为： ３－或－８甲氧基乙基－８或３－羟乙基次卟啉Ⅸ（Ⅱ） ５５±５％ ３，８－二甲氧基乙基次卟啉Ⅸ（Ⅲ） ２０±３％ ３－或８－甲氧基乙基－８－或３－乙烯基次卟啉Ⅸ（Ⅳ） １５±２％ ３－或８－羟乙基－８－或３－乙烯基次卟啉Ⅸ（Ⅴ） １０±２％。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：许德余，
申请(专利权)人：上海复旦张江生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]
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