真核细胞中高化学计量的非遗传性突变的鉴定方法技术

本发明专利技术真核细胞中高化学计量的非遗传性突变的鉴定方法，提供了一种基于质谱分析的蛋白质组学技术和基因组ＤＮＡ测序，对非遗传性突变（ＮＧＭ）的单氨基酸突变导致的蛋白质合成错误的鉴定及半定量方法。本发明专利技术方法具体通过综合大规模蛋白质组分析、非限制性序列比对、合成肽段的高解析度二级质谱和三级质谱鉴定及基因测序，对ＮＧＭ进行了系统解析，鉴定出４个蛋白的４个肽段中含有ＮＧＭ。本发明专利技术估算出ＮＧＭ在肽段中的发生率约０．０５％，在蛋白质水平上高于０．３％。根据突变肽段及正常肽段的质谱肽谱计数比，ＮＧＭ的化学计量介于０．０５～０．７１之间。通过本发明专利技术的鉴定方法首次证明了ＮＧＭ的高发生率及高化学计量；同时，也预测了ＮＧＭ作为一种可能的机制参于了基本的生物学和生理学过程。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
１．一种非遗传性突变的鉴定方法，包括下述步骤：ａ．从真核细胞中提取线粒体蛋白质；ｂ．对上述线粒体蛋白质进行大规模的蛋白质组学分析；ｃ．识别所有可能带有点突变的ＮＧＭ候选多肽；ｄ．验证野生型突变多肽与突变型合成多肽的化学同一性；ｅ．对含有点突变的多肽的对应ＤＮＡ片段进行基因组ＤＮＡ测序，以证实这些点突变是由蛋白质合成过程而不是由基因点突变所造成的。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵英明，
申请(专利权)人：赵英明，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]