高良姜萃取物在制备脂肪酸合成酶抑制剂中的应用制造技术

本发明专利技术的名称为一种脂肪酸合成酶抑制剂及其制造方法与应用，涉及酶的抑制剂及其制造方法与应用。本发明专利技术的目的是提供一种能有效抑制脂肪酸合成酶活性的脂肪酸合成酶抑制剂。本发明专利技术的脂肪酸合成酶抑制剂是用有机溶剂或水或有机溶剂与水的混合物，从中药高良姜中萃取出的物质。所述的有机溶剂为极性有机溶剂，其中，优选的是乙醇，最优选的是２０％－７０％的乙醇，更优选的是３０％－４０％的乙醇。生产脂肪酸合成酶抑制剂的方法，包括以下步骤：（１）将粉碎后的高良姜置于容器中，加入有机溶剂或水或有机溶剂与水的混合物；（２）在２０℃－４０℃条件下萃取１－５小时；（３）离心或过滤，收集上清液。以本发明专利技术的脂肪酸合成酶抑制剂为活性成分的药物及添加剂将会得到非常广泛的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶的抑制剂及其制造方法与应用，特别是涉及一种脂肪酸合成酶抑制剂及其制造方法与应用。此外，还有研究表明脂肪酸合成酶和癌症的发生有着密切的关系，许多癌细胞中都有异乎寻常的高表达脂肪酸合成酶，如人类乳腺癌中便呈现出脂肪酸合成酶的高水平表达和高活性(Kuhajda FP，Jenner K，Wood FD，et al.Fatty acid synthesisa potential selective target for antineoplastic therapy.Proc Natl Acad SciUSA，1994，916379-6383)。对乳腺癌、前列腺癌、子宫癌和甲状腺癌等的研究表明这些癌的恶性种类中存在脂肪酸合成酶的优先表达。脂肪酸合成酶的表达和恶性肿瘤之间存在的关系还显示脂肪酸合成的活性在肿瘤维持它的恶性表型的过程中起着重要作用。事实上，除了乳房和子宫内膜外，脂肪酸合成酶在绝大多数正常组织中均受到饮食中脂肪的负调节，而相反，脂肪酸合成酶在癌细胞中却通常是高表达，这种组织分布特异性使得脂肪酸合成酶成为治疗癌症的一个引人注目的新靶点。而且已有实验证明在体内抑制脂肪酸合成酶的活性对人类癌细胞确实表现出了选择性的杀伤毒力(Francis P.Kuhajda，MD，2000.Fatty-Acid Synthase and humancancernew perspectives on its role in tumor bology.Nutrion 16202-208)。FAS抑制剂是人类癌细胞的选择性细胞毒素，恶性肿瘤和FAS表达之间的关系显示，FAS的表达和其自身的活性可能对人类癌细胞的生存和生长均至关重要。体外实验证明FAS抑制剂浅蓝菌素(Cerulenin)是人类癌细胞的选择性细胞毒素，5g/ml的浅蓝菌素对人类NIHOVCAR-3卵巢癌的生长抑制在72小时内达到ID50，但对正常皮肤纤维母细胞没有生长抑制(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition offatty acid synthesis delays disease progression in a xenograft model of ovariancancer.Cancer Res 1996；561189)。它对许多人类癌细胞系有广谱抗性，包括乳腺(MCF-7，ZR-75-1，SKBR3，MDA435)(Kuhajda FP，Jenner K，wood FD，etal.Fatty acid synthesisa potential selective target for antineoplastictherapy.Proc Natl Acad Sci USA，1994；916379)，卵巢(OVCAR-3)(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition of fatty acid synthesis delays diseaseprogression in a xenograft model of ovarian cancer.Cancer Res 1996；561189)，结肠(HCT116，RKO)，白血球(HL60)(Pizer ES，Wood FD，Pasternack GR，etal.Fatty acid synthase(FAS)a target for cytotoxic antimetabolities in HL60promyelocytic leukemia cells.Cancer Res 1996，56(4)745-751)，前列腺(TSU-prl)。E.Pizer等发现浅蓝菌素对癌细胞的毒性和脂肪酸合成有关(Rashid A，Pizer ES，Moga M，et al.Elevated expression of fatty acid synthase and fattyacid synthetic activity in colorectal neoplasia.Am J Pathol，1997，150(1)201-208)。对FAS的抑制导致细胞凋亡显示癌细胞的存活是依赖于脂肪酸合成途径的。体内试验也得到类似结果，将人类OVCAR-3移植到裸鼠体内，24小时后用浅蓝菌素处理，会提高存活率并阻止其向恶性发展(Pizer ES，Wood FD，Heine HS，et al.Inhibition of fatty acid synthesis delays disease progression in a xenograftmodel of ovarian cancer.Cancer Res 1996，56(6)1189-1193)。这种处理对腹水瘤影响最大，恶性发展从对照的65％降低到21％，对实体瘤的生长代谢影响相对小一些。Pizer等的研究表明，人体内成长最快的组织子宫内膜在增生期可在其上皮细胞表达大量FAS(Pizer ES，Kurman RJ，Pasternack GR，et al.Expression of fattyacid synthase is closely linked to proliferation and stromal decidualizationin cycling endometrium.Int J Gynecol Pathol 1996，1645-50)。用流式细胞仪对HL-60细胞进行分析显示，当抑制了脂肪酸合成时细胞聚集在G1期而不能通过细胞周期。在人类结肠癌细胞系中还发现，抑制FAS后90分钟内DNA合成受到抑制，6小时后凋亡开始。这些发现都表明脂肪酸合成与人体组织的增生存在某种联系。另一类抑制剂——乙酰辅酶A羧化酶(ACC)抑制剂，如TOFA(Halvorson DL.Inhibition of fatty acid synthesis in isolated adipocytes by 5-(tetradecyloxy)-2-furoic acid.Lipids，1981，19851-856)，也可以抑制细胞中脂肪酸的合成，但它却不能引发癌细胞的凋亡，并且ACC抑制剂还能使癌细胞免受FAS抑制剂的毒害。ACC催化的反应位于FAS催化的反应的上游，前者使乙酰辅酶A羧化成丙二酰辅酶A，后者则继续将乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合成脂肪酸。进一步研究两种抑制剂对癌细胞毒性的差异，发现两种抑制剂处理细胞后，细胞内丙二酰辅酶A的含量水平发生不同变化。利用HPLC检测用上述两种酶抑制剂处理过的细胞中丙二酰辅酶A的含量，发现用20g/ml的TOFA处理后，丙二酰辅酶A的含量比对照低60％，而在分别用10g/ml的浅蓝菌素和另一个FAS抑制剂C75处理的细胞中，丙二酰辅酶A的含量分别升高930％和370％(Pizer ES，Thupari J，Han WF，et al.Malonyl-coenzyme-A is a potential mediator of cytotoxicity induced byfatty-acid synthase inhibition in 本文档来自技高网...

【技术保护点】
脂肪酸合成酶抑制剂，它是用有机溶剂或水或有机溶剂与水的混合物，从中药高良姜中萃取出的物质。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：田维熙，李兵辉，李丽春，王玄，程晴，
申请(专利权)人：田维熙，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]