用于治疗实体瘤的含有白头翁根浸膏作为活性成分的药物制造技术

一种用于治疗实体瘤的药物，包括作为活性成分的白头翁根浸膏，其中白头翁根浸膏含有常春藤苷配基３－Ｏ－α－Ｌ－吡喃鼠李糖基（１→２）－［β－Ｄ－吡喃葡糖基（１→４）］－α－Ｌ－吡喃阿糖糖苷。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及下式(I)代表的常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷 或者来自白头翁根(Pulsatillae radix)的含有这种化合物的浸膏作为实体瘤治疗药物的用途。
技术介绍
白头翁根是属于毛莨科族(Ranunculaceae)白头翁属(Pulsatilla)的干根(Ki Hwan Bae，韩国草药(Korean MedicinalHerbs)，1999)。根据中国药典，已知白头翁根具有对血液去热和去毒的作用。它还被用作消炎药，收敛剂，止血剂和止泻药，并且用于治疗便血，疟疾，鼻出血和牙出血。它的花称为白头翁花(Pulsatillae Flos)，用于治疗疟疾或天花。它的叶称为白头翁叶(Pulsatillae Folium)，用于治疗腰痛，水肿或心痛。另外，据报道白头翁根煎剂具有抗阿米巴痢疾的抗菌作用和抗毛滴虫的杀虫作用。白头翁根含有大约9％的皂甙，现在已经从中分离了这样的成分，如原银莲花素(protoanemonin)，银莲花素，毛莨碱，常春藤苷配基元，桦木酸，和齐墩果酸衍生物和它们的糖苷，如下式(II)所表示 原银莲花素 银莲花素毛莨碱 常春藤苷配基R＝H常春藤苷配基3-O-b-D-吡喃葡糖苷R＝glcPatensinR＝glc-gal 23-羟基-桦木酸R1＝R3＝H，R2＝OH白头翁酸R1，R2＝O，R3＝H白头翁苷AR1＝R3＝H，R2＝ara白头翁苷BR1＝H，R2＝OH，R3＝glc-glc对于上述成分还没有充分研究它们的药学作用，但是据报道原银莲花素具有有丝分裂毒性(mitotoxicity)(Vonderbank，F.，Pharmazie 5，210，1950)。Li等(Li，R.Z.，等，药学学报28，326-31，1993)也报道了毛莨碱通过抑制DNA聚合酶具有抗KB细胞的细胞毒性。Shimizu等人从朝鲜白头翁(Pulsatilla cerna)和韩国白头翁(P.koreana)(Chem.Pharm.Bull.，26，1666，1978)；Yoshihiro等人从白头翁(Pulsatilla chinensis)(J.Nat.Pro.，62，1279，1999)，Ekabo等人从Serjania salzmanniana Schlecht(J.Nat.Prod.，59，431，1996)分离出常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷。Kang等人也从韩国白头翁(P.koreana)分离出它，并且再次证实了它的结构。Yoshihiro等人在上述文章中报道常春藤苷配基和齐墩果酸衍生物表现出抗HL-60人白血病细胞的细胞毒性。他们报道说从中国白头翁根(Pulsatilla chinensis)分离的常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷具有弱的抗HL-60的细胞毒性，即ED50是3.8微克/毫升。然而，大多数皂甙和很多种天然产物一般表现出这样水平的细胞毒性，因此，在其基础上不能说上述化合物具有抗肿瘤活性。因此，还从来不知道常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷具有抗肿瘤特别是抗实体瘤的活性。本专利技术的公开本专利技术人从草药包括峨参(Anthriscus sylvestris Hoffman)，白头翁根等中分离了脱氧鬼臼毒，并且发现这种物质通过抑制血管发生而抑制实体瘤细胞的生长，并且为此获得一项韩国专利(韩国专利号315200)。本专利技术人进行了大量研究，从草药开发了抗肿瘤药物。结果，他们从白头翁根获得了一个级分，该级分在有机溶剂中溶解性能不好，但是在水中容易溶解，并且从该级分分离出一种抗肿瘤化合物，从而完成了本专利技术。因此，本专利技术的目的是提供用于实体瘤的治疗药物，包括从白头翁根分离的抗肿瘤化合物，或者从含有这种活性成分的白头翁根得到的级分。本专利技术的一方面提供用于实体瘤的治疗药物，包括含有常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷作为活性成分的白头翁根浸膏。“实体瘤”，如这里使用的，指除了血液癌症之外的任何物质性肿瘤(mass tumor)，其中代表性例子是肺癌。在本专利技术中，通过用乙醇水溶液提取白头翁根，并且通过向其中加入丙酮形成沉淀而获得水溶性级分(WT)，能获得含有常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷的白头翁根浸膏。或者，通过用乙醇水溶液提取白头翁根，通过向其中加入丙酮形成沉淀而获得水溶性级分，并且使该级分通过Sephadex LH20柱获得Rf是0.48至0.5的级分(SPX3)，并且显示红色，喷雾硫酸之后加热则显示蓝色。本专利技术的一方面提供用于实体瘤的含有常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷作为活性成分的治疗药物。下面将详细描述本专利技术。根据本专利技术，用50％乙醇提取白头翁根浸膏，获得在丙酮中溶解性能不好的级分WT，该级分在Sephadex LH20上进一步纯化，得到级分SPX3，从该SPX3级分最终获得纯SB365。这种化合物是常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷，并且表现出比临床药物多柔比星(adriamycin)更高的抗小鼠肺肿瘤细胞、LLC(Lewis肺癌)细胞或者人肺肿瘤细胞、NCI-H23细胞形成的实体瘤的抗肿瘤活性。特别地，从白头翁根制备抗肿瘤级分并且从中分离抗肿瘤物质的本专利技术方法如下。(1)从白头翁根制备抗肿瘤级分WT用50％乙醇水溶液提取白头翁根粉末，然后减压干燥。为了获得干燥物质，加入5至10倍量的丙酮。振摇混合物，发3000rpm离心，从中倾析上清液，得到不溶部分。将上述过程重复两次。残留的不溶部分容易溶解于水，并且指定为“WT级分”。该级分具有相对高的抗移植有LLC细胞的BDF1小鼠和移植有NCI-H23细胞的裸鼠的抗肿瘤活性。(2)从级分WT制备级分SPX3 将给定量的级分WT溶解于给定量的各种浓度的甲醇水溶液中，然后在用相同的溶剂稳定化过的Sephadex LH20柱上分级分离。在这种情况下，使用80％甲醇水溶液，填装的柱子的大小是针对500毫克WT级分用60×4厘米，实现最佳分离。结果，获得级分SPX1(试管号26-66)，级分SPX2(试管号66-91)，级分SPX3(试管号91-111)和级分SPX4(试管号111-138)。当向硅胶板上铺展的级分喷洒硫酸并且将平板加热时，级分SPX3首先显示红色，随着时间流逝显蓝色，并且含有Rf是0.48-0.50的点样化合物作为主要活性成分。它显示对移植有LLC细胞的BDF1小鼠和移植有NCI-H23细胞的裸鼠有高抗肿瘤活性。(3)从级分SPX3分离SB365为了从级分SPX3分离表现出抗肿瘤活性的抗肿瘤物质，进行HPLC获得纯的化合物，SB365。为了鉴定SB365的结构，进行Lieberman-Burchard反应，IR，1H-NMR，13C-NMR，和乙醇/硫酸水解作用。结果，证明SB365是常春藤苷配基3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)--α-L-吡喃阿糖糖苷，一种已经从白头翁根中分离出来的皂甙成分。根本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：金松倍，安丙浚，金勇，
申请(专利权)人：金松倍，
类型：发明
国别省市：