银杏叶提取物氯化钠注射液的制备方法技术

本发明专利技术涉及银杏叶提取物氯化钠注射液的制备方法，属于中药制备技术领域。该银杏叶提取物中总黄酮和总萜内酯的总含量达到８０％以上，其中总黄酮达７０％以上，黄酮醇甙达４０％以上，总萜内酯的含量达到１０％以上。本发明专利技术银杏叶提取物氯化钠注射液的制备方法包括配液、过滤、灌封、灭菌等步骤。本发明专利技术银杏叶提取物的提取工艺路线合理，提取、除杂、纯化、萃取、柱分离与精制等过程符合大生产要求，具备工业化条件。本发明专利技术的银杏叶提取物氯化钠注射液为临床提供了新的银杏叶提取物剂型，不会产生过敏反应和溶血作用，静脉注射对血管无刺激性。在使用时可以直接使用，与小针或者冻干制品相比更为方便，在心脑血管疾病领域具有广阔的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，尤其涉及一种治疗心脑血管、周边血管等血液循环障碍性疾病的原料药与制剂，属于中药制备

技术介绍
心脑血管、周边血管等血液循环障碍性疾病是临床最常见的疾病之一，是影响人民健康和长寿的一类主要疾病。银杏叶提取物及其制剂在心脑血管、周边血管疾病方面的作用越来越受到世界各国的重视。银杏(Ginkgo biloba L.)为古代遗孑植物，又名白果树。银杏是我国的稀有树种，也是世界上珍贵的药用植物资源。尤其在最近四十年来，国内外相继对银杏化学成分、药理作用进行了深入研究，大量的药学、药理、药效、临床研究表明银杏叶提取物的主要活性成份是银杏总黄酮醇苷类、萜内酯类化合物，这两类成分也是评判银杏叶提取物质量的重要指标。临床及药理研究发现银杏叶提取物具有增强心功能、改善微循环、降低血液粘稠性、拮抗血小板活化因子(PAF)，清除体内自由基及明显的纤维蛋白原溶解，抑制血流再灌注后的损伤，增强心脏细胞对缺血的耐受能力等。60--70年代，在国外尤其是德国、法国已有一定量银杏叶提取物应用于临床并证明了其效果，目前已发展到欧、亚、美等几十个国家。目前国内外利用银杏叶提取物开发出了许多能有效治疗与预防心脑血管、周边血管、神经系统、泌尿系统疾病的药物与保健食品，银杏叶提取物及其制剂已在临床与人们的生活中有了一定的应用，但应用程度不高，银杏制剂主要作为辅助药物用于临床，主要原因是银杏叶提取物质量标准中有效成分量偏低，影响了疗效。如国际上通用的EGB761银杏叶提取物质量标准中以银杏黄酮苷24％、萜内酯6％为质量指标，用银杏黄酮苷24％、萜内酯6％作为银杏叶提取物的有效成分限度是偏低的，不能满足临床的疗效要求。造成银杏叶提取物有效成分含量偏低的原因同银杏叶提取物的生产工艺有很大关系。已报道的银杏叶提取物现有工艺技术有树脂吸附纯化法、热浸法、微波提取法、CO2超临界提取法等。现有技术存在的主要问题提取的有效成分总量不高、工艺路线不够合理或工业化条件不具备等。
技术实现思路
本专利技术的目的是提出一种，提高银杏叶提取物中活性物质银杏总黄酮、黄酮醇苷、萜内酯的含量，并用提取物制备成大输液，以满足药物的临床需要。本专利技术提出的，包括以下步骤(1)取银杏叶提取物，加无水乙醇，加入量为每克提取物加入10-20ml无水乙醇，搅拌至溶解；(2)用60-90℃的注射用水稀释，稀释量为相当于每克提取物加入250-1000ml注射用水，加入氯化钠，加入量为每克提取物加入45克氯化钠，搅拌至溶解，得备用药液；(3)在每升备用药液中加入0.02-0.05克活性炭，在70-80℃保温并搅拌10分钟，脱炭过滤，在滤液中加注射用水至相当于每克提取物2500-10000ml注射用水，用NaOH调PH值至4.0-7.0，得到半成品溶液；(4)分别测定上述半成品溶液的PH值、萜内酯和总黄酮含量，含量合格后进行过滤，取过滤液；(5)将滤液在无菌环境下灌装，压盖、灭菌。上述方法中的银杏叶提取物的提取方法包括以下步骤(1)将干燥银杏叶粉碎至10-20目，用浓度为70-85％乙醇回流提取多次，将提取液合并，过滤，回收乙醇，对过滤液减压浓缩至稠膏；(2)在上述稠膏中加入浓度为15-25％乙醇，加入量为2-3ml/g稠膏，搅匀后回流提取，过滤，沉淀，同法再处理一次，合并滤液，搅拌，在滤液中加入浓度为0.5-1.5％壳聚糖溶液作为絮凝剂，加入量为0.1-0.4ml/g稠膏，絮凝，静置，离心分离；(3)将第(2)步离心分离得到的上清液，减压回收乙醇至无醇味，以相当于每克干叶加入0.1-1.5ml水的比例，将水加入回收乙醇后的上清液中，制得供试液A；(4)以每克树脂加入1.5-2.5ml ml供试液的比例，将上述供试液A进样至聚酰胺树脂，用浓度为5-15％乙醇洗脱，得洗脱物I，减压回收乙醇，浓缩，再用水饱和乙酸乙酯萃取，回收有机层中的溶剂后得浓缩液I，水层备用；(5)用浓度为70-80％乙醇洗脱聚酰胺柱，回收乙醇，得洗脱物II，将洗脱物II与第(4)步所得水层合并，减压浓缩至近干，以相当于每克干叶加入0.8-1.2ml浓度为80-90％乙醇的比例，用乙醇使其溶解，用NaOH溶液调PH值至9.5～10，搅拌后静置，离心分离后取上清液；(6)将第(5)步得到的上清液用NaOH溶液调PH值至5～6，减压回收乙醇至无醇味，以相当于每克干叶加入0.4-0.6ml水的比例，将水加入回收乙醇后的上清液中，用HCL溶液调PH值至3～4.5，制得供试液B，以每克树脂加入1ml供试液B的比例，将上述供试液进样至AB-8大孔树脂，以相当于每克干叶加入2-3ml浓度为8-13％乙醇的比例，用乙醇洗脱，洗脱液弃去，再以相当于每克干叶加入2.5-3.5ml浓度为55-65％乙醇的比例，用乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，得浓缩液II；(7)将浓缩液I、浓缩液II合并，减压浓缩，真空干燥，得银杏叶提取物。本专利技术提出的，其中银杏叶提取物的提取工艺路线与已有技术相比更合理提取、除杂、纯化、萃取、柱分离与精制等过程符合大生产要求；絮凝剂壳聚糖、聚酰胺柱、AB-8大孔树脂等的使用科学可行；生产成本低；有效成分提取率高；具备工业化生产的条件。本专利技术的银杏叶提取物氯化钠注射液为临床提供了新的银杏叶提取物剂型，不会产生过敏反应和溶血作用，静脉注射对血管无刺激性。在使用时可以直接使用，与小针或者冻干制品相比更为方便。可以更好地满足临床需要，在心脑血管疾病领域具有广阔的应用。具体实施例方式本专利技术银杏叶提取物的制备以银杏叶为原料。秋季银杏叶尚绿时采摘，除去杂质，晒干。选用的银杏叶中含总黄酮醇苷达0.85％以上，总萜内酯达0.25％以上。制备方法如下1.提取将干燥银杏叶粉碎至10-20目，用浓度为65-85％乙醇提取若干次，将提取液合并，滤过，回收乙醇，浓缩至稠膏。银杏叶细度对提取效果的影响是，粉碎过细不仅杂质增加，还影响总黄酮醇苷和总萜内酯的提出，采用10～20目的碎叶提取比较适合，本专利技术确定的银杏叶粒度范围是10～20目。不同乙醇浓度对提取效果的影响是乙醇浓度的提高有助于总黄酮醇苷和总萜内酯的浸出，用75％的乙醇提取即可得到较好的提取效果，而90％乙醇在生产成本方面考虑没有必要，且其提出物中叶绿素等脂溶性杂质太多，给后来的分离精制造成困难。本专利技术明确乙醇浓度范围是70-85％。提取时间和次数对提取效果的影响是，提取时间超过1小时，总黄酮醇甙和总萜内酯的浸出已经接近完全，第二、三次提取超过0.5小时，总黄酮醇甙和总萜内酯的浸出就已经接近完全；提取次数超过3次时，总黄酮醇甙和总萜内酯的浸出也已经接近完全。在此基础上再增加时间或次数则没有必要。本专利技术明确提取时间及次数是提取三次，时间分别为1-2小时、0.5-1小时、0.5-1小时。乙醇用量对提取效果的影响是，三次加醇量为12、8、6倍的提取效果与14、10、8倍量接近，采用12、8、6倍量75％乙醇为提取溶媒用量比较适合。因此本专利技术提出三次乙醇用量范围是乙醇用量(重量)分别为银杏叶干重的10-14倍(第1次)、7-9倍(第2次)、5-6倍(第3次)。2.分离与纯化(1)转溶与除杂加入10-30％乙醇搅匀后回流提取，滤过、沉淀，同法再处理一次，合并滤液，搅拌，加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏叶提取物氯化钠注射液的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：　　　　（１）取银杏叶提取物，加无水乙醇，加入量为每克提取物加入１０－２０ｍｌ无水乙醇，搅拌至溶解；　　　　（２）用６０－９０℃的注射用水稀释，稀释量为相当于每克提取物加入２５０－１０００ｍｌ注射用水，加入氯化钠，加入量为每克提取物加入４５克氯化钠，搅拌至溶解，得备用药液；　　　　　（３）在每升备用药液中加入０．０２－０．０５克活性炭，在７０－８０℃保温并搅拌１０分钟，脱炭过滤，在滤液中加注射用水至相当于每克提取物２５００－１００００ｍｌ注射用水，用ＮａＯＨ调ＰＨ值至４．０－７．０，得到半成品溶液；　　　　（４）分别测定上述半成品溶液的ＰＨ值、萜内酯和总黄酮含量，含量合格后进行过滤，取过滤液；　　　　（５）将滤液在无菌环境下灌装，压盖、灭菌。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：庄洪波，
申请(专利权)人：北京国仁堂医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]