注射用丹红及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种以植物生药丹参和红花为原料的注射用丹红及其制备方法和含量测定方法。本发明专利技术的制备方法为丹参采用乙醇回流提取，再将乙醇回流提取过的丹参用水煎煮，合并煎液，滤过；红花乙醇浸渍提取，滤过。将丹参及红花提取液混匀制成注射剂。本发明专利技术制备方法工艺先进、科学，有效成分提取更完全，提取工艺质量可控，制剂质量标准更高，并且稳定性好，药物浓度高，便于运输、储存和使用的注射用丹红及其制备方法。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药品领域，涉及一种以植物生药丹参和红花为原料的注射用丹红及其制备方法、含量测定方法。
技术介绍
目前已有的丹红注射液是由丹参和红花为原料，进行有效成分提取后制备的水针剂，虽然临床上是确有疗效的中药急症治疗药物，用于治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、缺血性脑病、脑血栓及肺心病等心血管性疾病，还可用于治疗瘀血闭塞所致的胸痹及中风等。但现有的丹红注射液存在提取工艺不完善，有效成分提取不全，产品质量控制难度大，制剂质量标准低且不完善，特别是丹红注射液的稳定性差，运输、储存也均不方便等。例如现有丹红注射液的制备工艺(WS-11220(ZD-1220)-2002)和中国专利CN 1418678A(一种治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法)所涉及的制备方法中，无监测提取终点的方法，红花的药用组分提取不全；红花的含量测定标准不够全面；注射液水溶性黄酮苷类成分分解生成的苷元不溶于水；加入注射用氯化钠调节等渗，而据文献(曹毅敏等，红花注射液与五种注射液配伍稳定性考察，广东药学，2002，12(4)31-32)报道红花注射液与氯化钠注射液配伍，粒径大于2μm和5μm的微粒均剧增，微粒的负面作用不容忽视；现有的丹红注射液采用混合提取工艺，成分过于复杂，中间体控制难度大；丹红注射液稳定性也较差，长期储存后，颜色会变深，并产生沉淀。文献(申庆亮等，正交设计法研究丹参红花注射液最佳精制工艺，前卫药学杂志，2001，15(1))所述的丹参红花注射液最佳精制工艺存在明显的不足，一是仅以丹参的成分之一原儿茶醛的量作为唯一的判断指标，而不考虑其它主要成分，特别是红花所含的药用组份如腺苷和红花黄色素等；二是采用的提取工艺为丹参红花二者先混合，再水提醇沉，丹参和红花也仅有水提组分，也无监测提取终点的方法，产品质量控制难度大；最后，丹参注射液的运输、储存很不方便。正是由于上述缺点，本专利技术对提取工艺进行了更深一步的研究和改进。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种注射用丹红有效成分混合液及其质量控制方法，本专利技术另一目的在于提供将混合液制成冻干粉针的方法。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的1、丹参先采用20～50倍乙醇回流提取3～4次，每次2～3小时，用薄层层析法控制提取终点，得丹参有效成分提取液A；再将乙醇回流提取过的丹参用10～20倍的水煎煮2～3次，每次40～80分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达75％，第二次使含醇量达85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液A合并，冷藏；取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水沉淀处理，过夜，然后取上清液滤过，即得丹参药用组分提取液B，供配液使用。2、红花先采用20～50倍稀乙醇浸渍提取2～3次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得红花有效成分提取液C；再将乙醇浸渍提取过的红花用20～50倍水温浸提取，滤过，滤液浓缩至稠膏状后加入乙醇进行两次醇沉；第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至稠膏状，然后加水，搅匀，冷藏，滤过，即得红花药用组分提取液D；将红花有效成分提取液C与D合并，滤过，即得红花药用组分提取液E。3、将上述所得提取液B与E混匀，即得注射用丹红所用植物生药的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入赋形剂0.05～0.5克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至4～9，即得注射用丹红有效成分混合液；每毫升注射用丹红含相当于原生药量丹参0.75～3.0g、红花0.25～1.0g；将上述注射用丹红的有效成分混合液按每瓶2ml，5ml，10ml或20ml的规格分装后，未封口放入与冻干箱尺寸相应的金属盘内，对冻干箱进行灭菌处理，并将其搁板的温度降低至-25℃～-50℃，迅速将装有制剂的金属盘放入冻干箱内，维持1～6小时，然后对冻干箱进行真空处理，使箱内的真空度为0.2～0.5Pa，再将搁板升温，并严格控制在共熔点-2℃以下，保持10～24小时，最后升温至40℃，并保持1～5小时，使制剂温度与搁板温度重合，放入无菌的过滤气体，控制制剂的含水量在1～5％，迅速封口即可。冷冻干燥过程中可选择的最佳物理条件是首先将搁板降温至-30℃，维持3小时，然后使冻干箱内的真空度为0.2Pa，将搁板升温并严格控制在-2℃，保持18小时，将搁板升温至40℃放入无菌气体后，控制制剂的含水量为2％。含量测定原儿茶醛与丹参素的含量测定方法1、色谱条件与系统试用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-甲醇-冰酷酸(94∶6∶0.6)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按丹参素计算，应不低于5000。2、对照品溶液的制备密称取在100～110℃干燥至恒重的原儿茶醛、丹参素对照品各30mg，置50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得(每1ml中含原儿茶醛、丹参素各0.06mg)。3、测定法精密量取本专利技术注射用丹红5ml，置25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取对照品溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。本专利技术注射用丹红每1ml含丹参提取物以原儿茶醛(C7H6O3)与丹参素(C9H10O5)的总量计，应不少于0.6mg。总黄酮的含量测定方法1、对照品溶液的制备精密称取在100-110℃干燥至恒重的芦丁对照品30mg，置100ml量瓶中，加50％甲醇适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水芦丁0.3mg)。2、标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置10ml量瓶中，各加40-60％甲醇至5ml，加5％亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置4-8分钟，加10％硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置5-8分钟，加氢氧化钠试液4ml，再加50％甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。3、测定法精密量取本专利技术注射用丹红5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加40-60％甲醇至刻度，摇匀，作为空白对照，另精密量取1ml，置10ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加50％甲醇至5ml”起，依法立即测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中相当于芦丁的重量，计算，即得。本专利技术注射用丹红每1ml含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计，应不少于6.0mg。黄色素的含量测定方法1、对照品溶液的制备精密称取在105℃干燥至恒重的黄色素对照品100mg，置100ml量瓶中，加60-80％甲醇适量，振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含黄色素1.0mg)。2、标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.5ml、3.0ml、4.5ml、6.0ml、7.5ml、9ml、10.5ml，分别置50ml量瓶中，各加70％甲醇至刻度，摇匀，以相应的溶液为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB)，在403nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种注射用丹红的有效成分混合液，其特征在于每毫升注射用丹红的混合液含相当于原生药量丹参０．７５～３．０ｇ、红花０．２５～１．０ｇ。

【技术特征摘要】
1.一种注射用丹红的有效成分混合液，其特征在于每毫升注射用丹红的混合液含相当于原生药量丹参0.75～3.0g、红花0.25～1.0g。2.如权利要求1所述的注射用丹红的有效成分混合液，其特征在于每毫升注射用丹红的混合液含相当于原生药量丹参2.7g、红花0.3g。3.如权利要求1所述的注射用丹红有效成分混合液的制备方法，其特征在于丹参的药用组分采用乙醇回流与水煎煮相结合提取；红花的药用组分采用稀乙醇浸渍与水温浸相结合提取；提取工艺步骤如下丹参粉碎成细粒状，先采用20～50倍乙醇回流提取3～4次，每次2～3小时，用薄层层析法控制提取终点，得丹参有效成分提取液A；再将乙醇回流提取过的丹参用10～20倍的水煎煮2～3次，每次40～80分钟，合并煎液，滤过；滤液浓缩后进行两次醇沉，第一次使含醇量达75％，第二次使含醇量达85％，每次醇沉后均冷藏放置，然后取上清液滤过，滤液与上述提取液A合并，冷藏；取上清液滤过，滤液浓缩至稠膏状后，加水沉淀处理，过夜，然后取上清液滤过，即得丹参药用组分提取液B，供配液使用；红花经拣选，先采用20～50倍稀乙醇浸渍提取2～3次，每次3.0小时，冷藏，取上清液滤过，滤液浓缩后水沉，再取上清液滤过，即得红花有效成分提取液C；再将乙醇浸渍提取过的红花用20～50倍水温浸提取，滤过，滤液浓缩至稠膏状后加入乙醇进行两次醇沉；第一次使含醇量达80％，第二次使含醇量达85％，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至稠膏状，然后加水，搅匀，冷藏，滤过，即得红花药用组分提取液D；将红花有效成分提取液C与D合并，滤过，即得红花药用组分提取液E；将上述所得提取液B与E混匀，即得注射用丹红所用植物生药的有效成分提取液，向有效成分提取液中按每毫升加入赋形剂0.05～0.5克，搅拌，溶解，滤过，并加注射用水适量，再调节PH值至4～9，即得注射用丹红有效成分混合液。4.如权利要求3所述注射用丹红有效成分混合液的制备方法，其特征在于该方法为丹参粉碎成细粒状，先采用25倍乙醇回流提取3次，每次2.5小时，用薄层层析法控制提取终点，得丹参有效成分提取液A；再将乙醇回流提取过的丹参用20倍的水煎煮三次，每次60分钟，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亚平，任武贤，李亚政，冯伟，卫银波，
申请(专利权)人：山西亚宝药业集团股份有限公司，中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：14[中国|山西]