一种从黑稻中提取花色素苷的方法及其组合物技术

一种从黑稻（Ｏｒｙｚａ　　ｓａｔｉｖａ　　Ｌ）中提取含有花色素苷的组合物的方法，包括：分离脱壳黑稻的外层与淀粉胚乳；向分离的外层中添加至少一种有机溶剂和酸的溶液；从分离的外层中过滤并除去溶剂和酸，产生色素级分；分离色素级分的组分；从中收集花色素苷组合物。该组合物可用于提高和／或保持ＨＤＬ－Ｃ和致动脉粥样硬化脂蛋白如ＬＤＬ－Ｃ、ＶＬＤＬ－Ｃ和ＩＤＬ－Ｃ对于氧化的稳定性，用于预防、减少、消除或改善氧化应激造成的损伤，以及用于预防、减少、消除或改善动脉粥样硬化病变和与之相关的炎症的发展。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及治疗或预防动物、特别是人的心血管疾病及其基础疾病，包括动脉粥样硬化、氧化应激和异常脂血症等症状或疾病的方法。
技术介绍
科学技术的最新进展有助于提高人类的生活质量并延长寿命，动脉粥样硬化是心血管疾病(“CVD”)的一个原因，它的预防还没有被充分解决，仍是美国、欧洲和亚洲部分地区第一位的致死原因(1)。动脉粥样硬化是一种由遗传因素和环境因素(如饮食和生活方式)相互影响所引起的变性过程。迄今为止的研究提示，胆固醇可能在动脉粥样硬化中起作用，它在血管中形成动脉粥样硬化斑块，最后阻断对心肌或对脑或四肢的血液供应，这取决于斑块在动脉树中的位置(2，3)。综述指出，个体的总血清胆固醇减少1％会使发生冠状动脉事件的危险减少2％(4)。在统计学上，平均血清胆固醇降低10％(例如从6.0mmol/L降低到5.3mmol/L)在美国每年可以防止100,000例死亡(5)。因此，与总胆固醇和低密度脂蛋白(LDL)胆固醇浓度升高有关的高脂血症是重要的危险因素。研究也表明，高密度脂蛋白(HDL)胆固醇的血浆浓度低是动脉粥样硬化发展的一个重要危险因素(6)，而高水平具有保护性。脂蛋白是脂类和蛋白质通过非共价键结合在一起的复合物。每种脂蛋白类型具有特有的质量、化学组成、密度和生理作用。与密度或颗粒大小无关，循环的脂类包含胆固醇酯和甘油三酯核心以及由磷脂、游离胆固醇和载脂蛋白构成的外壳。载脂蛋白与脂蛋白的装配和分泌有关，提供结构的完整性、激活脂蛋白修饰酶，并且是多类受体和膜蛋白的配体。在血浆中发现的脂蛋白类别包括HDL、LDL、中密度脂蛋白(IDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)。每种类型的脂蛋白都具有特有的载脂蛋白组成或比例。HDL中最主要的载脂蛋白是载脂蛋白-A I(apoA-I)，占蛋白质质量的约70％，apoA-II占另外20％。apoA-I与apoA-II的比例可以决定HDL的功能和抗动脉粥样硬化性质。循环的HDL颗粒包含圆盘形和球形颗粒的多相混合物，质量为200-400千道尔顿，直径为7-10nm。HDL是在血浆脂类转运中起作用的主要脂蛋白类别之一，在体内有多种功能，包括反向转运胆固醇、为胆汁酸合成提供胆固醇分子底物、转运群集素(clusterin)、转运对氧磷酶、预防脂蛋白氧化和肾上腺细胞对胆固醇的选择性摄取。与DHL结合的主要脂类包括胆固醇、胆固醇酯、甘油三酯、磷脂和脂肪酸。为了更好地理解HDL是如何抗动脉粥样硬化的，简要解释动脉粥样硬化过程是必要的。当LDL被捕获到血管壁内时动脉粥样硬化过程开始。该LDL的氧化导致单核细胞与血管壁的内皮细胞层结合。这些单核细胞被激活，迁移到内皮间隙，在那里它们转化为巨噬细胞，使LDL进一步氧化。氧化的LDL通过巨噬细胞上的清除剂受体被摄取，导致泡沫细胞的形成。通过动脉平滑肌细胞的增殖和迁移产生一个纤维帽，从而产生动脉粥样硬化斑块。HDL是胆固醇从肝外组织向肝脏转运所必需的，在肝脏中它作为游离胆固醇或由胆固醇形成的胆汁酸分泌到胆汁中。该过程需要几个步骤。第一步是在肝脏和肠中形成新生的或前βHDL颗粒。过量的胆固醇通过ABCA I转运蛋白的作用穿过细胞膜移动至新生的HDL内。卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)将胆固醇转化为胆固醇酯，随后将新生的HDL转化为成熟的HDL。酯化的胆固醇然后被胆固醇酯转移蛋白(CETP)从HDL转移给含有脂蛋白的载脂蛋白-B，后者被肝脏中的大量受体摄取。新生的HDL通过肝脏甘油三酯脂肪酶和磷脂转移蛋白再生，并继续循环。除了来自外周细胞的胆固醇以外，HDL也接受来自LDL和红细胞膜的胆固醇。胆固醇反向转运的另外一个机制可能涉及胆固醇在胆固醇较少的膜与HDL或其它受体分子之间的被动扩散。HDL通过胆固醇反向转运的作用以及可能通过阻止LDL氧化来防止动脉粥样硬化。有几种HDL结合酶参与这一过程。对氧磷酶(PON1)、LCAT和血小板活化因子乙酰水解酶(PAFAH)均通过水解LDL氧化过程中产生的磷脂氢过氧化物来参与，并且依次作用，阻止LDL中氧化脂类的积累。这些酶负责HDL的抗氧化和抗炎症性质。尽管高胆固醇血症是CVD患者的一个重要危险因素，但是也必须考虑其它危险因素，如氧化应激和血清同型半胱氨酸增加(7)。动脉中这些有害成分的修饰将有利于形成治疗已发展或具有发展CVD危险、但未患高胆固醇血症的患者的新方法(8)。已经证实，氧化应激在包括动脉粥样硬化在内的多种慢性病的启动和发展中具有重要作用(9)。活性氧成分(ROS)在所有需氧物种中普遍且天然存在，来自于内源性代谢生成和环境来源衍生的外源性来源。ROS是几乎不可区分的反应性分子，它们容易损伤生物大分子，包括DNA、蛋白质、碳水化合物和脂类(10)。过量或不受控制的ROS生成与不同阶段的动脉粥样硬化和CVD的发展有关，包括血管内皮细胞损伤、泡沫细胞形成、血管平滑肌增生、基因表达、血管舒缩的反应性损伤和斑块不稳定性(11，12a)。在没有足够的内源抗氧化剂保护的情况下，自由基的增加能够导致亲核细胞组分的共氧化以及次级脂类自氧化产物与亲核大分子的反应。靶组织和血液中氧化应激指示剂的实例包括8-羟基脱氧鸟苷、丙二醛、4-羟基壬醛和脂类过氧化物，不仅包括脂肪酸氧化产物，而且包括胆固醇氧化产物。通过从特异性酶和非酶的细胞抗氧化系统全面去除并解毒ROS来实现对氧化应激的控制。例如，与脂类和氧自由基的解毒有关的酶抗氧化剂包括Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD；细胞质)、过氧化氢酶(过氧化物酶体)硒-谷胱甘肽过氧化物酶/还原酶氧化还原反应循环酶(细胞质和线粒体中的GSH-Px和GSHG-Red)和非硒谷胱甘肽-S-转移酶(细胞质)。非酶细胞抗氧化剂包括α-生育酚、抗坏血酸和β-胡萝卜素。体外和体内研究的证据提示，LDL的氧化修饰与动脉粥样硬化的发生有关，并且加重其临床表现。动脉粥样硬化斑块中胆固醇氧化的具体产物已经被鉴定(12b)。因此，能够影响酶抗氧化剂活性或补体非酶抗氧化剂活性提高的抗氧化剂，特别是那些饮食来源的那些，作为能够防止产生ROS、从而防止发展为动脉粥样硬化和CVD的可能药物，已经受到相当的关注。几十年前就有人建议以稻米饮食治疗CVD。在50年以前，已经报道食用白稻米可降低血压，并且减少人类的高胆固醇血症(13)。然而，有许多不同种类的稻米。到目前为止，人类食用的最常见的稻米是白稻(85％以上)，其次是红稻和黑稻。后两者主要在南亚、希腊、意大利和美国种植。欧洲比南亚食用更多的有色稻米(14)，有色稻米在中国已经有很长的食用历史，被认为是一种增强体力的健康食物。因此，通常称其为“血液增强米”或“药米”。黑稻的色素水平为每100g稻米1mg，每100g含有3mg维生素C和0.2mg核黄素，与不含色素的稻米相比含有更多的铁、钙和磷。在印度的喀拉拉，品种Navara被认为具有医药特性，用来恢复瘫痪病人的神经；oridine是稻米中存在的一种生物碱，当不纯时具有一定的抗神经官能症特性。黑稻领域以前的研究集中于黑稻色素作为着色剂(中国专利号93109627.8)、添加黑稻色素的饮料和食品(中国专利号93109627.8)的制备和用途，以及全黑稻和红稻饮食对血清脂类和主动脉斑块的作用(15)。本专利技术的一个目的在于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从黑稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ）中提取含有花色素苷的组合物的方法，包括：ａ）分离脱壳黑稻的外层与淀粉胚乳；ｂ）向分离的外层中添加至少一种有机溶剂和酸的溶液；ｃ）从分离的外层中过滤并除去溶剂和酸，产生色素 级分；ｄ）分离色素级分的组分；和ｅ）从中收集花色素苷组合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2002-3-26 10/108,3051.一种从黑稻(Oryza sativa L)中提取含有花色素苷的组合物的方法，包括a)分离脱壳黑稻的外层与淀粉胚乳；b)向分离的外层中添加至少一种有机溶剂和酸的溶液；c)从分离的外层中过滤并除去溶剂和酸，产生色素级分；d)分离色素级分的组分；和e)从中收集花色素苷组合物。2.权利要求1的方法，其中在步骤a)中物理性分离外层与淀粉胚乳。3.权利要求1的方法，其中在步骤a)中通过碾磨脱壳的黑稻物理性分离外层与淀粉胚乳。4.权利要求1的方法，其中有机溶剂选自醇、酮、烃和水。5.权利要求1的方法，其中有机溶剂是具有结构RCOR1的酮，其中R和R1是C1-C6烷基。6.权利要求1的方法，其中有机溶剂是C5-C10烃。7.权利要求1的方法，其中有机溶剂是选自通式为R-CHOHR、R-CH2OH和RCOH的醇，其中R是C1-C4烷基。8.权利要求1的方法，其中酸选自盐酸、乙酸、柠檬酸、低浓度硫酸和酒石酸。9.权利要求1的方法，其中加入足量的酸，使pH为1-4。10.权利要求1的方法，其中分离的外层被浸于溶剂中1-10小时。11.权利要求1的方法，其中在步骤c)中通过蒸发除去溶剂和酸。12.权利要求1的方法，其中在步骤d)中通过分级来分离色素级分的组分。13.根据权利要求1-9任一项的方法制备的组合物。14.一种组合物，其含有花青素-3-O-葡糖苷和甲基花青素-3-O-葡糖苷。15.权利要求1 4的组合物，其中花青素-3-O-葡糖苷与甲基花青素-3-O-葡糖苷的比例为10∶1。16.权利要求14的组合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：耶日扎维斯托夫斯基，胡春，戴维D基茨，
申请(专利权)人：福布斯梅迪泰克公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]