一种具有降血糖作用的中药提取物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种具有降血糖作用的中药提取物，是由桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合中分离得到的多糖类、黄酮类和生物碱类组份组成，所分离得到的组份中各组份按照质量百分比，多糖类组份含量为２４－２７％；黄酮类组份含量为５３－６１％；生物碱类组份含量为１５－２０％。本发明专利技术还公开了从桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮中提取多种具有降血糖作用的组份黄酮类、多糖类和生物碱类的方法，此方法为粉碎原材料，用水、醇或含水的醇类溶剂进行提取，去杂，通过大孔树脂和离子交换树脂连续吸附，用水，不同浓度醇，氨水洗脱，浓缩低温干燥而得到的。这些提取物可用于制备治疗糖尿病和其并发症的药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中药领域，公开了一种从中药中提取有效成分的方法，更特别的，本专利技术涉及从桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮中提取具有治疗糖尿病及其并发症的组份，这些组份可应用于糖尿病及其并发症的治疗。
技术介绍
桑叶，桑枝和桑白皮为桑树的叶子，嫩枝和树根的皮，是同一个植物的不同部位，常用的中药之一。桑叶为桑科桑属植物上(Morus alba L.)的树叶。桑叶的药用首载于《神农本草经》，桑叶性味苦甘、寒，甘所以益血，寒所以凉血。甘寒相合，故下气而益阴，又能止咳，有补益之功。桑枝为桑科桑属植物桑的干燥嫩枝，味苦平，入肝经。功用去风湿，利关节，利水。桑白皮为桑科桑属植物桑的除去栓皮的根皮。性味甘，寒。入肺，脾经。功用泻肺平喘，利水消肿。治疗肺热咳喘，吐血，水肿，脚气，小便不利。历代中医药书中都有桑能够治疗消渴的记载。如《本草经疏》载，桑叶味苦，甘，寒，甘所以益血，寒所以凉血，甘寒相合，故下气而益阴，又能明目而止渴；《本草纲目》载，桑叶乃手足阳明之药，煎汁代茶，能止消渴。桑科植物的主要成分有黄酮及黄酮苷类、生物碱类、甾类成分、挥发油成分、多糖类、氨基酸类、维生素类和微量元素等。近年来国内外很多研究结果表明桑叶，桑枝和桑白皮具有很好的降血糖功能，其降糖活性的机理研究认为与其有效成分中生物碱有密切相关。有关桑叶、桑枝和桑白皮中提取分离生物碱以及其糖苷酶抑制活性的专利较多，如中国专利公开号CN1338275A，CN13094A，CN14394623A，CN1466961A，CN1471934A，CN1559539A等，只涉及到利用有机溶剂或阳离子交换树脂层析法分离桑叶、桑白皮中的总生物碱，而未涉及大孔树脂和离子交换树脂连续层析分离不同组份的方法。又如中国专利公开号CN1351085A中涉及桑叶多糖的分离，提取分离方法采用有机溶剂和离子交换树脂，均未涉及大孔树脂和离子交换树脂连续分离方法。本专利技术首次采用柱层析连续分离方法，将桑叶、桑枝和桑白皮的水或含水的醇提物连续吸附于大孔树脂和离子交换树脂，用不同极性的溶剂如水、不同浓度醇和氨水洗脱，同时分离得到黄酮类、生物碱类和多糖类组份，其得率和含量均达到预期的结果，而且本专利技术中采用的柱层析连续分离方法与传统的有机溶剂连续萃取分离法相比，具有安全无毒性，无污染等优点，可行而可靠，可以推广大规模生产。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是公开一种具有降血糖作用的中药提取物，它由桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮中分离得到的多糖类、黄酮类和生物碱类组份组成。本专利技术的另一个目的是制备此中药提取物主要组份的方法。本专利技术的另一个目的是指出此此中药提取物的用途。在本专利技术的第一方面，本专利技术提供一种具有降血糖作用的中药提取物，是由桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合中分离得到的多糖类、黄酮类和生物碱类组份组成，其特征在于，所分离得到的组份中各组份按照质量百分比，多糖类组份含量为24-27％；黄酮类组份含量为53-61％；生物碱类组份含量为15-20％。本专利技术所分离得到的组份中可以有极少量的杂质。本专利技术的黄酮类组份中槲皮素质量百分比为30～50％。本专利技术的生物碱类组份中多羟基生物碱1-脱氧野尻霉素(DNJ)质量百分比为30～45％。在本专利技术的第二方面，本专利技术提供上述中药提取物主要组份的制备方法(1)将桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合粉碎后，加入5-10倍体积的水，醇或含水醇溶剂，在25-100℃，提取2-3次，每次不少于20分钟，得提取液，将提取液过滤渣质得滤液1，再去除沉淀，得滤液2，将滤液2过大孔树脂，用去离子水洗脱，将洗脱液浓缩后醇沉，沉淀物经脱色后干燥得组份1，即，多糖类组份；(2)再用不同浓度的醇洗脱大孔树脂，各部分收集到洗脱液无色为止，分别浓缩干燥后得组份2，即，黄酮类组份；(3)将大孔树脂穿透部分液体再过离子交换树脂，水洗，用0.2-1N氨水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥而得组份3，即，生物碱类组份。进一步的，本专利技术制备方法步骤(1)所述作为提取溶剂的醇可以是甲醇、乙醇、异丙醇。进一步的，本专利技术制备方法步骤(1)所述的去除沉淀过程采用了絮凝工艺，即，把滤液1浓缩到原体积的1/10左右加入甲壳素或澄清剂，在70-80℃保温5-6小时后，离心去沉淀。进一步的，本专利技术制备方法步骤(1)所述的醇沉工艺为洗脱液浓缩到1/5～1/2小体积后加入甲醇或乙醇至总浓度达到按照体积比70-80％，4℃放置过夜，离心而得到沉淀物。更优化的体积比为70％。进一步的，本专利技术制备方法步骤(1)所述的脱色剂为乙醇和丙酮。进一步的，本专利技术制备方法所述的大孔树脂可选自AB-8型，D101型，Amberlite 252或Diaion HP-20。进一步的，本专利技术制备方法所述的离子交换树脂可采用苯乙烯树脂，选自001×1.1型，001×4型，001×7型，Amberlite IR 120，Dowex 50或Diaion SK-IA。进一步的，本专利技术制备方法所述的大孔树脂洗脱液为甲醇或乙醇的一种，浓度为30-95％。进一步的，本专利技术制备方法所述的氨水洗脱液浓度为0.5N。在本专利技术制备方法步骤(1)中，提取方法的条件是为了较为充分地提取桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮中的药物成分，本领域中对提取方法的条件做适当而不是实质改变的方法也应当是本专利技术的内容，例如提取5次，每次15分钟。在本专利技术制备方法步骤(1)中，浓缩及干燥的方法可以依据本领域许多常规的方法而实现，例如蒸发浓缩，真空干燥，雾化干燥，等等方法。本专利技术制备方法中的提取组份按以下方法来鉴定和控制质量(1)多糖类试管法(萘酚-硫酸试剂法(Molish反应))各取组份1、组份2、组份3少许，分别试验，即，加80％乙醇振摇溶解后离心，沉淀加热溶于乙醇中，再加等体积的10％α-萘酚-乙醇液，摇匀，沿试管壁滴加浓硫酸，在组份1的试验中，两液界面处出现紫红色环，表明组份1含有多糖。薄层色谱取各组份0.1g，分别试验，即，加入2mL甲醇里，用力振摇后取上清液10μL点在硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇＝8∶2展开，在组份1的试验中，在紫外灯下观察显有紫色荧光斑点，表明组份1含有多糖。多糖含量测定精密称取组份1，0.1g，加80％乙醇10mL，超声处理10分钟后过滤，不溶物用80％乙醇20mL分4次洗涤后，用热水溶解沉淀，至100mL，备用。精密称取上述溶液0.5mL，放置10mL具塞试管里，加水至1mL。加入1mL 5％苯酚水溶液，摇匀，沿管壁缓缓加入浓硫酸5mL，摇匀，置沸水浴中5分钟，冷却。以1mL水加试剂为空白，在490nm波长处测定吸光度值。由校正曲线算出多糖含量。(2)黄酮类试管法(盐酸镁粉还原显色反应)取各组份分别配成10mg·mL-1水溶液，分别试验，即，加入少量镁粉和1mL浓盐酸，观察泡沫颜色。在组份2的试验中，样品溶液在加入镁粉和浓盐酸后，迅速产生粉红色泡沫，表明组份2含有黄酮类物质。薄层色谱取各组份少许，分别试验，即，加入60％乙醇溶解，取10μL点在聚酰胺薄膜上，以90％乙醇中展开，用三氯化铝乙醇液显色，于紫外分析仪365nm下观察荧光斑点，在组份2的试验中，荧光斑点表现为紫色斑点，表明组份2含有黄酮类物质。黄酮的含量测定用60％乙醇配置0.098mg·mL-1的槲皮素标准品溶液，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有降血糖作用的中药提取物，是由桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合中分离得到的多糖类、黄酮类和生物碱类组份组成，其特征在于，所分离得到的组份中各组份按照质量百分比，多糖类组份含量为２４－２７％；黄酮类组份含量为５３－６１％；生物碱类组份含量为１５－２０％。

【技术特征摘要】
1.一种具有降血糖作用的中药提取物，是由桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合中分离得到的多糖类、黄酮类和生物碱类组份组成，其特征在于，所分离得到的组份中各组份按照质量百分比，多糖类组份含量为24-27％；黄酮类组份含量为53-61％；生物碱类组份含量为15-20％。2.根据权利要求1所述的中药提取物，其特征在于所述的黄酮类组份中槲皮素质量百分比为30～50％。3.根据权利要求1所述的中药提取物，其特征在于所述的生物碱类组份中多羟基生物碱1-脱氧野尻霉素(DNJ)质量百分比为30～45％。4.权利要求书1所述的中药提取物主要组份的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将桑科植物桑叶、桑枝、桑白皮任一或其组合粉碎后，加入5-10倍体积的水，醇或含水醇溶剂，在25-100℃提取2-3次，每次不少于20分钟，得提取液，将提取液过滤渣质得滤液1，再去除沉淀，得滤液2，将滤液2过大孔树脂，用去离子水洗脱，将洗脱液浓缩后醇沉，沉淀物经脱色后干燥得组份1，即，多糖类组份；(2)再用不同浓度的醇洗脱大孔树脂，各部分收集到洗脱液无色为止，分别浓缩干燥后得组份2，即，黄酮类组份；(3)将大孔树脂穿透部分液体再过离子交换树脂，水洗，用0.2-1N氨水洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥而得组份3，即，生物碱类组份。5.根据权利要求书4所述的中药提取物主要组份的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述作为提取溶剂的醇可以是甲醇、乙醇、异丙醇。6.根据权利要求书4所述的中药提取物主要组份的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的去除沉淀过程采用了絮凝工艺...

【专利技术属性】
技术研发人员：原爱红，黄哲，
申请(专利权)人：原爱红，黄哲，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]