治疗脑缺血再灌注损伤的药物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及治疗脑缺血再灌注损伤的药物，其中包含的活性组分为水飞蓟宾－卵磷脂复合物（ＳＬＣ），该治疗脑缺血再灌注损伤的药物对缺血再灌注脑损伤有一定的治疗作用，本发明专利技术还公开了该药物的制备方法。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及治疗脑缺血再灌注损伤的药物。尤其是涉及含活性组分水飞蓟宾-卵磷脂复合物的治疗脑缺血再灌注损伤的药物。
技术介绍
缺血再灌注损伤一直是脑血管病治疗的重点课题。中性粒细胞在缺血再灌注损伤中起着极其重要的作用。再灌注期间，中性粒细胞大量浸润于病变组织，一方面可机械性堵塞微循环通道，影响组织(特别是缺血半影区)的血液供应，另一方面，活化的白细胞可释放大量的毒性氧自由基和蛋白水解酶，损害局部的血管，导致血管通透性加强，造成组织水肿。进入组织的白细胞可进一步释放上述毒性物质，破坏残存的神经元和胶质细胞，从而加重神经组织的损伤。此外，白细胞还释放一些炎性介质和细胞因子，加重炎性反应，从而吸引更多的白细胞进入组织，形成恶性循环，直到组织完全破坏。而这种恶性循环的形成，是通过缺血/再灌注损伤细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的上调来实现的。溶栓疗法是近年来缺血性卒中治疗上的一个重要进展，通过重建脑血流，使缺血区在产生不可逆性损伤前恢复供血，可以明显改善神经功能，但伴发而来的再灌注损伤，包括血脑屏障的破坏、严重脑水肿以及脑出血，限制了急性溶栓疗法的疗效。即使不进行该治疗，自发的血栓或栓子溶解也可导致再灌注损伤，只有渗透性利尿剂或开颅减压等降低颅内压的措施可起到部分作用，目前尚无真正有效的治疗再灌注损伤的方法。而炎症反应是脑缺血再灌注损伤的主要成分，对抗炎症的各项研究具有深远的临床意义。此外，炎症反应持续至缺血后数天，因此抗炎治疗可以扩大治疗时间窗，而后者是缺血性卒中治疗中的关键点。所以准确确定炎症通路中的各种成分及其相互作用和研究开发抑制ICAM-1表达、抑制中性粒细胞的药物是一个新的研究课题，为缺血再灌注损伤的治疗提供新的途径。
技术实现思路
本专利技术提供的治疗脑缺血再灌注损伤的药物含有50％以上的活性组分水飞蓟宾-卵磷脂复合物(SLC)。水飞蓟宾(silybin)是一种黄酮类天然抗氧化剂，1968年由Wagner等从菊科植物水飞蓟中提取，对血小板聚集及血栓的形成有很好的抑制作用，有证据表明水飞蓟宾具有抗菌、抗毒素、抗氧化和减少自由基的作用。一般认为，核转录因子NF-κB是介入细胞因子刺激内皮细胞表面粘附分子表达的中心转录因子。抗氧化合物能有效地抑制NF-κB的活性，因而抑制粘附因子的表达。细胞间粘附分子、中性粒细胞在缺血再灌注脑区的上调和浸润中起着极其重要的作用。缺血再灌注期间ICAM-1的表达和中性粒细胞的浸润不仅影响了局部的血液供应而且还可直接破坏脑组织结构。本专利技术从水飞蓟宾-卵磷脂复合物(SLC)具有抗自由基和抗脂质过氧化的作用来改变ICAM-1的表达和中性粒细胞浸润的原理出发，发现了水飞蓟宾-卵磷脂复合物复合物对脑缺血再灌注损伤的保护作用。脑缺血再灌注后，ICAM-mRNA和ICAM-1蛋白质表达明显增加，中性粒细胞浸润数亦明显增加，脑梗塞面积扩大和组织含水量增加。水飞蓟宾-卵磷脂复合物复合物能下调ICAM-1的表达和抑制白细胞的聚集，特别是减少中性粒细胞的聚集和粘附，从而减少蛋白水解酶、溶酶体酶、氧自由基和其他效应分子的释放，使酶类和自由基引起的链锁反应削弱，阻止细胞膜的崩解。同时，抑制缺血再灌注损伤时的PAF和EAA的大量释放，改善神经症状，缩小梗塞面积和减轻脑水肿，对缺血再灌注脑损伤有一定的保护作用。经口服给药时，首先使本专利技术与常规的药用辅剂如赋形剂、润滑剂、崩解剂等混合，将其制成颗粒剂、胶囊、片剂等形式；经非口服给药时，可以注射液、输液剂或栓剂等形式给药。制备上述制剂时，可使用常规的制剂技术。本专利技术另一方面提供制备治疗脑缺血再灌注损伤的药物的方法称取水飞蓟宾28～60g，溶入热丙酮1250～1450ml中，得暗红色澄明液体，45～58℃保温，加入卵磷脂47～70g，搅拌，直至溶液澄明，约5～15min，接回流装置，边加热保温边振荡反应0.5～1.5h，拆除回流装置，真空浓缩至反应液体积为135～315ml，迅速加入到正己烷2856～3686ml中，得黄色沉淀物，上层液体为黄白色乳浊液，加压过滤，用正己烷洗涤沉淀，置于真空干燥箱中室干燥，得黄色固体产物86～125g。具体实施例方式下面的实施例可更详细地说明本专利技术，但不以任何形式限制本专利技术。实施例1 活性成分为SLC的治疗脑缺血再灌注损伤的药物的制备称取水飞蓟宾(上海朝晖药厂)43g，溶入热丙酮1350ml中，得暗红色澄明液体，55℃保温，加入卵磷脂(四川英格尔公司)68g，搅拌，约10min，直至溶液澄明，接回流装置，边加热保温边振荡反应1h，拆除回流装置，真空浓缩至反应液体积为270ml，迅速加入到正己烷3150ml中，得黄色沉淀物，上层液体为黄白色乳浊液，加压过滤，用正己烷洗涤沉淀，置于真空干燥箱中室干燥，得黄色固体产物103g。通过下面的试验说明本专利技术药物的活性。数据资料x±S表示，应用单因素方差分析，直线回归分析处理数据，以P＜0.05差异有显著性，P＜0.01差异有非常显著性。试验实施例1 按照实施例1制得的活性成分为SLC的药物对缺血再灌注时脑组织ICAM-1mRNA表达的影响实验方法动物和分组蒙古种沙土鼠，体重80-100克，雌雄不拘，由上海市生物制品研究所动物研究实验中心提供。按随机数字表，将动物分为假手术对照组、缺血组、缺血再灌注组、SLC(制备方法见实施例1)组和缺血再灌注溶剂组。SLC组又分为100mg/kg组、200mg/kg和300mg/kg三个亚组，除假手术组外，每组又设1h、3h、6h、12h、24h5个时相点，每组5只。脑缺血再灌注动物模型的建立蒙古种沙土鼠再饲料和水供应充足条件下，饲养一周，经10％乌拉坦(1.25g/kg)腹腔注射麻醉后，将动物仰卧固定于解剖板上，沿颈中线切开皮肤，分离两侧腺体及颈肌，暴露气管及左右两侧颈动脉，将颈总动脉与神经分离，穿线备用，同时进行气管插管，实验室室温26±1℃，动物直肠温度通过电热毯维持在37±0.2℃。其中假手术组仅作手术，不结扎动脉。缺血再灌注组用无损伤血管夹钳夹两侧颈总动脉60min后，放开动脉夹。ICAM-1mRNA原位杂交制备感受态JM109大肠杆菌，将质量转入大肠杆菌进行扩增，裂解细菌后离心，分离纯化质粒DNA，再用EcokI和Kpn I两种限制性内切酶双切质粒CDNA，经电泳分离和透析得到高纯度DNA探针片断。用地高辛随机引物法标记CDNA探针。脑组织做冰冻切片进行原位杂交，24小时(45℃孵育)；加地高辛抗体后NBI/BICP显色，封片。结果用CMIAS计算机医学图像分析仪处理，单位以面密度(目标总面积/统计场总面积)表示。脑缺血60min时，脑组织中ICAM-1mRNA明显增加，而假手术对照组表达不明显。缺血再灌注组、溶剂组和SLC治疗组于缺血再灌注1h ICAM-1mRNA表达明显增加，再灌注6h达高峰，以后逐渐下降，至24h仍维持较高的表达水平。缺血前30min给予SLC 100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg后，缺血再灌注脑组织中ICAM-1mRNA表达均较溶剂组下降，P＜0.05和P＜0.01(表1)。表1.缺血再灌注时脑组织ICAM-1mRNA表达的变化(x±s) 注与缺血组比较△P＜0.01；与缺血再灌注本文档来自技高网...

【技术保护点】
治疗脑缺血再灌注损伤的药物，其特征在于含有５０％以上的水飞蓟宾－卵磷脂复合物。

【技术特征摘要】
1.治疗脑缺血再灌注损伤的药物，其特征在于含有50％以上的水飞蓟宾—卵磷脂复合物。2.权利要求1所述的治疗脑缺血再灌注损伤的药物，所述药物为胶囊剂。3.权利要求1所述的治疗脑缺血再灌注损伤的药物，所述药物为注射液。4.权利要求1所述的治疗脑缺血再灌注损的药物的制备方法，包括下列步骤a.称取水飞蓟宾28～60g，溶入热丙酮中，得暗红色澄明液...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴晓华，
申请(专利权)人：上海市第七人民医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]