本发明专利技术涉及异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。该物质是去乙酰化酶抑制剂，可通过抑制去乙酰化酶及调节组蛋白甲基化来调控组蛋白，从而实现对基因表达进行调控；并且，该物质可诱导细胞凋亡及细胞周期的抑制；其对正常细胞无明显影响，只作用于肿瘤细胞。因此，该物质可制成有效、低毒的治疗白血病药物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。
技术介绍
异硫氰酸苯己酯的分子式是(CH2)6NCS，即C13H17NS，结构式是 异硫氰酸(isothiocyanante)以硫配糖体(glucosinolates)型式广泛存在于各种十字花科如茎椰菜、甘蓝和水田芥等植物中。异硫氰酸苯己酯(phenylhexyl isothiocyanante)已成功地被人工合成。动物实验表明，异硫氰酸苯己酯对多种肿瘤具有广泛有效的抑制作用。已知其作用原理是通过抑制一些肿瘤发生所必需的酶如细胞色素氧化酶P-450(cytochrome P-450)或诱导二相解毒酶如谷光甘肽转移酶(glutathione S-transferases)、醌氧化还原环氧化物水解酶、尿嘧啶核苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(UDP-glucronosyltrasferases)的活性来发挥抑癌作用的。新近一些在体和离体实验的结果表明，异硫氰酸苯己酯的抗癌活性还与其诱导肿瘤细胞的凋亡有关。但是，异硫氰酸苯己酯对白血病是否肯人抑制作用及其作用机理尚未见报道。白血病是一种恶性程度极高的血液病，其自然病程只有三个月。根据流行病学的统计，白血病的发病率为十万分之四，该病的主要发病年龄在35岁以下，其中50％以上是儿童。全世界每年新增、复发白血病100万人。全国每年新增白血病患者约四万人。每年死于白血病者约有3万人左右，福建省每年新增白血病患者约1200多人。白血病是全球亟需重点防治的疾病之一。近年来，随着医疗技术的发展，可以用化疗、放疗等方法遏制白血细胞，延长患者的生存期。但是，这种方法的副作用大，复发率高，不但给病人带来极大的痛苦，而且给其家庭、社会造成了沉重的负担。国际上，六十年代开始就将骨髓移植运用于白血病的治疗，并取得了良好的效果。但是，受到来源的限制，仍有许多患者因为得不到合适配型的骨髓而失治辞世。因此，研究开发符合WHO提出的特效、广谱、无毒、简便治癌四项原则的药物以提高白血病的治愈率一直受到各国学者的高度重视。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供异硫氰酸苯己酯的新用途，即在制药中的新应用。实际上，本专利技术涉及异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。异硫氰酸苯己酯是人工合成的。本研究通过TUNNEL(末端脱氧核糖核酸介导的dUTP缺口末端标记)方法检测经PHI(异硫氰酸苯己酯)处理的人类急性早幼粒细胞白血病细胞(HL60)证明可诱导HL60细胞以剂量依赖性方式凋亡，并用Western Blotting方法证明PHI可诱导凋亡蛋白酶的表达，凋亡蛋白酶9(caspase9)的表达增加，促进了其对凋亡作用底物PARP(poly ADP-ribose polymerase多聚ADP-核糖聚合酶)的水解，细胞内线粒体膜蛋白Bc1-2则被抑制；而caspase8表达没有变化；这说明PHI在诱导细胞凋亡的过程中是通过诱导凋亡的内途径，而不是通过外途径产生的。PHI诱导HL60细胞周期的抑制，使细胞停止在G1期，并证明其可上调细胞周期调节蛋白P21，P27的表达。研究表明PHI可抑制组蛋白去乙酰化酶(HDAC)的含量及活性，增加乙酰化酶蛋白的含量，提高组蛋白H3及H4的乙酰化水平；选择性调控组蛋白甲基化，如上调组蛋白H3K4的甲基化和下调H3K9甲基化水平。基因芯片研究表明，4种不同的ChIP(染色质免疫沉淀法)检测研究，P21DNA增强子探针研究均显示经PHI诱导H3乙酰化水平，后者可诱导产生P21基因增强子区的含量均增加。由此调控细胞周期。PHI对T细胞淋巴瘤细胞(MOLT-4)及急性B细胞白血病(DAUDI)也有一定的作用。已观察到可诱导肿瘤细胞凋亡及组蛋白去乙酰化酶的抑制作用。本研究表明正常外周血细胞和正常骨髓单个核细胞不受PHI的影响。本研究用PHI15μm饲养的人类早幼粒细胞白血病负荷的裸鼠，结果PHI饲养组肿瘤发生率为58.8％，而对照组(以PHI溶解剂玉米油饲养)为94.1％；肿瘤重量在治疗组为0.35±0.48，对照组为0.80±0.13，(P＜0.03)。没有发现不正常行为小鼠，且小鼠的肝、脾及体重无明显变化，(P＞0.05)，即表明没有副作用。从动物活检标本检测进行Western blottinng检测，发现PARP及Bc1-2减少，Caspase9增加，P21增加，PCNA减少，说明PHI在小鼠体内仍可诱导肿瘤细胞凋亡，并诱导阻滞细胞周期，减小肿瘤负荷。而对照组无此类改变。总之，由以上研究可见，本专利技术的优点在于一、PHI首次被证明它是去乙酰化酶抑制剂。其可通过抑制去乙酰化酶及调节组蛋白甲基化来调控组蛋白，从而实现对基因表达进行调控。HDACI是目前国内外肿瘤治疗的研究又一热点。二、PHI首次被研究于人类白血病及淋巴系恶性肿瘤细胞，并证实对可诱导该细胞凋亡及细胞周期的抑制。三、本研究还证明PHI可增强HL60细胞的P21基因的表达，并从蛋白水平和基因水平证明了该结论。四、首次在动物试验证明PHI可抑制HL60细胞负荷裸鼠的肿瘤细胞。首次在动物体内试验得到证实。五、本研究首次证明PHI对正常细胞无明显影响，只作用于肿瘤细胞。因此，其有希望通过进一步的研究以开发出新型的有效、低毒的治疗白血病药物。权利要求1.异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。全文摘要本专利技术涉及异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。该物质是去乙酰化酶抑制剂，可通过抑制去乙酰化酶及调节组蛋白甲基化来调控组蛋白，从而实现对基因表达进行调控；并且，该物质可诱导细胞凋亡及细胞周期的抑制；其对正常细胞无明显影响，只作用于肿瘤细胞。因此，该物质可制成有效、低毒的治疗白血病药物。文档编号A61P35/02GK1961873SQ200510101390公开日2007年5月16日 申请日期2005年11月11日 优先权日2005年11月11日专利技术者马旭东 申请人:马旭东本文档来自技高网...
【技术保护点】
异硫氰酸苯己酯在制备治疗白血病药剂中的应用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：马旭东，
申请(专利权)人：马旭东，
类型：发明
国别省市：35[中国|福建]
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