豨莶二萜提取物、其制备方法及在制药中的应用技术

本发明专利技术提供了一种豨莶二萜部位提取物，其特征在于该提取物中二萜类化合物含量至少为４０％，其中奇任醇的含量至少为７％，并提供了该提取物的制备方法及其在制备治疗风湿、类风湿性疾病的药物中的应用。本发明专利技术的提取物具有含量高，药效好，剂量小的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药提取物及其提取方法，更具体地说涉及一种豨莶二萜提取物及其制备方法，以及在预防和治疗风湿性、类风湿性疾病中的应用。
技术介绍
豨莶为菊科(Compositae)豨莶属(Siegesbeckia)一年生草本植物，广布于热带和温带地区，全世界共有五种豨莶腺梗豨莶(Siegesbeckia ubescens)，豨莶(S.orientalis)，毛梗豨莶(Sglabrescens)，胶豨莶(S.gummifer)，角豨莶(S.joullensis)。我国有前三种，都供药用。中国药典规定，中药豨莶为前三种原植物的干燥地上部分。豨莶味苦性温、寒，入肝、脾、肾三经；主要功效为(1)祛风湿、利筋骨，治风湿顽痹，腰膝酸楚，头风剧痛；(2)消炎止痛，可治烧伤、烫伤、蚁虫牲畜咬伤；(3)燥湿止泄，治妇女白带，外感伤风热泄。现代药理实验表明，豨莶的提取物具有舒张血管、降压、抗癌、抗生育、镇痛、抗菌消炎、抗疟、抗氧化、抑制免疫功能等活性，尤其对于风湿类风湿性疾病有很好的治疗作用。其主要有效成分为海松烯型和贝壳杉烷型二萜化合物。目前，对于中药豨莶的利用，只是用水或有机溶剂提取得到的提取物直接入药，如豨莶丸，由于没有经过精制工序，提取物中二萜有效成分的含量较低，约15％左右，因而在临床上服用剂量较高，豨莶丸的服用剂量为9g/天，相当于豨莶提取物3g/天，给患者的服用带来不便。此外对于有效成分二萜没有进行质量控制，因而对于其治疗作用没有好的保障。风湿类风湿性关节炎是一种不明原因的慢性全身性免疫反应性炎症性疾病，免疫反应多发生于关节滑膜，为最常见的结缔组织疾病。目前该类疾病的治疗药物有乙酰水杨酸、消炎痛、保泰松、氯灭酸、糖皮质激素、金制剂、免疫抑制剂等，这些药物虽然有一定的治疗效果，但不良反应较大。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术中的二萜含量低从而带来的药理作用弱，服用剂量大，以及对于有效成分二萜没有明确的控制标准等技术缺陷，提供一种高含量的且有明确控制标准的豨莶二萜部位提取物。本专利技术提供了一种豨莶二萜部位提取物，其中含有二萜类化合物不少于40％，同时奇任醇含量不少于7％；优选总二萜类化合物含量为40-90％，奇任醇的含量为7-30％；最优选二萜类化合物50-70％，奇任醇的的含量为12-20％。本专利技术的豨莶二萜部位提取物可以通过萃取、柱层析等易于工业化生产的技术而得，该提取物提高了现有记载的豨莶提取物总二萜类化合物的含量，现有以豨莶提取物为原料的药物豨莶丸中的二萜含量为15％左右。本专利技术还提供了一种含量较高二萜类化合物的豨莶二萜部位提取物的制备方法，包括以下步骤 1)提取用低级醇或丙酮或两者的混合溶液或含水的上述有机溶剂提取，并加热回流；2)浓缩或干燥减压回收提取液，冷却，过滤或离心得上清液，浓缩或干燥，得提取物；3)精制将提取物溶于含甲醇的水中，用低级烷烃、苯或甲苯中的任一种萃取，水层用乙酸乙酯、氯仿、乙醚中的任一种萃取，浓缩或干燥萃取液，得豨莶二萜部位提取物。其中所述的步骤1)中低级醇为甲醇、乙醇、丙醇，加热回流的温度为70-100℃，水的含量为10％-25％；步骤2)中减压回收至原来的1/4体积，冷却温度为0-4℃；步骤3)中所述的甲醇的含量为10-25％，低级烷烃为碳原子数为1至6的烷烃，优选石油醚，水层萃取溶剂优选乙酸乙酯。本专利技术还提供了另一种制备方法，包括以下步骤1)提取用低级醇或丙酮或两者的混合溶液或含水的上述有机溶剂提取，并加热回流；2)缩或干燥减压回收提取液，冷却，过滤或离心得上清液，浓缩或干燥，得提取物；3)精制浓缩物加入大孔吸附树脂后，先用低浓度的醇溶液洗脱除杂质，再用高浓度的醇溶液洗脱，收集洗脱收集洗脱液，浓缩或干燥，得豨莶二萜部位提取物。其中所述的步骤1)中低级醇为甲醇、乙醇、丙醇，加热回流的温度为70-100℃，水的含量为10％-25％；步骤2)中减压回收至原来的1/4体积，冷却温度为0-4℃；步骤3)中所述其特征是所述的低浓度为10-20％，高浓度为50-70％。在本专利技术中的低温冷却过程是很重要的，它可以除去提取液中的大量叶绿素以及低级性杂质，不仅可以提高豨莶提取物中二萜的含量，此外还可以使后面的纯化操作更方便。其冷却温度的选择也很有讲究，太高会使叶绿素以及低急性杂质没有充分沉降，影响二萜的含量；太低会使有效成分二萜也沉降出，损失有效成分。本专利技术在提炼步骤中以含醇的水和烷烃为两相的萃取技术，可以起到脱色除杂的目的，而且避免了二萜在萃取过程中的损失。使用大孔树脂吸附层析纯化技术可以使豨莶二萜部位提取物得到进一步的纯化。本专利技术豨莶总二萜类化合物的具体提取方法为(1)将豨莶药材粉碎(约20目)，用低级醇、丙酮或含水的低级醇、丙酮回流提取，其中优选70-95％的乙醇水溶液，最优选75％的乙醇水溶液，容积加入量为药材的8-10倍量，其中优选8倍量，回流提取1-4小时，其中优选2小时，过滤，药渣按上述条件重复提取两次，合并提取液，回收至1/4体积，低温放置12小时，过滤(或离心)，上清液回收减压浓缩或喷雾干燥。将干燥所得的提取物溶于10％的甲醇溶液，所用溶液的体积为提取物的2-5倍，其中优选3倍，用石油醚(或环己烷、正己烷，其中优选石油醚)萃取脱色除杂，其中萃取溶剂的体积为甲醇水溶液的0.2-1倍量，其中优选0.3倍，萃取5-6次，然后用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯的体积为甲醇水溶液的0.2-1倍量，其中优选0.3倍，萃取5-6次，得到的萃取液即为本专利技术的豨莶二萜部位提取物，干燥后得到本专利技术的固体提取物。不同批次的产品以奇任醇为标准品用分光光度法测定，含量为43-55％。在萃取过程中，如果采用非甲醇的醇类进行精制(如乙醇、丙酮等)，在用石油醚(或环己烷、正己烷，其中优选石油醚)进行萃取时，石油醚和含醇的水溶液有部分互溶，影响萃取的效果，从而最终提取物的含量，而很难达到本专利技术说所的二萜不少40％同时奇工任醇不少7％的含量。同理，选用乙酸乙酯也是为了保证提取物的含量而挑选的最佳的一个溶剂，虽然有些溶剂如氯仿、乙醚也有使精制的效果，但均会使二萜萃取不充分，降低二萜的含量以及得率，同时提取物是作为药品使用的，所以这些有机溶剂不适宜于采用。(2)将豨莶药材粉碎(约20目)，用低级醇、丙酮或含水的低级醇、丙酮回流提取，其中优选70-95％的乙醇水溶液，最优选75％的乙醇水溶液，容积加入量为药材的8-10倍量，其中优选8倍量，回流提取1-4小时，其中优选2小时，过滤，药渣按上述条件重复提取两次，合并提取液，回收至1/4体积，低温放置12小时，过滤(或离心)，上青液回收减压原体积的1/3。上述提取液可以直接用于大孔树脂柱层析，层析填料可以选用大孔吸附树脂如D001或D101树脂，其中优选D101大孔吸附树脂，将提取液加入树脂柱后，先用10％低级醇或丙酮水溶液洗脱除去杂质，其中优选10％的乙醇水溶液洗脱，洗脱溶液量为保留体积的3倍左右，该洗脱部分弃去不要，再用70％低级醇或丙酮水溶液洗脱，其中优选70％乙醇水溶液收集洗脱液，洗脱溶液量为保留体积的3-5倍，合并洗脱液减压浓缩或喷雾干燥既得豨莶二萜部位提取物。不同批次的产品以奇壬醇为标准品用分光光度法测定，含量为55-73％。本专利技术提供的制备方法得到的豨莶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种豨莶二萜部位提取物，其特征在于该提取物中二萜类化合物含量至少为４０％，其中奇任醇的含量至少为７％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金耀，章小永，
申请(专利权)人：杭州耀恒医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]