含有松驰素基因的基因送递系统和使用松驰素的药物组合物技术方案

本发明专利技术涉及一种新的基因送递系统和包括松弛素编码序列以增强转基因的转导效率的重组腺病毒，一种包括所述重组腺病毒的抗肿瘤药物组合物，一种具有改善的组织穿透效力的药物组合物和一种用于治疗与过量的细胞外基质累积相关的疾病或病症的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种新的基因送递系统和重组腺病毒，具体而言，本专利技术涉及一种新的基因送递系统和包括松弛素编码序列的重组腺病毒、一种包括该重组腺病毒的药学抗肿瘤组合物、一种特征为改善组织穿透能力的药物组合物和一种用于治疗与过量细胞外基质累积相关的疾病或病症的药物组合物。
技术介绍
基因治疗旨在通过将外源基因引入细胞或组织治疗病理状况。对于如镰形细胞贫血、α1抗胰蛋白酶缺乏、苯丙酮尿症、血友病和囊性纤维化的遗传性疾病，基因治疗的目的是为了使细胞或组织发挥正常功能，置换缺失或缺陷基因。此外，基因治疗用于除去异常细胞。通过送递能够引起靶异常细胞死亡的基因，基因治疗允许治疗如癌症、发炎和自身免疫疾病的多种疾病。虽然基因治疗有前途，但是向细胞或组织无效的基因送递是发展成功的基因治疗的主要障碍。例如，许多使用反转录病毒、腺病毒或腺伴随病毒(adeno-associated viruses，AAV)的基因送递的研究已表明当用于个体或组织(例如，肿瘤组织)时，基因送递效率不足阻碍了基因治疗的应用。因此，表现改善的基因送递效率的新的基因送递策略对于实现成功的基因治疗仍是必需的。早期基于腺病毒的基因治疗通常使用缺失对于腺病毒复制必需的E1基因的携带治疗基因的复制缺陷型腺病毒。然而，这些重组腺病毒仅在受感染细胞和很少量的周围细胞中诱导抗肿瘤活性，在临床应用中表现出严重的问题。为了克服此类问题，已开发在肿瘤细胞中选择性复制的溶瘤腺病毒，ONYX-015(dl1520)。缺失E1B 55kDa基因的腺病毒在缺乏功能性p53的肿瘤细胞中选择性复制。当重组腺病毒感染正常细胞时，因为没有诱导p53失活，所以其增殖受到抑制，导致溶瘤作用失败，而其在具有失活的p53的肿瘤细胞中活跃地增殖并最终引起肿瘤细胞的选择性死亡(Chang，F.，等，J Clin Oncol 131009-22(1995))。根据脑癌的II/III期临床试验的最近报道，肿瘤特异的溶瘤腺病毒表现出可观的治疗效能(Kirn，D.，等，Nat Med 41341-2(1998)；Nemunaitis，J.等，Cancer Res 606359-66(2000)；和Ganly，I.等，ClinCancer Res 6798-806(2000))。虽然施用重组腺病毒诱导肿瘤生长的部分抑制作用，没有发现肿瘤完全根除，且经过一段时间后快速发生肿瘤的再生长。这些结果可能是因为局部注射到肿瘤的重组腺病毒在有限的周围部分扩散以引起限制性的抗肿瘤活性，以使没有感染病毒的肿瘤细胞快速生长。根据最近的研究报道，施用到裸鼠中的人肿瘤中的重组腺病毒在晚至最初的病毒注射后100天持续复制并不保证完全根除肿瘤，但是从肿瘤组织可获得有活力病毒(Sauthoff，H.等，HumanGene Therapy14425-433(2003))。因此，可以理解理想的肿瘤特异溶瘤腺病毒具有诱导更大的溶瘤活性和在遍布肿瘤组织扩散以及感染周围肿瘤细胞的能力。贯穿本申请，参考了若干专利和出版物并在括号中提供引证。为了更全面地描述本专利技术和本专利技术涉及的本领域的状况，将这些专利和出版物的公开引入本专利技术。
技术实现思路
本专利技术已进行深入研究以改善基因送递系统的转导效率，具体而言，以增强组织中基因送递系统的转导(或扩散)效率，结果，发现松弛素可以显著地改善基因送递系统的转导效率。因此，本专利技术的一个目的是提供一种具有改善的转导效率的基因送递系统。本专利技术的另一目的是提供一种向细胞中递送具有改善的转导效率的基因的方法。本专利技术的又一目的是提供一种具有改善的肿瘤组织穿透性和肿瘤特异性凋亡能力的重组腺病毒。本专利技术的另一目的是提供一种用于治疗癌症的抗肿瘤药物组合物。本专利技术的又一目的是提供一种通过使用所述抗肿瘤药物组合物治疗癌症的方法。本专利技术的另一目的是提供一种用于改善药物进入组织的穿透能力的药物组合物。本专利技术又另一目的是提供一种用于治疗与过量细胞外基质累积相关的疾病或病症的药物组合物。结合所附的权利要求书和附图，从以下详细描述中，本专利技术的其他目的和优点将变得清楚明了。在本专利技术的一个技术方案中，提供一种包括待递送到细胞中的目的核苷酸序列的基因送递系统，其改善包含编码松弛素的核苷酸序列以增强目的所述核苷酸序列进入细胞的转导效率。本专利技术人已进行深入研究以改善基因送递系统的转导效率，具体而言，以增强组织中的基因送递系统的转导(或扩散)效率。此类研究基于我们的通过促进降解合成的或抑制细胞外基质组分的合成降低细胞外基质组分的水平可增强组织内基因送递系统的扩散的假设。令人惊奇地，本专利技术人已发现松弛素可以显著地提高基因送递系统的转导效率。在此所用的术语“松弛素”包含实施例中示出和举例说明的松弛素以其任意同源物以提高为本专利技术目的的转导效率。在本专利技术中作为提高转导效率的增强子起关键作用的松弛素是6kDa的肽激素，与胰岛素和胰岛素样生长因子(insulin-like growthfactors，IGFs)结构相关。其主要在黄体和子宫内膜中产生并且其血清水平在怀孕期间大大提高(Sherwood，O.D.等，Dynamic changes ofmultiple forms of serum immunoactive relaxin during pregnancy in the rat.Endocrinology 114806-13(1984))。虽然基于报道松弛素仅在怀孕期间的性器官有活性的早期研究，最初将松弛素分类为“怀孕激素”，但是因为在除性器官外的其它器官和组织中发现其活性，所以最近认为其为“万能激素”(Hisaw，F.L.，等，Effects of relaxin on the endotheliumof endometrial blood vessels in monkeys(Macaca mulatta).Endocrinology81375-85(1967))。已知松弛素有助于胎盘和子宫的生长和再生并在分娩期间松弛子宫颈以加宽产道。其促进产道组织中如MMP2、MMP3和MMP9的多种MMP的表达以降解胶原，以使结缔组织和基底膜降解以导致产道的细胞外基质破坏。除此之外，在松弛素作为抑制剂起作用以防止胶原过表达的肺、心脏、皮肤、肠道、乳腺、血管和精管中也观察到由松弛素促进的MMP1和MMP3的表达(Qin，X.，等，Biol Reprod 56800-11(1997)；Qin，X.，等，Biol Reprod 56812-20(1997)；和Palejwala，S.等，Endocrinology 1423405-13(2001))。根据本专利技术的基因送递系统，表达的松弛素蛋白质诱导细胞外基质周围细胞的主要组分胶原的降解，以破坏结缔组织和基底膜，因此导致细胞外基质的降解。这种连续作用是在下述实施例中清楚地证实的通过松弛素提高转导效率的一种机制。因此，参考松弛素的上述作用，本基因送递系统的优点集中在包括通过细胞外基质互相连接的细胞的组织内的细胞。具体而言，当用于由结缔组织紧密包围的肿瘤组织，与任何常规送递系统相比，本基因送递系统表现出提高的转导效率。在此所用的术语“基因送递”是指将基因转移到细胞中并与基因转导具有相同的含义。在组织水平，基因送递与基因扩散成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包括待投送到细胞中的目的核苷酸序列的基因送递系统，其特征在于，包括增强目的核苷酸序列进入细胞的转导效率的编码松弛素的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹彩钰，金周恒，
申请(专利权)人：延世大学工业教产学协力团，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]