用于恶性肿瘤治疗的免疫调节制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种用于恶性肿瘤治疗的免疫调节制剂，属于生物制剂技术领域，所述的制剂每毫升含有５～３０μｇ的白介素１２、１０～３０亿单位的绿脓杆菌菌苗制剂和余量的水溶液。本发明专利技术的免疫调节制剂能十分明显的成倍提高外周血单个核细胞产生ＩＦＮ－γ的水平，并具有明显的抑瘤作用，用于临床恶性肿瘤的辅助治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物制剂，特别是指一种用于恶性肿瘤治疗的免疫调节制剂。
技术介绍
恶性肿瘤是常见病、多发病，是严重威胁人类健康的主要疾病之一。恶性肿瘤的早期发现，早期治疗是取得良好治疗效果的重要因素，但是由于肿瘤发病过程隐匿，早期有时缺乏相应的症状和体征。加之许多人群缺乏定期体检，故相当多的患者发现时已非早期，这样就为治疗带来许多困难。目前肿瘤的主要治疗手段仍然是手术疗法、化学疗法和放射疗法。但对中、晚期患者上述疗法往往达不到根治肿瘤的目的，因为体内尚存在肿瘤的残留病灶，而这些病灶就是肿瘤局部复发和远处转移的根源，因此在手术疗法、化学疗法或放射疗法前后，施行免疫调节治疗对肿瘤的根治或对存在的残留肿瘤病灶进行彻底清除是提高治愈率防止复发和转移的重要手段。此时调动机体的免疫功能，提高机体的自身的抗瘤能力是十分重要的。因此肿瘤的免疫调节疗法越来越受到人们的重视。虽然肿瘤的病因尚未完全确定，但其发生原因是多因素的。其中机体免疫监视功能下降或失调，免疫应答能力的下降在相当多的患者是存在的。临床检查表明癌症患者的各项免疫指标多偏于低下或处于不正常状态，因此使用恰当而有效的免疫调节剂，提高机体的体液及细胞免疫，活化杀伤肿瘤靶细胞的能力，则有利于癌症患者预后。故以免疫治疗为基础而发展起来的生物免疫疗法在肿瘤的临床治疗中的作用逐渐被广泛重视。生物免疫疗法主要是通过调节和增强机体的特异性和非特异性免疫，增强机体的抗癌能力抑制癌细胞的增殖进而杀伤癌细胞使其消亡，这已成为提高癌症患者治愈率或延长肿瘤患者的存活时间重要手段之一。但目前肿瘤临床上确实有效的免疫调节制剂十分少见，故开发和研制新的肿瘤免疫调节制剂十分需要。肿瘤免疫调节制剂一方面作为一种肿瘤的辅助治疗手段杀灭体内残留的肿瘤细胞，另一方面通过提高机体的特异性和非特异免疫功能预防肿瘤的复发和转移也有重要的价值。rhIL-12是在免疫网络中占有核心位置的重要细胞因子。IL-12的主要产生者是对微生物刺激应答的单核/巨噬细胞，抗原提呈细胞(APC)、B细胞、嗜中性粒细胞和角质细胞。IL-12是由35kd的轻链(P35，IL-12α)和40kd的重链(P40，IL-12β)组成的不同基因编码的两条链的异源二聚体，由多个二硫键连接，相对分子量为70～75kd，等电点介于pH3.5～pH5.5。由于两个亚单位是由不同的基因编码，基因转染试验结果表明，只有将两个亚单位同时转染才能获得具有生物活性的IL-12，二个亚单位单独存在时无生物学活性。IL-12的生物学活性具有专一性，必须由高亲和力的受体来介导。IL-12R由β1和β2链构成，IL-12与单独的β1或β2链的亲合较弱，只有β1和β2共表达才能形成与IL-12具有高亲和力的受体复合物。IL-12是在免疫网络中占有十分重要地位的核心细胞因子，能使活化的T细胞增殖并增加其细胞毒活性，诱导IFN-γ的分泌，调节Th1/Th2细胞发育，促使其向Th1细胞分化。IL-12是诱生CTL免疫应答的最佳细胞因子启动细胞介导的免疫反应。不但能活化先天性免疫细胞，促进APC功能，促进其成熟，提高抗原提呈效率。还可作为第3信号直接活化初始T细胞，使其转变为效应性T细胞。已经证明效应性和记忆性CD8+T细胞在缺乏同源抗原刺激下，IL-12、IL-18可促使其具有分泌IFN-γ的能力。IL-12还是维持记忆性CD4+T细胞的一种候选因子。提示IL-12在促进记忆性细胞激活过程中起作用。特别值得指出IL-12不但协同IL-18促进NK细胞的增殖活化NK细胞产生细胞毒作用，诱生NK细胞产生IFN-γ，而且IL-12对NKT的活化及随后的IFN-γ分泌至关重要，NKT细胞表达丰富的IL-12受体复合物，成为IL-12作用的首要目标。NKT对自身配体的微弱反应被IL-12放大，从而启动免疫应答，可见IL-12在启动固有免疫应答在清除恶性肿瘤细胞中的重要作用。IL-12的生物效应是其抗肿瘤、抑制肿瘤生长和转移的基础。其主要的生物学效应为调节Th1/Th2应答，诱导早期的Th0细胞分化为Th1细胞，诱导其发育和增殖，增强T细胞的杀伤功能、IL-12作为第3信号在初始CD8+T细胞可以进行增殖分化，但抗原水平较低时，第3信号的作用是非常重要的，IL-12作为第3信号存在与否，在不同程度上决定了初始T细胞能否进一步分化，是否产生免疫应答。IL-12刺激CD4+记忆性细胞的分泌和维持起重要作用。Schluns等认为IL-12可能是维持记忆性CD4+细胞的一种候选因子。IL-12协同IL-18促进记忆性T细胞活化，促进NK细胞的增殖，活化NK细胞产生细胞毒作用，诱生NK细胞产生IFN-γ，增强NK/LAK细胞溶解活性。大量动物实验表明rhIL-12不仅能抑制肿瘤的生长，阻抑肿瘤的播散和转移，导致荷瘤动物生存时间的延长，还能诱导已形成的瘤结节消失，并对同种肿瘤的再次侵袭，具有保护性免疫反应。IL-12不仅可抑制新生肿瘤的生长，而且可以使已存在的肿瘤消退。Brunda等发现全身应用IL-12能显著减少小鼠肿瘤肺转移的数目并抑制皮下实体瘤的生长，局部注射IL-12效果更好，甚至能使皮下肿瘤消退。另外，鼠静脉注射B16F10黑色素瘤后，用IL-12腹腔内注射使肺转移明显减少，即使在注射瘤细胞7天后开始治疗也获得相似效果。同样IL-12治疗减少了实验性M5076网状细胞肉瘤和Renca的肾细胞癌肝转移的数目。延长了动物的寿命。应用rhIL-12治疗恶性肿瘤的临床试验在国外已有10项以上，正在招募志愿者或进行临床I期、II期临床观察。主要选择的恶性肿瘤包括进展期难治性实体瘤、继发于结肠直肠癌的肝转移、乳腺癌波及肝脏，放疗后的前列腺癌，癌内注射rhIL-12治疗恶性黑色素瘤、复发性卵巢癌。转移性的恶黑，晚期复发的直肠癌，晚期宫颈癌及恶性淋巴瘤等。治疗大致可分为单独使用rhIL-12或rhIL-12与其他细胞因子和抗肿瘤单抗联合应用。给药的途径包括静脉给药、腹腔给药、肿瘤局部注射和皮下注射。剂量100～1000ng/kg，病人最大耐受剂量(MTD)为1000～1500ng/kg。剂量及疗程及在不同的肿瘤、不同给药途径，并不一致。产生最佳的临床效果的rhIL-12的剂量及疗程，尚未完全确定。在治疗过程中应重点监测血细胞分类计数和血小板计数和骨髓活组织检查或抽吸骨髓检查。此外还包括外周血淋巴细胞和细胞亚型检测、血清抗血管生成因子、血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞因子(bFGF)、血清IFN-γ、IL-15、IL-18水平。肿瘤治疗反应一般在治疗后第8周进行评估，此后每2～3月评估一次。rhIL-12作为单一的治疗药物，从已经进行的多种肿瘤的临床观察，结果显示针对不同的肿瘤表现出不同的疗效。rhIL-12治疗肾细胞癌和恶性黑色素瘤的I期临床观察显示出令人兴奋的效果。应用后具有良好的耐受性和比其他细胞因子更强的抗肿瘤活性，表明rhIL-12能够重建晚期肿瘤病人的细胞免疫功能，对晚期肿瘤显示了治疗的潜力，证实rhIL-12确能诱导细胞免疫功能促进有关细胞因子的分泌，导致肿瘤的消退，Motzer等观察rhIL-12治疗晚期肾细胞癌51例，治疗结束后1例病人完全缓解，34例本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于恶性肿瘤治疗的免疫调节制剂，其特征是每毫升制剂中含有５～３０μｇ的重组人白介素１２、１０～３０亿单位的绿脓杆菌菌苗制剂和余量的水溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张宜俊，邱向南，万华印，曾振飞，杨联勇，赵峰，叶倩君，李悦琳，于源，吴思纹，王增松，杨愈丰，
申请(专利权)人：广州市恺泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]