膜联蛋白V用于预防动脉血栓和斑块破裂制造技术

动脉粥样硬化可被看作是对损伤的反应，并且动脉粥样硬化本身并不严重，而一些导致动脉粥样斑块破裂的因子导致严重后果。在本发明专利技术中，我们鉴定出了这样的因子。在有动脉粥样血栓形成病史的患者中发现膜联蛋白Ｖ与内皮的结合降低。本发明专利技术提出，用天然的膜联蛋白Ｖ或Ｎ端片段活性成分或者免疫球蛋白的亚组份制备药物组合物来改善上述结合。膜联蛋白Ｖ，Ｎ端片段或免疫球蛋白用于增加膜联蛋白Ｖ与颈动脉斑块的结合的用途，体现了预防动脉粥样血栓形成的新机制。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及动脉粥样硬化(atherosclerosis)和动脉血栓(atherothrombosis)。本专利技术涉及一种新的预防或抑制动脉血栓及斑块破裂(plaque rupture)的机制。
技术介绍
动脉粥样硬化与动脉血栓有关。动脉粥样硬化具有炎性疾病的许多特点，包括在损伤部位存在大量的炎性细胞并生成促炎细胞因子1，2。心血管疾病，特别是系统性红斑狼疮(SLE)患者的心血管疾病，主要的临床问题是致死风险增加。系统性红斑狼疮患者的心血管疾病既与传统风险因子有关，如血脂异常(dyslipidemia)，也与非传统风险因子有关，包括低密度脂蛋白(oxLDL)氧化的增加，肿瘤坏死因子系统(TNF，与血脂异常密切相关)中的活性的增加，由CRP、同型半胱氨酸和抗磷脂抗体(aPL)等指标确定的全身炎症反应3-7。抗磷脂可能导致抗磷脂抗体综合征(APS)，在SLE患者中常见，表现为习惯性流产和反复发生的血栓(thrombosis)8，9。在一般人群的心血管疾病中也发现了不同形式的抗磷脂反应10，11。众多膜联蛋白(Annexin)都可以与钙及带负电的磷脂结合，后两者都是凝血过程必需的成分。近来在APS中发现了膜联蛋白V，因为一些aPL破坏了胎盘中的膜联蛋白-V抗栓屏障(antithrombotic shield)，由此引起胎盘微栓塞和习惯性流产12-14。膜联蛋白-V与激活的血小板以及与损伤的细胞相结合或许能解释该蛋白在血栓中的选择性滞留现象。在动脉和静脉血栓的实验动物模型中有这种表现15，由此提出将标记的膜联蛋白用于人血管栓塞的医学影像检测可以减少噪声并增加安全性16。膜联蛋白V在凝血障碍中的治疗性应用遇到的一个主要问题是其在循环中半衰期短，用实验动物估算值为5-15分钟15，17；膜联蛋白V在人体的循环半衰期短。在EP1379266“修饰的膜联蛋白及预防血栓的方法”中，要求保护经过聚乙二醇修饰的膜联蛋白，用于预防血栓形成而不增加出血。在一项预防血栓形成所必须的凝血酶原复合物结合的方法中，用PEG交联法使膜联蛋白V的半衰期延长。在本专利技术中，我们发现，膜联蛋白V可以稳定动脉粥样硬化的斑块。施用(优选静脉注射)本专利技术的膜联蛋白V或膜联蛋白V的N端片段时，它在首次通过时与内皮斑块结合。EP1379266所述的膜联蛋白V在循环中半衰期短的情况就不成问题了。含有膜联蛋白V或膜联蛋白VN端片段并含有或不含添加成分的注射用组合物因与斑块直接结合，稳定颈动脉帽，从而防止血栓形成。免疫球蛋白G或IgG是成人体内的一类蛋白，正常浓度在900mg/dl到2400mg/dl之间。大约占血清或血浆总蛋白的20％。IgG的半衰期为23天，它提供对细菌，病毒，寄生虫及一些真菌的免疫力，在组织中发挥抗体作用。IgG能激活补体，进而触发炎症反应，并作用于自身。IgG对多种病毒有防御作用，动物通过免疫接种或农场内自然接触病原体可以获得。一旦接触过病原体会产生免疫记忆，让机体能够迅速产生所需的抗体对抗特定的感染。人类的IgG通过胎盘传递给胎儿。哺乳动物如果没有IgG或IgG量少，对所接触的感染原的抵抗力就会差。静脉注射用免疫球蛋白制剂(如IGIV；Baxter及其他制剂)，是高度纯化的商品化IgG，用于治疗那些无抗体产生，或抗体产生水平非常低的患者。免疫球蛋白制剂现有下列生产厂商Baxter(美国)eg Gammagard，Isiven(Antimo Naples，意大利)，Omrix(Tel-Hashomer，以色列)，Miles(BiologicalProducts Division，West Heaven，CT)，Sclavo(Lucca，意大利)，Sandoz(Novartis，Basel，瑞士 eg Sandoglobulin)，Biotest Diagnostic Corporation(Deville，NJ)。免疫球蛋白制剂类产品有Gamrnagard S/D，Gammar IV，Gammar-P IV，Gammimune N，Iveegam，Panglobulin，Polygam S/D，Sandoglobulin，Venoglobulin。免疫球蛋白制剂一般含有IgG和一些IgM。Gammagard中有痕量的IgM。Pentaglobin(Biotest)是富含IgM的制剂，用于治疗SARS。这种从众多捐献者血浆中汇集的静脉注射用免疫球蛋白制剂(IvIg)也常用于自身免疫病，其已知作用机制之一是存在抗独特型抗体，即，与其他致病性抗体反应并中和它们的抗体。US6613328中描述了一种方法，用von Willebrand因子的特异性抗体治疗血栓疾病。其中具体制备了人源化抗体。但是没有查到关于目前容易得到的免疫球蛋白，如IGIV，或其它免疫球蛋白亚组分能够用于预防动脉血栓或斑块破裂的信息。此外，在文献中没有查到IgG能抑制抗体与天然(native)膜联蛋白V结合，而这有可能是膜联蛋白V与内皮结合减少的原因，此观点在本专利技术中提出。专利技术概览本专利技术提供了通过给药能恢复膜联蛋白V与斑块的结合的化合物来预防动脉血栓和斑块破裂以及治疗动脉血栓并发症的新方法，所述化合物可通过抑制那些阻止上述结合的免疫球蛋白来实现恢复。该治疗通过给予膜联蛋白V或N端片段药物(优选通过静脉注射给药)来实现；或通过静脉给予能促进膜联蛋白V与斑块结合(可以是通过抑制膜联蛋白V与抗体结合来促进膜联蛋白V与斑块结合)的免疫球蛋白或免疫球蛋白亚组分来实现。本领域已知能治疗或预防感染和严重自身免疫病的免疫球蛋白(IGIV；Baxter)或其他商品制剂(产品举例见前文)以及亲和纯化的亚组分都可以使用。亲和纯化的免疫球蛋白亚组分更优选。本专利技术所述方法中，活性成分(膜联蛋白V，膜联蛋白V的N端片段，或免疫球蛋白亚组分)以具有有效量的该活性成分的药物组合物的形式，给予有动脉血栓风险的受试者。药物组合物可通过静脉给药或者通过其他途径给药，作为风险组患者的治疗措施之一。更优选风险组是SLE患者组。另一个风险组患有或曾经罹患(或有相应风险)能引起抗磷脂相关抗体水平增加的上呼吸道感染或其他感染(包括肺炎球菌感染)。所述治疗按最佳时间间隔重复多次。专利技术详述当抗体抑制膜联蛋白V-斑块结合，导致膜联蛋白V与内皮结合下降，这时动脉血栓和板块破裂风险明显增加。通过给予膜联蛋白V(或片段)来恢复膜联蛋白V的结合，或者通过给予能抑制其他降低斑块-膜联蛋白结合的抗体(即膜联蛋白V-结合抗体)的免疫球蛋白，优选免疫球蛋白亚组分(如上文提到的免疫球蛋白汇集物制剂的亚组分)来恢复膜联蛋白V的结合，这为治疗动脉血栓，特别是斑块破裂-这一心血管疾病的主要原因，提供了新方法。本专利技术一方面提供膜联蛋白V蛋白或膜联蛋白V的N端片段(非必需含盐)用于制备预防动脉血栓和/或斑块破裂的药物组合物的用途。术语膜联蛋白V为本领域技术人员熟知并常用在，例如，上述引用文献中，例如，EP1379266。对本领域技术人员来说，显然膜联蛋白V的N端片段已经大得足以被本领域技术人员认为是膜联蛋白V(而不是其它膜联蛋白)的片段。药物组合物可含有有效量的膜联蛋白V蛋白或膜联蛋白V的N端片段，非必需有载体和添加本文档来自技高网...

【技术保护点】
膜联蛋白Ｖ蛋白或膜联蛋白Ｖ的Ｎ端片段用于制备预防动脉血栓和／或斑块破裂的药物组合物的用途，所述膜联蛋白Ｖ蛋白或膜联蛋白Ｖ的Ｎ端片段可选是其盐形式。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：安娜锡德霍姆，约翰弗罗斯特加德，
申请(专利权)人：阿瑟拉生物技术公司，
类型：发明
国别省市：SE[瑞典]