肾茶抗泌尿系结石提取物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了肾茶抗泌尿系结石提取物及其制备方法，属于中草药的提取物与应用技术领域。该方法包括：（１）将肾茶与甲醇按重量∶体积１∶４～１０的比例，浸泡、提取、浓缩得浸膏混合物；（２）将浸膏混合物与溶解液按重量∶体积１∶１比例混合、溶解；（３）将溶解液先用石油醚萃取，再用乙酸乙酯萃取、浓缩后得到萃取物；（４）将萃取物层析、洗脱、收集并浓缩得肾茶提取物Ａ组分。属脂溶性黄酮甙元类化合物，具明显改善泌尿系结石症状、减少结石量、增加尿量、有助于结石排出及消炎等效果。可直接、复合或进一步分离提取，用于泌尿系抗结石、排石、利尿和消炎等的药物。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中草药的提取物与应用
，尤其涉及肾茶抗泌尿系结石提取物及其制备方法。
技术介绍
肾结石、膀胱结石、尿路结石等是泌尿系统的常见病，文献报道欧洲为5％～9％，加拿大为12％，美国为13％左右，我国发病率9％～15％左右，广东地区泌尿结石的发病率高达20％。发病随年龄增加，危险性也增大。气候较热的地区、嗜食动物蛋白人群，尤其是男性30～50岁的青、中年，发病率较高，男女之比为2～3∶1。近年的流行病学调查，其发病率呈上升趋势，尤其中青年增加更明显，严重影响了人们的健康。 目前泌尿系结石，尤其是肾结石治疗主要运用体外冲击波碎石术(ESWL)和腔内泌尿外科手术，常引起肾脏的损伤和严重的并发症，可使肾组织退行性病变，产生肾小球玻璃样变和纤维化，间质充血，炎症细胞浸润，且ESWL及手术治疗都难以根治肾结石，其术后复发率高约78％～80％。如何采用药物无创排除结石、并防止结石的形成和复发，是近代医学领域的重点研究课题。而我国的传统中医药资源为泌尿系药物排石、预防结石形成和复发开辟了广阔的前景。 肾茶为唇形科肾茶属Clerodendranthus植物肾茶C.spicatus(Thunb.)C.Y.Wu ex H.W. Li，又名猫须草。为多年生草本；茎直立，高0.5～1m，四棱形；叶对生，菱状卵形或卵状披针形，长3～10cm，宽1.5cm～5cm，叶缘具粗大牙齿，两面被毛，具腺点，叶柄长达1.2cm；轮伞花序4～8朵排成顶生总状花序，花唇形，花冠淡紫或白色，雄蕊4枚，2长2短，花丝超出花冠2～4cm；小坚果卵形，具皱纹；花果期5～10月。气淡，味微甘，稍苦。肾荼喜欢温暖湿润的气候，原产地年平均气温19.6～23.8℃，年降雨量1157.6～2103mm，生长适宜温度为26～30℃。 肾茶全世界约有五种，广泛分布于印度东部、泰国、印度尼西亚与澳大利亚等地。在印尼民间肾茶作为一种治疗糖尿病、高血压、风湿病、扁桃体炎、月经不调等的有效药物；在越南肾茶地上部分被用于治疗泌尿系结石、浮肿、急性发热、流感、肝炎和黄疸等；在缅甸肾茶被认为是一种抗糖尿病药，干叶的水煎剂用于治疗尿道和肾脏疾病；在日本冲绳，肾茶被称作爪哇茶可促进身体解毒。我国仅有一种即肾茶[C.spicatus(Thunb).C.Y.Wu ex H.W.Li]，主产于广西、广东、云南、福建、台湾等地。我国民间使用肾茶历史悠久，在西双版纳，傣医药名称“雅娜妙”。全草入药，认为有利尿、抗菌、消炎、溶石、排石等作用，常用于急、慢性肾炎、膀胱炎、尿路结石、咽炎及风湿性关节炎。从临床文献和民间用药跟踪调查，肾茶能预防和降低肾结石复发，促进尿路结石排出，改善病人的生活质量。 目前已从肾茶的地上部分提取出14个黄酮类化合物，12个黄酮苷元，2个为黄酮醇苷。8个酚酸类成分，即咖啡酸、咖啡酸的二聚体迷迭香酸、咖啡酸与酒石酸的缩合物caffeoyl tartrate及dicaffeoyl tartrate和四个咖啡酸四聚物。此外还有泽兰黄素、琥珀酸、苯甲酸、乳酸、胡萝卜苷、熊果酸、葡萄糖、戊糖、油脂、酒石酸、柠檬烯、龙脑、麝香草酚、消旋肌醇和一个香豆素等成分。 肾茶一直以来作为民间用药，用途广泛，其利尿、排石方面有显著的功效，受到人们的广泛关注，医药界也对其进行了一定的研究。泰国的Premgamone等对肾茶进行了长达18个月的临床研究表明肾茶治疗肾结石的效果优于枸橼酸钾钠。黄荣桂等临床研究证明肾茶对泌尿系感染、治疗尿路结石有较好疗效。近年来国内外对肾茶的化学成分及其生物活性的研究主要集中在抗肿瘤、抗菌消炎、利尿和补肾的作用表面上，而对其在泌尿系的利尿、排石、消炎等具体作用上究竟是什么活性化学成分起主导作用、其作用的机理是什么等了解甚少。为了加深肾茶在排泌尿系结石方面的开发应用，我们对肾茶与抗泌尿系结石有关的3种提取物的作用、作用机理作了深入的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的，是针对目前肾茶在抗泌尿系结石利用上存在不明其有效主导成份是什么及其作用机理的缺陷，在探明肾茶提取物中与泌尿系的结石、尿少、尿路感染和结石对脏器的损伤等症状有关物质的作用效果及其机理基础上，提出3种分别对泌尿系的抗结石、排石、利尿、消炎、抗氧化损伤等有效，可直接、复合或作为中间产品可进一步开发成药用产品的肾茶活性提取物；本专利技术的另一目的是提出这3种肾茶活性提取物的具体制备方法。 本专利技术目的通过以下技术方案来实现 (一)肾茶提取物A组分，可按以下方法制得 (1)将肾茶[C.spicatus(Thunb.)C.Y.Wu ex H.W.Li]干品粉碎后与甲醇按克重量∶毫升体积为1∶4～10的比例，浸泡3次，每次10天，合并、浓缩浸提液得浸膏混合物； (2)先将水与甲醇按1∶5～12体积比混配成溶解液，再将步骤(1)浸膏混合物与溶解液按克重量∶毫升体积为1∶1比例混合、搅拌至充分溶解； (3)将步骤(2)浸膏溶解液先用石油醚萃取4次，充分去除树脂、叶绿素等低极性的杂质成分后，再用乙酸乙酯萃取4次，合并、浓缩萃取物； (4)将步骤(3)萃取物进行硅胶柱层析、梯度洗脱、收集并浓缩得黑褐色粘稠状的肾茶提取物A组分。 肾茶提取物A组分，经过鉴定分析为脂溶性的黄酮甙元类化合物。 肾茶提取物A组分，具有明显改善结石症状，减少肾脏组织中钙和草酸的含量，减轻肾脏组织病变程度，减少结石量；增加肾结石者的尿量，尤其在0～4h时的作用点尿量增加较显著；增加膀胱平滑肌收缩幅度，加快节律，松驰输尿管、尿道平滑肌，有助于对泌尿系结石的排出；消炎；在一定程度上降低肾结石肾组织LPO含量，改善对肾组织的损伤等作用，可直接、复合或作为中间体进一步分离提取出药用有效活性成份，用于泌尿系抗结石、排石、利尿和消炎等的药物。 所述肾茶提取物A组分的制备方法，按以下步骤进行 (1)将肾茶[C.spicatus(Thunb.)C.Y.Wu ex H.W.Li]干品粉碎后与甲醇按克重量∶毫升体积为1∶4～10的比例，浸泡3次，每次10天，合并、浓缩浸提液得浸膏混合物； (2)先将水与甲醇按1∶5～12体积比混配成溶解液，再将步骤(1)浸膏混合物与溶解液按克重量∶毫升体积为1∶1比例混合、搅拌至充分溶解； (3)将步骤(2)浸膏溶解液先用石油醚萃取4次，充分去除树脂、叶绿素等低极性的杂质成分后，再用乙酸乙酯萃取4次，合并、浓缩萃取物； (4)将步骤(3)萃取物进行硅胶柱层析、梯度洗脱、收集并浓缩得肾茶提取物A组分产品。 (二)肾茶提取物B组分，可按以下方法制得 (1)将肾茶[C.spicatus(Thunb.)C.Y.Wu ex H.W.Li]干品粉碎后与甲醇按克重量∶毫升体积为1∶4～10的比例，共浸泡3次，每次10天，合并、浓缩浸提液得浸膏混合物； (2)先将水与甲醇按1∶5～12体积比混配成溶解液，再将步骤(1)浸膏混合物与溶解液按克重量∶毫升体积为1∶1比例混合、搅拌至充分溶解； (3)将步骤(2)浸膏溶解液先用石油醚和乙酸乙酯分别萃取3-5次，充分去除树脂、叶绿素等低极性的杂质和脂溶性成分后，再用正丁醇萃取4次，合并、浓缩萃取物； (4)将步骤(3)萃取物进行硅胶柱层析、梯度洗脱、收集本文档来自技高网...

【技术保护点】
肾茶提取物Ａ组分，其特征在于可按以下方法制得：（１）将肾茶［Ｃ．ｓｐｉｃａｔｕｓ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｃ．Ｙ．ＷｕｅｘＨ．Ｗ．Ｌｉ］干品粉碎后与甲醇按克重量：毫升体积为１∶４～１０的比例，浸泡３次，每次１０天，合并、浓缩浸提液得浸膏混合物；（２）先将水与甲醇按１∶５～１２体积比混配成溶解液，再将步骤（１）浸膏混合物与溶解液按克重量∶毫升体积为１∶１比例混合、搅拌至充分溶解；（３）将步骤（２）浸膏溶解液先用石油醚萃取４次，充分去除树脂、叶绿素低极性的杂质成分后，再用乙酸乙酯萃取４次、合并、浓缩萃取物；（４）将步骤（３）萃取物进行硅胶柱层析、梯度洗脱、收集并浓缩得黑褐色粘稠状的肾茶提取物Ａ组分。

【技术特征摘要】
1、肾茶提取物A组分，其特征在于可按以下方法制得(1)将肾茶[C.spicatus(Thunb.)C.Y.Wu ex H.W.Li]干品粉碎后与甲醇按克重量∶毫升体积为1∶4～10的比例，浸泡3次，每次10天，合并、浓缩浸提液得浸膏混合物；(2)先将水与甲醇按1∶5～12体积比混配成溶解液，再将步骤(1)浸膏混合物与溶解液按克重量∶毫升体积为1∶1比例混合、搅拌至充分溶解；(3)将步骤(2)浸膏溶解液先用石油醚萃取4次，充分去除树脂、叶绿素低极性的杂质成分后，再用乙酸乙酯萃取4次、合并、浓缩萃取物；(4)将步骤(3)萃取物进行硅胶柱层析、梯度洗脱、收集并浓缩得黑褐色粘稠状的肾茶提取物A组分。2、一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：陶正明，蔡华芳，顾雪萍，李林，
申请(专利权)人：浙江省亚热带作物研究所，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]