谷红注射液在制备治疗肺癌的药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于药物用途，具体公开了谷红注射液的新用途。通过大量的基础实验和临床试验的验证，确认谷红注射液在制备治疗肺癌药物方面的应用有良好前景。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药领域，具体地说涉及谷红注射液在制备治疗肺癌药物中的应用。
技术介绍
专利文献CN20040086213公开了将红花和乙酰谷酰胺按照特定比例进行组配， 进一步对红花提取制备红花提取液后与乙酰谷酰胺制得可用药物进行临床应用的 报导；CN20040086213文献中重点提到了该专利技术具有活血化瘀、改善脑代谢及脑功 能作用，可作为制备治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起 的昏迷、瘫痪及智力减退、记忆力障碍等疾病药物方面的应用；也可用于制备治疗 冠心病、脉管炎等疾病药物方面的应用。依据CN20040086213专利技术生产的谷红注射液，是阿尔贝拉医药(中国) 有限公司产品。谷红注射液为乙酰谷酰胺和红花提取物制成的灭菌水溶液。谷红注 射液用法用量为静脉滴注， 一次5-20m1.用5%或者10%葡萄糖注射液或0.9 0/o氯化钠注射液250 500ml稀释后应用， 一日一次.10-15天为一疗程。谷红注 射液的功能主治为用于治疗脑血管疾病和脑供血不足，脑血栓，脑栓塞及脑出血 恢复期肝病，神经外科手术等引起的意识功能低下，智力减退，记忆力障碍等.还 可以用于治疗冠心病，脉管炎等。谷红注射液已经成为了心脑血管系统疾病的常用 药物。但谷红注射液用于治疗肺癌药物的应用尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供依据专利文献CN20040086213制备的谷红注射液的新 用途。上迷的谷红注射液在制备治疗肺癌药物中的应用。上述的谷红注射液常规的用药方法和剂量是静脉滴注， 一次5ml-20ml，用 5%或10%葡萄糖注射液250ml - 500ml稀释后緩慢滴注， 一 日 一次，10 - 15天为一 疗程。谷红注射液临床上用于发挥活血化瘀、改善脑代谢及脑功能作用，可作为制备 治疗闭塞性脑血管疾病，肝昏迷、偏瘫、神经外科手术等引起的昏迷、瘫痪及智力 减退、记忆力障碍等疾病药物方面的应用；也可用于制备治疗冠心病、脉管炎等疾 病药物方面的应用。专利技术人通过大量基础实验和临床试验的验证，发现谷红注射液可以用于制备治 疗肺癌细胞的药物，尤其是对高转移人肺癌(PGCL3)，具有全方面的杀灭作用，在临床上也验证了谷红注射液对肺癌的治疗作用。具体实施方式下面用实验例进一步描述本专利技术，有利于对本专利技术及其优点、效果更好的了解, 但所迷实验例仅用于说明本专利技术而不是限制本专利技术。实验例1本研究探讨谷红注射液对高转移人肺癌(PGCL3)细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。1材料与方法1.1细胞抹和主要试剂克隆化高转移巨细胞癌细胞(PGCL3 ); RPMI-1640培养基是GIBCO公司 产品；层粘连蛋白(LN)、纤粘连蛋白(FN )和基底膜胶(matrigel);澳乙啶、吖 咬橙和Na-GBZ-l-Ly-sine-p-nitrophenyl ester为SIGMA公司产品，谷红注射液是阿 尔贝拉医药(中国)有限公司产品，为便于研究，将谷红注射液冷冻干燥得到无定 型粉末(以下简称药物)用于实验研究，TUNEL-POD试剂盒为武汉博士德生物 工程公司产品。1.2细胞培养和药物处理PGCL3细/i^种于含10%小牛血清pH7.4的RPMI-1 640培养基中，置37匸、 5%0)2培养箱中培养，至指数生长期进行实验。药物经细胞毒性试验和增殖抑制 试验确定药物浓度为2.5mg/L和5.0mg/L,设两个浓度的药物处理组和一个对照组， 每组3瓶，每瓶接种1 x 105个细胞，接种24h后加药。1.3细胞增殖抑制率测定和软琼脂集落形成试验2.5~5.0mg/L,药物处理96h，收集细胞经台盼蓝染色，进行细胞计数，计算细 胞增殖抑制率，细胞增殖抑制率=(对照组细胞数-药物组细胞数)/组细胞数x 100%。 软琼脂集落形成试验按常规方法进行。 1.4侵袭试验参照Albini等所用方法，将作为化李趋化物的NIH3T3细胞培养上清液0.2ml 加入Boyden小室的下室，在上下室之间用孔径8 m m的聚碳酸酯微孔滤膜分开，该 膜预先铺上Madrigel溶液50 p H含Matrigel 120 y g)，并在37C聚合30min以重建 基底膜。将各組已处理96h的细胞收集后分别加入上室，每室加0.5ml(含5x 104-细胞)，在37t:、 5%0)2培养箱孵育6h后取出滤膜，擦去未穿过的细胞，固定后 经Giemsa染色，计数穿膜的细胞数。1.5运动试验参照Kantor等12所用方法，除用7.5 m g/ml FN代替Matrigel溶液铺膜以促进细 胞粘着于膜上外，其余操作步骤和计数方法与侵袭试验相同。1.6 粘附试验在参照Kumagai等人[3所用的方法上进行改良，将各组处理96h的细胞制无 血清RPMI-1 640的细胞悬液，接种于已包被LN的96孔板的孔内，每孔含LN 10 H g，每孔加0.2 ml细胞悬液(含1000个细胞)置37匸、5% C02培养箱孵育60min 后，倒置显微镜下计数细胞总数，弃去未粘附的细胞，PBS轻洗2次，镜下计数粘 附细胞，计算粘附百分率。1.7组织蛋白酶B(CB)活性测定用酶动力学方法测定。取各组药物处理24h后换无血清培养液培养24h，取上清液100 u 1加激活液(舍 0.03M二硫苏糖醇和0.03MEDTA-NA2溶液)200iJl ,摇匀，25t:放置15min使酶激 活；加入3ml反应緩冲液(含0.003M EDTA-NA2的0.025M pH5.1醋酸緩冲液)， 混匀，加底物N+千氧羰基-L-赖氨酰对硝基苯酯溶液1000 u 1 ( 5mg/L的DMSO溶 液)，立刻混匀后每隔lmin测AA326nm值，至反应变慢为止，然后进行酶活性计 算。酶活性单位是25t:、 pH5.1的条件下，每分钟水解lpmol/L底物为一个酶活 性单位(U )。 U= ( AA326nm测-厶A326nm空白)/7.58x 10懇3。1.8 细胞凋亡测定检测细胞凋亡的吖啶橙(AO)-澳乙啶(EB)荧光双染法按Zhi-Jun等W的方 法进行，TUNELDNA片段末端标记法按武汉博士德生物工程公司TUNEL-POD试 剂盒说明书方法进行。1.9统计学处理用SPSS软件进行组间t检验。 2结果2.1 药物对PGCL3细胞增殖的影响2.5、3.5、4.5、5.5和6.5mg药物处理96h，PGCL3细胞增殖抑制率分别为29.6%、 43.2%，54.5°/。，84.1%和97.3%，经计算，药物的ICso为4.07mg/L，以下分别选取5.0mg/L 的药物作为实验浓度。2.2药物对PGCL3细胞软琼脂集落形成能力的影响2.5mg/L、 5.0mg/L，药物处理4d PGCL3细胞软琼脂集落形成数均低于对照组 (P<0.05)，见表l。2. 3药物对PGCL3细胞侵袭能力的影响2.5mg/L、 5.0mg/L药物处理4d后对PGCL3细胞的穿膜侵袭能力均有显著抑制 作用(P<0.05和P<0.001)且具有浓度依赖性。上述浓度药物处理2 h，细胞的侵袭 能力无明显改变(P>0.05),见表2、 3。2.4药物对PGCL3细胞运动能力和粘附能力的影响药物处理96h,观察PGCL3细胞的穿膜运动能力本文档来自技高网...

【技术保护点】
谷红注射液在制备治疗肺癌的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.谷红注射液在制备治...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玉梅，
申请(专利权)人：博安兄弟制药中国有限公司，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]