一种从黄藁本中纯化镰叶芹二醇的方法技术

本发明专利技术公开了一种从黄藁本中纯化镰叶芹二醇的方法，主要是通过乙醇提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱纯化，石油醚－乙酸乙酯梯度洗脱的步骤而得到的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属医药
，具体是涉及一种从植物黄藁本中纯化出单体化合物的方法。
技术介绍
黄藁本系伞形科滇芹属植物滇芹(Sinaodesisa yunnanensis Wolff)的根和根茎，在云南地区作为藁本入药。据资料记载“藁本，味苦，辛；性(温)。…治头疼痛，止诸头疼，明目。”临床主要用于风寒头疼、偏头疼。云南地区民间使用藁本的记载，首见于《滇南本草》“藁本，味苦辛，性温，升也。寒气客于巨阳之经，风寒邪流于巅顶之上；治头风疼痛，止诸头痛，明目。”有研究表明，当归中含有镰叶芹二醇(falcarindiol)，但是含量非常少，无法单独分离出来。而目前来说，化学合成也比较困难。因镰叶芹二醇具有较好的镇痛作用，如果能够从中药中提取出来用作药品，或者作为标准品用于药品的检测，都将有利于中药的研究和发展。专利技术人通过反复研究，终于专利技术了一种工艺简单、工业上可行的、从黄藁本中纯化镰叶芹二醇的方法。镰叶芹二醇的分子结构式如下
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种从黄藁本中纯化出镰叶芹二醇的方法。本专利技术是通过如下技术方案实现的(1)提取黄藁本药材粗粉，加95％乙醇回流提取，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加蒸馏水混悬均匀，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，合并流分，再以薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯洗脱，合并流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。具体来说，从黄藁本中纯化出镰叶芹二醇的方法为(1)提取黄藁本药材粗粉，加6-10倍量95％乙醇回流提取1-3小时，提取三次，合并提取液，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加入1-3倍于药材重量的蒸馏水混悬均匀，用1-3倍量的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上硅胶柱层析，用60-90℃石油醚-乙酸乙酯以10∶1，5∶1梯度洗脱，合并流分，再以薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯(2-8)∶1洗脱，合并流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。专利技术的优点(1)首次从中药黄藁本中提取纯化得到镰叶芹二醇。(2)提取纯化的工艺非常简单，无毒无副作用，工业化生产可行。具体实施例方式实施例1(1)提取黄藁本药材粗粉，加6倍量(V/W)95％乙醇回流提取1小时，提取三次，合并提取液，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加入1倍(V/W)于药材重量的蒸馏水混悬均匀，用等量的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上100目硅胶柱层析，用60℃石油醚-乙酸乙酯分别以10∶1，5∶1梯度洗脱，每个流分收集15ml，合并20-25流分，再以400目薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯4∶1洗脱，每个流分收集10ml，合并10-30个流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。实施例2(1)提取黄藁本药材粗粉，加10倍量(V/W)95％乙醇回流提取3小时，提取三次，合并提取液，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加入3倍(V/W)于药材重量的蒸馏水混悬均匀，用3倍的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上200目硅胶柱层析，用90℃石油醚-乙酸乙酯分别以10∶1，5∶1梯度洗脱，每个流分收集15ml，合并20-25流分，再以600目薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯8∶1洗脱，每个流分收集10ml，合并10-30个流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。实施例3(1)提取黄藁本药材粗粉，加8倍量(V/W)95％乙醇回流提取2小时，提取三次，合并提取液，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加入2倍(V/W)于药材重量的蒸馏水混悬均匀，用2倍的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上200目硅胶柱层析，用80℃石油醚-乙酸乙酯分别以10∶1，5∶1梯度洗脱，每个流分收集15ml，合并20-25流分，再以600目薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯6∶1洗脱，每个流分收集10ml，合并10-30个流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。镰叶芹二醇的鉴别纯度检查 采用薄层色谱法检查方法一 取对照品适量，精密称定，用乙腈溶解并配成2.0mg/ml的溶液；吸取30μl，点于硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯(3∶1)为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干；喷以5％的硫酸乙醇溶液，晾干，在105℃烘烤5分钟，斑点显黑色，Rf值为0.38；所用薄层板上无其它斑点显出。方法二 取上述“方法一”项下对照品溶液，吸取30μl，点于硅胶薄层板上，以石油醚(60-90℃)-丙酮(3∶1)为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干；喷以5％的硫酸乙醇溶液，晾干后，在105℃烘烤5分钟，斑点显黑色，Rf值为0.40；所用薄层板上无其它斑点显出。方法三 取上述“方法一”项下对照品溶液，吸取30μl，点于硅胶薄层板上，以氯仿(60-90℃)-丙酮(4∶1)为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干；喷以5％的硫酸乙醇溶液，晾干后，在105℃烘烤5分钟，斑点显黑色，Rf值为0.40；所用薄层板上无其它斑点显出。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定色谱条件Discovery C18柱(5μm，250mm×4.6mm ID)，C18预柱；流动相乙腈-水(55∶45)； 检测波长245nm；流速1.0ml/min；柱温室温；溶液的制备取对照品约16mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加乙腈定容至刻度，摇匀，即得(每1ml溶液中含对照品0.162mg)。测定法精密吸取对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，采用面积归一化法计算含量。结果如下表 镰叶芹二醇对照品含量测定数据 权利要求1.，其特征为(1)提取黄藁本药材粗粉，加95％乙醇回流提取，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加蒸馏水混悬均匀，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，合并流分，再以薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯洗脱，合并流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。2.如权利要求1所述的，其特征为(1)提取黄藁本药材粗粉，加6-10倍量95％乙醇回流提取1-3小时，提取三次，合并提取液，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。(2)萃取稠膏加入1-3倍于药材重量的蒸馏水混悬均匀，用1-3倍量的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。(3)取乙酸乙酯部位，上硅胶柱层析，用60-90℃石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，合并流分，再以薄层硅胶柱进行纯化，石油醚-乙酸乙酯(2-8)∶1洗脱，合并流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。全文摘要本专利技术公开了，主要是通过乙醇提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱纯化，石油醚－乙酸乙酯梯度洗脱的步骤而得到的。文档编号C07C33/048GK1858032SQ20061002742公开日2006年11月8日 申请日期2006年6月8日 优先权日2006年6月8日专利技术者玄振玉, 黄孝春 申请人:上海玉森新药开本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从黄藁本中纯化镰叶芹二醇的方法，其特征为：（１）提取：黄藁本药材粗粉，加９５％乙醇回流提取，减压浓缩至乙醇挥干，得深棕色稠膏。（２）萃取：稠膏加蒸馏水混悬均匀，用乙酸乙酯萃取，减压浓缩至稠膏，得乙酸乙酯部位。（３ ）取乙酸乙酯部位，上硅胶柱层析，用石油醚－乙酸乙酯梯度洗脱，合并流分，再以薄层硅胶柱进行纯化，石油醚－乙酸乙酯洗脱，合并流分，减压浓缩至干，得镰叶芹二醇。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：玄振玉，黄孝春，孙艺勇，刘永俊，
申请(专利权)人：上海玉森新药开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]