一种降低药物依赖性注射液及其制备方法技术

一种降低药物依赖性的注射液是由河豚分离的河豚毒素（Ｔｅｔｒｏｄｏｔｏｘｉｎ　ＴＴＸ）和金针菇多糖组成，ＴＴＸ和多糖按比例混合后，以无菌水配制。经过微孔滤膜过滤除菌、冲氮、抽真空、最后封管成针剂。本药剂能够降低８０％以上的吸毒者对生物碱类成瘾性药物的依赖性并修复免疫损伤机能和性功能，是一种良好的戒毒药剂。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种戒毒注射液及其制备方法，具体是以从河豚中分离的毒素 和金针菇多糖为主要成分的降低吸毒者对成瘾性药物依赖性的注射液及其制 备方法。技术背景从河豚中分离出河豚毒素(Tetrodotoxin TTX)制成降低药物依赖性的注 射液，从而达到降低吸毒者对生物碱类成瘾性药品依赖性的目的。河豚毒素属小分子量非蛋白质的神经毒素，河豚毒素药用价值的开发是海 洋生物活性研究中进展最为迅速的领域，也是一个亟待开发的高效益的高技术 产业。河豚毒素是选择性极高的快(Na+)通道阻断剂，能阻止Na+进入细胞， 因而可阻止神经、肌肉产生兴奋活动。TTX使豚鼠心肌细胞膜的零位相最大 上升速率显著降低。零位相斜度变小，甚至Na+通道完全阻断。动作电位的形 状变为类似慢反应电位，动作电位时程縮短，波幅减少。据报道，TTX阻断 轴突传导作用强。经小鼠扭体法及热板法实验表明，镇痛作用极强，作用缓慢 而持久，并且未见成瘾。因此河豚毒素是降低患者对毒品依赖性的理想药物。目前较为有效的分离提取工艺主要包括浸提、浓縮、干燥、柱层析、超滤、 离心等技术，但是由于河豚毒素成分复杂，临床应用对其分离纯化要求高，因 而开发一种提纯率高，有利于工业化大规模生产的河豚毒素分离纯化技术尤为 重要。本专利技术的目的是提供一种降低药物依赖性的注射液，即从河豚中分离纯化 出纯度高、对酸、碱、温度稳定性好的河豚毒素，将河豚毒素与多糖配合，制 备出无成瘾性的注射药物。本专利技术涉及的TTX纯化工艺具有成本低、收率高、 操作简单的优点，适合工业大规模应用。
技术实现思路
本专利技术所述的降低药物依赖性的注射液，是由河豚分离的河豚毒素和金针菇提取的金针菇多糖组成。一种降低药物依赖性的注射液是由以下方法制成的将河豚毒素(TTX)和金针菇多糖按1-2: 1-2比例混合，以无菌水配制， 经过微孔滤膜过滤除菌、冲氮，抽真空，最后封管成针剂。 河豚毒素通过如下的方法提取在高速组织捣碎机中将河豚内脏(卵巢和肝脏)和无水甲醇按重量比l: 2-4混合，加入含5%-15%硫酸的甲醇调节pH为1.0-2.0，室温下搅拌2-4小时， 过滤，用含5%-15%硫酸的甲醇提取残渣，过滤；将滤液与丙酮按体积比1:4-6混合、搅拌，用稀氢氧化铵调节pH到6.0-8.0， 搅拌l-2小时，使悬浊液沉降4-6小时，以2000-3000r/min速度离心10-30分 钟，保留离心上清液；将离心上清液进行氧化铝柱层析，过柱后以蒸馏水冲柱，再以60-8(TC的 蒸馏水洗氧化铝，得到3个含毒组分过柱液、冲柱液和洗氧化铝液；各含毒组分分别以醋酸酸化，调节pH到1.0-3.0，在热水浴上进行真空浓 縮，浓縮至100-3O0ml，出现油状残余物，加入0.1-0.3ml水、l-3ml无水甲醇、 4-12ml无水乙醚，4000-6000r/min离心15-30分钟，以3%-10%醋酸溶解离心 管管底的沉淀，将溶液移入较大的容器，加入氨水，调节pH为7.0-11.0，出 现沉淀，15000-20000r/min离心15-30分钟，所得沉淀用蒸馏水洗5次，无水 甲醇洗2次，并再次溶于0.5ml-1.5ml稀醋酸溶液中，滤出不溶物，加入1.5-4.5ml 无水乙醚，放置过夜，产生结晶的河豚毒素；将结晶的河豚毒素进行冷冻干燥。如上所述的金针菇多糖可以通过如下所述的方法制成将金针燕菌丝体在全自动发酵罐中发酵后进行多糖提取，金针菇菌丝体经 发酵后，样品泡浸在质量分数为90%-99%乙醇中，然后用75%-85%乙醇连续 提取三次，每次22-26小时，将提取过的材料用50-6(TC的酒精清洗，然后放 在铅制器皿中烘干，经葡聚糖凝胶G200层析纯化制成金针菇多糖。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术作进一步详细的描述。 实施例1本实施例是提取河豚毒素的实例。在高速组织捣碎机中将260克的河豚内脏(卵巢和肝脏)和640g、密度 为0.79g/ml的无水甲醇一起混合匀化，加入含10n/。硫酸的甲醇调节pH为1.5， 室温下搅拌3小时，过滤，用325ml含10%硫酸的甲醇提取残渣，过滤；取400 ml滤液与2000 ml丙酮一起搅拌，用稀氢氧化铵调节pH到7.0, 搅拌1.5小时，使悬浊液沉降5小时，以2000r/min速度离心IO分钟，保留离 心上清液；将离心上清液进行氧化铝柱层析，过柱后均以200ml蒸馏水冲柱，再以 200ml、 6(TC的蒸馏水洗氧化铝，得到3个含毒组分过柱液、冲柱液和洗氧 化铝液；各含毒组分分别以醋酸酸化，调节pH到2.0，在热水浴上进行真空浓縮， 浓縮至200ml左右，出现油状残余物，加入0.2ml水、2ml无水甲醇、8ml无 水乙醚，4000r/min离心15分钟，以5%醋酸溶解离心管管底的沉淀，将溶液 移入较大的容器，加入氨水，调节pH为9.0，出现沉淀，15000r/min离心15 分钟，所得沉淀用lml蒸馏水洗5次，lml无水甲醇洗2次，并再次溶于lml 稀醋酸溶液中，滤出不溶物，加入3ml无水乙醚，放置过夜，产生结晶的河豚 毒素；将结晶的河豚毒素进行冷冻干燥。 实施例2本实施例是提取河豚毒素的实例。在高速组织捣碎机中将300克的河豚内脏(卵巢和肝脏)和600g、密度 为0.79g/ml的无水甲醇一起混合匀化，加入含5。/。硫酸的甲醇调节pH为1.0， 室温下搅拌2小时，过滤，用3501111含5%硫酸的甲醇提取残渣，过滤；取400 ml滤液与1600 ml丙酮一起搅拌，用稀氢氧化铵调节pH到6.0，搅拌1.5小时，使悬浊液沉降5小时以上，以2500r/min速度离心20分钟，保 留离心上清液；将离心上清液进行氧化铝柱层析，过柱后均以200ml蒸馏水冲柱，再以 200ml、 60'C的蒸馏水洗氧化铝，得到3个含毒组分过柱液、冲柱液和洗氧 化铝液；各含毒组分分别以醋酸酸化，调节pH到l.O，在热水浴上进行真空浓縮， 浓縮至100ml左右，出现油状残余物，加入0.1ml水、lml无水甲醇、4ml无 水乙醚，5000r/min离心20分钟，以3%醋酸溶解离心管管底的沉淀，将溶液 移入较大的容器，加入氨水，调节pH为7.0，出现沉淀，18000r/min离心20 分钟，所得沉淀用lml蒸馏水洗5次，lml无水甲醇洗2次，并再次溶于0.5ml 稀醋酸溶液中，滤出不溶物，加入1.5ml无水乙醚，放置过夜，产生结晶的河 豚毒素；将结晶的河豚毒素进行冷冻干燥。 实施例3本实施例是提取河豚毒素的实例。在高速组织捣碎机中将300克的河豚内脏(卵巢和肝脏)和1200g、密度 为0.79g/ml的无水甲醇一起混合匀化，加入含15%硫酸的甲醇调节pH为2.0， 室温下搅拌4小时，过滤，用500ml含15^硫酸的甲醇提取残渣，过滤；取500 ml滤液与3000 ml丙酮一起搅拌，用稀氢氧化铵调节pH到8.0， 搅拌2小时，使悬浊液沉降6小时，以3000r/min速度离心30分钟，保留离 心上清液；将离心上清液进行氧化铝柱层析，过柱后均以500ml蒸馏水冲柱，再以 500ml、 6(TC的蒸馏水洗氧化铝，得到3个含毒组分过柱液、冲柱液和洗氧 化铝液；各含毒组分分别以醋酸酸化，调节pH到3.0，在热水浴上进行真空浓縮， 浓縮至300ml左本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种降低药物依赖性注射液，其特征是该注射液由从河豚中分离的河豚毒素和金针菇多糖按重量比１－２∶１－２组成。

【技术特征摘要】
1、一种降低药物依赖性注射液，其特征是该注射液由从河豚中分离的河豚毒素和金针菇多糖按重量比1-2∶1-2组成。2、 权利要求1所述的降低药物依赖性注射液的制备方法，其特征在于将 河豚毒素和金针菇多糖按1-2: 1-2比例混合，以无菌水配制，经过微孔滤膜过滤除菌、冲氮，抽真空，最后封管成针剂。3、 权利要求2所述的方法，其特征在于所述河豚毒素通过如下步骤分离 制得(1) 在高速组织捣碎机中将河豚内脏和无水甲醇按重量比1: 2-4混合， 加入含5Q/。-15n/。硫酸的甲醇调节pH为1.0-2.0，室温下搅拌2-4小时，过滤， 用含5%-15%硫酸的甲醇提取残渣，过滤；将滤液与丙酮按体积比1:4-6混合、搅拌，用稀氢氧化铵调节pH到6.0-8.0， 搅拌l-2小时，使悬浊液沉降4-6小时，以2000-3000r/min速度离心10-30分 钟，保留离心上清液；(2) 将离心上清液进行氧化铝柱层析，过柱后以蒸馏水冲柱，再以60-80 'C的蒸馏水洗氧化铝，得到3个含毒组分过柱液、冲柱液和洗氧化铝液；(3) 各含毒组分分别以醋酸酸化，调节pH到1.0-3.0，...

【专利技术属性】
技术研发人员：林德球，陈豪贵，钟斌，
申请(专利权)人：林德球，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]